Yaohai Bio-Pharma PIE نظام (ایکسونز اور انٹرونز کے ہمراہ) پر مبنی circRNA تیار کرتا ہے، جو type I انٹرون کی خودکار اسپلائیس فنکشن پر مستند ہوتا ہے تاکہ RNA کی حلقہ بناؤں۔ PIE ساخت T4 td ژن یا ماہی tRNA پریکرسر ژن کا استعمال کرتی ہے، اور ترتیب یہ ہے:
RNA انٹرون اور سپورٹنگ ایکسون فریگمنٹ کو دو حصوں میں تقسیم کیا جاتا ہے (5' انتہا اور 3' انتہا)، جہاں 5' انتہا سیکوئنس کو نشانہ سیکوئنس کے آخر میں منتقل کیا جاتا ہے، 3' انتہا سیکوئنس کو نشانہ سیکوئنس کے آگے داخل کیا جاتا ہے، اور نشانہ ژن سیکوئنس کو درمیان میں داخل کیا جاتا ہے۔
GTP کی کیٹلیسٹکейств میں، PIE ساخت درج ذیل انٹروں کے علاوہ تسلسلات کی سائیکلائزیشن کو جانچتا ہے۔ سائیکلائزیشن شرح کی معقول وضاحت کے ساتھ، Yaohai Bio-Pharma کو زیادہ سے زیادہ 80 فیصد کی سائیکلائزیشن شرح کے ساتھ 4 کیلوبیس کے تک تسلسلات کی سائیکلائزیشن حاصل کرنے میں کامیاب رہ سکتا ہے۔
شکل 1. PIE نظام پر مبنی circRNA کی لا بیکس آؤٹ سائیکلائزیشن
سروسز تفصیلات
| عمل |
اختیاری سروس |
سروس تفصیلات |
دلواری دوران (کام کرنے والے دن) |
| circRNA تسلسل ڈیزائن اور اپٹمائزیشن |
کوڈنگ سیکوئنسز کی ڈیزائن اور اپٹیماائزیشن |
CDS تسلسل مطابقت
CDS کوڈن اپٹیمائزیشن
|
1 |
| غیر کوڈنگ تسلسلات کا ڈیزائن اور مختصر کرنا |
انٹرون اور ایکسون سیکوئنس کا ڈزائن اور اپٹیمائزیشن
ہومولوگس آرم سیکوئنس کا ڈزائن اور اپٹیمائزیشن
اسپیسر سیکوئنس کا ڈزائن اور اپٹیمائزیشن
|
1-2 |
MRNA سیکوئنس ڈیزائن کے لیے عام استراتیجیں
| CircRNA کمپونینٹس |
حیاتی فنکشنز |
اپٹیمائزیشن کی استراتیجیں |
| دو طرفوں والے انٹرون اور ایکسون سیکوئنس |
GTP-کیٹلیزڈ انٹرون خود سپلائیشن برائے انٹرون کے باہر سیکوئنس کی سرکلیشن. |
ٹی 4 ٹی ڈی جین یا فش آئل ٹی آر این اے پری کرسور جین کے مطابق ڈیزائن کیا گیا ہے۔ |
| کوڈنگ |
آئریس |
اندریں رائبوسوم شناخت سائٹ جو سرک آر این اے کی ترجمانی کو نظارہ دار کرتی ہے۔ |
مختلف وائرال ذرائع، مثلاً ایم سی وی، سی وی بی 3 ذرائع سے اندریں رائبوسوم انٹرنی سائٹ (آئریس) تسلسلات کی صاف کردگی۔ |
| CDS |
پروٹین کوڈنگ علاقے، پیشگیری کے لیے انتیجن، اینٹی بডی یا دوسرے فنکشنل پروٹین کوڈنگ تسلسلات۔ |
کوڈن اپٹیمائزیشن ترجمانی کی سطح کو بڑھاتی ہے؛ کچھ غیر اپٹیمال کوڈن پروٹین فولڈنگ میں کام کر سکتے ہیں۔ |
| غیر کوڈنگ |
غیر کوڈنگ تسلسلات |
گیندے یا پروٹین کی نظارہ بندی کے لئے miRNAs یا پروٹینز کو گاہت دیں۔ |
MiRNAs یا پروٹینز کے لئے خاص جڑنے والے مقامات کو گاہت کرنا جڑنے والے مقام کے تسلسل کو دہرانا سکتا ہے۔ |
ہمارے خصوصیات
- مناسب اپٹیمائزیشن کی رistrategies کے ساتھ PIE Cyclization System کی منظم کرنے کے لئے اس سے زیادہ 80 فیصد سائكلائزیشن ریٹ حاصل کیا جا سکتا ہے؛
- آخری دور کی CDS Optimization ٹیم کی تعاون کے ساتھ مختصر AI الگورتھم ٹیم کے ساتھ CDS علاقے کوڈون کی اپٹیمائزیشن مکمل کریں؛
- بالکل منظم اور مکمل پروسس circRNA کو بالا سائیکلائزیشن کفاءت، بالا ثبات اور بالا ترجمانی کفاءت کے ساتھ حاصل کیا جا سکتا ہے۔
کیس سٹڈی
Yaohai Bio-Pharma نے کنٹرول پrouduct میں مصنوعی سبز فلوئریش پروٹین (eGFP) circRNA لانچ کیا، جو PIE نظام پر مبنی ہے تاکہ RNA کی سائیکلائزیشن کو حاصل کیا جا سکے۔
ایک سیکھری معمولی ٹرانس فیکشن ریجنٹ کا استعمال کرتے ہوئے، eGFP circRNA کو 293T سیلز میں منتقل کیا جاتا ہے، اور 24 گھنٹوں کے بعد eGFP (سبز) فلورسینٹ سگنل دیکھا جا سکتا ہے، جو 48 گھنٹوں کے بعد مزید مضبوط ہوتا ہے۔ ٹرانس فیکشن کے بعد ساتویں دن اور چودہویں دن تک فلورسینٹ سگنل دیکھا جا سکتا ہے۔
EGFP circRNA کی آزمائشی بیرونی عبارت کی تصدیق
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
