اپ اسٹریم پروسیس ڈیولپمنٹ کی اہمیت
اپ اسٹریم پروسیس (یو ایس پی)، جسے ابال کا عمل بھی کہا جاتا ہے، اپ اسٹریم بائیو پروسیسنگ کے ابتدائی مراحل میں سے ایک ہے۔ مائکروبیل ابال کا عمل اعلی کثافت سیل کلچر اور خارجی جین کے اظہار کے لئے اہم ہے، جو حیاتیات کی پیداوار اور لاگت کو براہ راست متاثر کرتا ہے۔
حیاتیات کی ترقی کے ابتدائی مراحل میں (پری کلینیکل یا فیز 1/2)، توجہ درمیانی پیداوار کے ساتھ توسیع پذیر جانوروں سے پاک عمل کو تیار کرنا اور مصنوعات کے معیار کے تمام معیارات پر پورا اترنا ہے۔
آخری مراحل میں (مرحلہ 3 یا تجارتی)، ہم پیداوار، مضبوطی، اسکیل ایبلٹی، اور تولیدی صلاحیت پر توجہ مرکوز کریں گے، جس سے لاگت سے موثر عمل پیدا ہوگا۔ ان مسائل کو حل کرنے والی سرگرمیاں عمل کی خصوصیات اور عمل کی توثیق کے مطالعہ ہیں۔ دریں اثنا، ڈیزائن کے لحاظ سے معیار (QbD) اور تجربات کے ڈیزائن (DoE) ٹولز کو عام طور پر لاگو کیا جاتا ہے۔
مطلوبہ الفاظ: عمل کی ترقی، اصلاح، اور توثیق، ابال کا عمل، مائکروبیل سیل ابال، بیکٹیریا ابال، خمیر ابال، اعلی کثافت ابال، انجینئرڈ تناؤ ابال
درخواست: بائیو فارماسیوٹیکل انڈسٹری، انسانی ادویات، جانوروں کی دوا، ویکسین، دوبارہ پیدا ہونے والے بڑے مالیکیول بایولوجکس، ریکومبیننٹ بائیولوجکس، بائیولوجیکل ریجنٹ
یاوہائی بائیو فارما کے یو ایس پی حل
مائکروبیل ابال کے 10 سال سے زیادہ کے تجربات سے فائدہ اٹھاتے ہوئے، Yaohai Bio-Farma کے پاس ابال کے عمل کے چیلنجوں کو حل کرنے میں مدد کرنے کی مہارت ہے۔ ہم تیزی سے اعلی کثافت کے ابال کی حکمت عملی قائم کر سکتے ہیں۔ ایسریچیا کولئی (E. کولی) periplasmic سراو، intracellular soluble یا inclusion body expression، اور Yeast extracellular یا intracellular expression۔
ہماری دستیاب عمومی ابال کی ترقی کی خدمات میں شامل ہیں:
- فیڈ بیچ موڈ میں 7L کے چھوٹے پیمانے پر ابالنے کے عمل کا ڈیزائن
- 7L fermenters میں تین بیچ کے عمل کی توثیق
- درمیانی عمل کا پیمانہ 30L/70L تک
ہم ون ٹائم-اے-فیکٹر (OTAF) یا ڈیزائن-آف-تجربات (DoE) کا استعمال کرتے ہوئے مطلوبہ پیداوار یا تناسب کو پورا کرنے کے لیے لچکدار طریقے سے ملٹی پیرامیٹر کی اصلاح کر سکتے ہیں۔
کلیدی ابال کے پیرامیٹرز درج ذیل ہیں:
جانوروں سے پاک ابال میڈیا کمپوزیشنز
اینٹی بائیوٹک سے پاک یا نہیں، انوکولم والیوم
نمو کا درجہ حرارت، پی ایچ، تحلیل شدہ آکسیجن (DO) کی سطح
فیڈنگ موڈ (مثال کے طور پر، فیڈ بیچ)
inducer کا ارتکاز (مثال کے طور پر، IPTG، میتھانول)، انڈکشن پوائنٹ (سیل گیلے وزن/OD600)،
انڈکشن درجہ حرارت، انڈکشن ٹائم
وغیرہ شامل ہیں.
