MRNA کی جماعتی تولید کے بارے میں، ان وٹر شدہ ٹرانسکرپشن (IVT) ایک زیادہ کارآمد اور پختہ طریقہ ہے۔ IVT ریکشن میں T7 پروموٹر شامل پلاسمڈ ڈین اے کو ٹیمپلیٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے، اور نیوکلیوسائیڈ ٹرایفاسفیٹس (NTPs) کو سبسٹریٹ کے طور پر استعمال کرتے ہوئے T7 آر این اے پولیمریز کی موجودگی میں ایم ایچ اے سنتھیسس کیا جاتا ہے۔
نیوکلیوٹائڈ مডیفیکیشن ایک ٹیکنالوجیکل بریک تھراؤ ہے جو mRNA کی تلاش میں استعمال ہوتی ہے، جہاں غیر مڈیفائرڈ mRNA مolecules انٹروسلیئر RNA سینسرز کے ذریعہ شناخت کیے جاتے ہیں تاکہ پیداواری ایمنٹی کو فعال کیا جا سکے۔ mRNA کی in vivo Immunogenicity اور ترجمانی کارکردگی کی غور کرتے ہوئے، IVT پروسس معمولاً کچھ قسم کے مڈیفائرڈ NTPs کو استعمال کرتا ہے، اور عام مڈیفائرڈ نیوکلیوٹائڈز پseudo-uridine (Ψ)، N1-methyl-pseudo-uridine (N1Ψ) اور 5-methylcytosine (5mC) ہوتے ہیں۔
MRNA کی درجہ بندی کی پروسس
In vitro transcription (IVT) Reaction diagram
سروسز تفصیلات
اختیاری سروس |
سروس تفصیلات |
دلواری دوران (کام کرنے والے دن) |
In vitro transcription (IVT) |
IVT, in vitro transcription |
1 |
| نیوکلیوٹائڈ مڈیفیکیشنز (Ψ/N1Ψ/5mC، وغیرہ) |
| ڈی این اے ٹیمپلیٹ کو ہٹانا (ڈینیز I) |
IVT شرائط کی بہتری - اختیاری |
آئی وی ٹی ریکشن کمپوننٹس کا ڈیزائن اور مصنوعی ترقی |
2-5 |
ہمارے خصوصیات
- تعدیل شدہ نوکلیوٹائڈ ترمیم کے استریجیز
جیو میں ایم ایچ ای سٹیبیلٹی اور پروٹین اظہار میں بہتری کریں۔
- سلیس ٹیسٹ ڈیزائن اور اپٹیمائزیشن
ایم ایچ ای فریگمنٹ کی تیاری 10 کی بی تک کی جا سکتی ہے۔
آئی وی ٹی ریکشن شرائط کو مصنوعی طور پر بہتر بنातے ہوئے، لکیری بنانے کی شرح 1:200 تک پہنچ جاتی ہے۔
ایک تجربتی محیط اور استعمال پذیرات کے ذریعہ RNase کی شدید کنٹرول سے mRNA کے زوال کو مividadل طور پر روکا جा سکتا ہے۔
کیس سٹڈی
موجودہ IVT ریکشن سسٹم تقریباً 100 nt کی لمبائی کے سینتھیٹک سسٹمز کے لئے مناسب طور پر ماخوذ کیا گیا ہے، اس کی بنیاد mRNAs کی دلچسپی نہیں ہے۔ mRNA سیکوئنس کی لمبائی کے ساتھ بڑھتی ہیں، اسے ٹرانسکرپٹ کرنے میں مشکل ہوتی ہے اور زوال کے لئے زیادہ محفوظ ہوتی ہے۔
تقریباً 10 کب کی لمبائی کے سفارشی mRNA سیکوئنسز تیار کرنے کے لئے، Yaohai Bio-Pharma نے مANDOMی تجربتی ڈیزائن، ریکشن شرائط کی مستقیم_optimization_اور RNase کی شدید کنٹرول کے ذریعہ ایک μg لائنیارائزڈ پلاسمڈ کے بعد درمیانی طور پر صاف کردہ mRNA پrouducts کی 135 μg حاصل کیں۔
mRNA شناخت (اگاروس گیل الیکٹروفریسس)
UR
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
BN
