ریکومبیننٹ پروٹین اکثر بے نقاب امینو ایسڈ سائیڈ چینز، جیسے ٹرپٹوفان (Trp) اور میتھیونین (Met) کے آکسیکرن کو دیکھتے ہیں، جو پروٹین کی فزیکو کیمیکل خصوصیات کو تبدیل کرتے ہیں۔ یہ تبدیلیاں متاثرہ پروٹین کے حیاتیاتی افعال کو تبدیل کرنے میں معاون ثابت ہو سکتی ہیں، جیسے بائنڈنگ کا نقصان، انزیمیٹک سرگرمی میں کمی، غیر متوقع طور پر تیزی سے کلیئرنس۔ پروٹین آکسیڈیٹیو رد عمل کے لیے اہم اہداف ہیں کیونکہ وہ آکسیڈنٹس کے ساتھ تیزی سے رد عمل ظاہر کرتے ہیں اور خلیات، خلوی بافتوں اور جسمانی رطوبتوں میں وافر مقدار میں ہوتے ہیں۔
لہذا، کامیاب بائیو فارماسیوٹیکل ترقی کے لیے پروٹین آکسیکرن کی نگرانی اہم ہے۔
Yaohai Bio-Farma امینو ایسڈ آکسیڈیشن کے تجزیہ کی خدمت پیش کرتا ہے، جو آپ کو مائع کرومیٹوگرافی-ماس سپیکٹرو میٹری (LC-MS) کے ذریعے امینو ایسڈ آکسیڈیشن کا تعین کرنے کی اجازت دیتا ہے۔
ہم مختلف بڑے مالیکیولز کی پروٹین کی ساختی خصوصیات میں شامل رہے ہیں، جن میں ریکومبیننٹ سبونیٹ ویکسینز، نینو باڈیز/ وی ایچ ایچز/ سنگل ڈومین اینٹی باڈیز (ایس ڈی اے بی ایس)، اینٹی باڈی فریگمنٹس، ہارمونز/پیپٹائڈس، سائٹوکائنز، گروتھ فیکٹرز (جی ایف)، انزائمز، کولاجز، وغیرہ
امینو ایسڈ آکسیڈیشن کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ICH Q6B کے رہنما خطوط کے مطابق، آکسائڈائزڈ شکلوں کو کرومیٹوگرافک، الیکٹروفوریٹک اور/یا دیگر متعلقہ تجزیاتی طریقوں (مثال کے طور پر، ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی (HPLC)، کیپلیری الیکٹروفورسس، ماس اسپیکٹروسکوپی، سرکلر ڈیکروزم) کے ذریعے تلاش کیا جا سکتا ہے۔
تجزیاتی طریقے
| تجزیہ |
طریقے |
| امینو ایسڈ آکسیکرن |
LC-MS، ریورسڈ فیز ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی (RP-HPLC) یا ہائیڈروفوبک انٹرایکشن کرومیٹوگرافی ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی (HIC-HPLC) اور ماس اسپیکٹومیٹری |
تجزیاتی طریقہ کار
1. نمونہ کی تیاری
2. LC-MS
3. ڈیٹا تجزیہ
Tryptophan (Trp) کی باقیات خاص طور پر آکسیڈیشن کا شکار ہوتی ہیں کیونکہ ری ایکٹیو آکسیجن پرجاتیوں کے ساتھ خوشبو دار انڈول کی زیادہ رد عمل کی وجہ سے۔ Trp آکسیڈیشن کے لیے Trp کی باقیات کی کچھ نمائش کی ضرورت ہوتی ہے جو عام طور پر پروٹین کے تین جہتی ڈھانچے میں دفن ہوتے ہیں۔
تاہم، جب Trp کی باقیات کو آکسائڈائز کیا جاتا ہے، تو وہ اصل Trp سے بہت مختلف خصوصیات کے ساتھ مختلف مصنوعات میں تبدیل ہو سکتے ہیں۔ Trp آکسیڈیشن کا سب سے عام راستہ N-formylkinurenine کی تشکیل (بڑے پیمانے پر فرق: +32) شامل ہے۔
ایک اور عام طور پر آکسائڈائزڈ امینو ایسڈ میتھیونین ہے۔ میٹ کی باقیات میں سلفر ایٹم ایک یا دو آکسیجن ایٹموں کو قبول کر سکتا ہے جو سلفوکسائڈ (بڑے پیمانے پر فرق: +16) یا سلفون (بڑے پیمانے پر فرق: +32) کی تشکیل کا باعث بنتا ہے۔ یہ ترمیم نسبتاً عام ہے کیونکہ عام طور پر میٹ کی اونچی سطح کی نمائش ہوتی ہے۔
UR
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نہیں
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
BN