سروس کی تفصیلات
| سروسز |
عمل کے بہاؤ |
| شیک فلاسک میں کاشت (500 ملی لیٹر) |
جانوروں سے پاک میڈیا کی تیاری → مائکروبیل بیج کی کاشت → شیکر میں کاشت → انڈکشن → فصل |
| فرمینٹر میں کاشت (7 L) |
جانوروں سے پاک میڈیا کی تیاری → مائکروبیل بیج کی کاشت → 7L بائیوریکٹر میں اعلی کثافت سیل ابال → انڈکشن → فصل |
| پروٹین/پیپٹائڈس کا کوالٹی کنٹرول |
پری ٹریٹمنٹ انٹرا سیلولر گھلنشیل اظہار: مائکروبیل سیلز کی کٹائی اور ریسسپشن → الٹراسونک کرشنگ → سیل ملبہ ہٹانا → خام نچوڑ انکلوژن باڈی ایکسپریشن: مائکروبیل سیلز کی کٹائی اور ریسسپشن → الٹراسونک کرشنگ → انکلوژن باڈی کی تیاری ایکسچینج → خام عرق کوالٹی تجزیہ خام اقتباس بطور نمونہ → SDS PAGE یا ویسٹرن بلاٹنگ (WB) کے ذریعے ہدف پروٹین تجزیہ |
| پلازمیڈ کا کوالٹی کنٹرول |
قبل از علاج اور معیار کا تجزیہ پلاسمڈ نکالنا → ایگروز جیل الیکٹروفورسس کے ذریعہ ڈی این اے تجزیہ |
کیس اسٹڈی
ہمیں اپنے گاہک کی طرف سے ٹارگٹ پولی پیپٹائڈ ہارمون کی پیداوار کو 8 g/L سے 10 g/L تک بڑھانے کا حکم دیا گیا ہے۔
DoE ٹولز میں مکمل فیکٹریل ڈیزائن اور رسپانس سرفیس ڈیزائن کی بنیاد پر، ہم نے ابال کے کلیدی پیرامیٹرز کو تیزی سے پہچان لیا اور ان کو بہتر بنایا۔ آپٹمائزڈ ہائی سیل کثافت ابال کے عمل کے تحت، اظہار کی سطح 10 g/L تک بڑھ گئی۔
ہمارے تجربات
- ہم نے مختلف قسم کے مائکروبیل میزبانوں پر کام کیا ہے، جیسے، ای کولی DH5α، TOP10، Trans10، BL21؛ Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) اور Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
- ہم تجربہ کار ہیں۔ E. کولی periplasmic سراو، گھلنشیل اور شمولیت جسمانی اظہار کے ساتھ ساتھ خمیر انٹرا سیلولر یا ایکسٹرا سیلولر اظہار۔ انکلوژن باڈی کی پیداوار 10 گرام/L تک ہے، جبکہ حل پذیر پروٹین کی پیداوار 0.5 سے 15 گرام/L تک ہوتی ہے۔
- ہم مختلف بڑے مالیکیولز کی نشوونما اور تیاری میں شامل رہے ہیں، جن میں ریکومبیننٹ سبونائٹ ویکسین، وائرس نما ذرات (VLPs)، ہارمونز (انسولین، GLP-1، گروتھ ہارمون)، سائٹوکائنز (Interleukin-2/IL-2، IL) شامل ہیں۔ -15، IL-21)، نمو کے عوامل (EGF، FGF، NGF)، نینو باڈیز/ سنگل ڈومین اینٹی باڈیز (sdAbs)، انزائمز وغیرہ۔
- سامان
7L*16 ابال کا نظام
سیڈیکس بائیو اینالائزر، بائیو پروسیس اینالائزر
UR
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نہیں
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
BN
