Glutamine اور asparagine side chains deamidation پروٹین بائیو فارماسیوٹیکل کی خصوصیات پر اثرات کے لحاظ سے ایک عام ترمیم ہے۔ گلوٹامین کی باقیات میں ڈیامیڈیشن ہوسکتی ہے، لیکن عام طور پر بہت کم شرح پر۔ ڈیامیڈیشن کی شرح درجہ حرارت، پی ایچ، مقامی پروٹین کی ساخت اور امائنوسیل کی باقیات سے متاثر ہوتی ہے۔
Yaohai BioPharma امینو ایسڈ ڈیامیڈیشن ٹیسٹنگ سروس پیش کرتا ہے، جو آپ کو مائع کرومیٹوگرافی-ماس سپیکٹرو میٹری (LC-MS) کے ذریعے امینو ایسڈ ڈیامیڈیشن کا پتہ لگانے کی اجازت دیتا ہے۔
ہم مختلف بڑے مالیکیولز کی پروٹین کی ساختی خصوصیات میں شامل رہے ہیں، بشمول ریکومبیننٹ سبونیٹ ویکسینز، نینو باڈیز/وی ایچ ایچز/ سنگل ڈومین اینٹی باڈیز (ایس ڈی اے بی ایس)، اینٹی باڈی فریگمنٹس، ہارمونز/پیپٹائڈس، سائٹوکائنز، گروتھ فیکٹرز (سی ایف)، انزائمز، کولاجز، وغیرہ
امینو ایسڈ ڈیامیڈیشن کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ICH Q6B کے رہنما خطوط کے مطابق، deamidated شکلوں کو کرومیٹوگرافک، الیکٹروفوریٹک اور/یا دیگر متعلقہ تجزیاتی طریقوں سے پتہ چلا اور ان کی خصوصیات کی جا سکتی ہے۔
تجزیاتی طریقے
تجزیہ |
طریقے |
Deamidation |
مائع کرومیٹوگرافی-ماس سپیکٹرو میٹری (LC-MS) |
طریقہ کار
مثال کے طور پر، aspartic deamidation
1. انزیمیٹک ہاضمہ
2. ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی (HPLC) حالت کے تحت LC-MS
3. ڈیٹا تجزیہ
Asparagine deamidation ایک succinimide انٹرمیڈیٹ (Suc) کے ذریعے ہوتا ہے، جو ریسیمائزیشن اور ہائیڈولیسس کے لیے حساس ہوتا ہے، جس سے چار Asp isomers حاصل ہوتے ہیں، جن میں L-Asp، L-IsoAsp، D-Asp، اور D-IsoAsp شامل ہیں۔
نظریہ میں، Gln deamidation Asn deamidation کی طرح کے عمل کے ذریعے چار متعلقہ Glu isomers پیدا کر سکتا ہے۔
ہائی ریزولونگ ماس سپیکٹرو میٹری آسانی سے Asn/Gln پر مشتمل پیپٹائڈس اور ان کے متعلقہ ڈیامیڈیٹڈ ہم منصب Asp/Glu کے درمیان 1-Da ماس فرق کی نشاندہی کرتی ہے۔