N-گلائیکن پروفائلنگ بائو فارمیسیٹلز کے تولید کے لئے ضروری ہے۔ Yaohai Bio-Pharma نے Lیکوڈ کروماتوگرافی-مس سپیکٹرومیٹری (LC-MS) کا استعمال کرتے ہوئے ریلیز اور لابل گلائیکنز کے لئے N-گلائیکن پروفائلنگ سروس فراہم کیا ہے۔ N-گلائیکنز نمونے تیار کرنے کے عام قدمات میں GP پروٹین کا پیچھانا، دی-گلوسیلیشن، پرائیفیکیشن، لابلنگ/ڈرائیوٹائزیشن، اور Solid Phase Extraction (SPE) شامل ہیں۔
ہم مختلف بڑے مolecules کی پروٹین سٹرکچرل کاریکٹرائزیشن میں شریک رہے ہیں، جن میں ریکومبنٹ سبیونٹ واکسن، نانوبائیز/VHHs/ سینگل-ڈومین اینٹی بڈیز (sdAbs)، اینٹی بڈی فریگمنٹس، هارمونز/پیپٹائیڈز، سائٹوکائنز، گروتھ فیکٹرز (GF)، انزایمز، کالاجینز، اور دیگر شامل ہیں۔
N-گلائیکن پروفائلنگ کے لئے منظمیتی متطلبات
ایچ آئی چھ ٹیوی کے مطابق، 'گلائیکو پروٹینز کے لئے، کاربوہائیڈریٹ کان텐ٹ (نیٹرل سگرز، امینو سگرز، اور سیالک اسید) کی تجویز کی جاتی ہے۔ اس کے علاوہ، کاربوہائیڈریٹ چینز کی ساخت، اولیگوساکیرائڈ پیٹرن (انتینی پروفائل)، اور پولیپیپٹائیڈ چین کے گلائیسسیشن سائٹ(s) کو تحلیل کیا جاتا ہے جتنے ممکن ہو۔
تحلیلی طریقہ
تجزیہ |
طریقے |
N-گلیکن پروفائリング |
ریلیز اور لنڈ مارے گئے گلائیکنز کا لکوئیڈ کرومیٹوگرافی-مس سپیکٹرومیٹری (LC-MS) تجزیہ |
روند
1. پیپٹائیڈ N-گلائیسسیڈیز F (PNGase F) کے ساتھ انزائیمیٹک گلائیکن ریلیز
2. ریلیز شدہ گلائیکنز کو 2-امینوبینزیمید (2-AB) سے دروازیشن
3. اگر بڑی مقدار میں دترجینٹس، غیر وولٹائیل سیلٹس، یا فری ایمینو گروپس والے مواد موجود ہوں تو TSK Amide - 80 کالم پر حصہ لیا گیا ن-گلائیکنز کی صفائی
4. فلوئریسنت 2-امینوبینزیمید (2-AB) سے لنڈ کرنے کے ذریعے
5. لنڈ شدہ N-گلائیکنز کا LC-MS تجزیہ
6. ڈیٹا تحلیل