بائیو فارماسیوٹیکلز کی تیاری کے لیے N-glycans کی پروفائلنگ ضروری ہے۔ Yaohai Bio-Farma N-glycan پروفائلنگ سروس فراہم کرتا ہے جس کا استعمال کرتے ہوئے Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) جاری کیا گیا اور لیبل لگا ہوا گلائیکینز استعمال کرتا ہے۔ N-glycans کے نمونے کی تیاری کے عمومی اقدامات میں glycoprotein (GP) کا عمل انہضام، de-glycosylation، پیوریفیکیشن، لیبلنگ/ڈیریویٹائزیشن، اور سالڈ فیز ایکسٹریکشن (SPE) شامل ہیں۔
ہم مختلف بڑے مالیکیولز کی پروٹین کی ساختی خصوصیات میں شامل رہے ہیں، بشمول ریکومبیننٹ سبونائٹ ویکسینز، نینو باڈیز/وی ایچ ایچز/ سنگل ڈومین اینٹی باڈیز (ایس ڈی اے بی ایس)، اینٹی باڈی فریگمنٹس، ہارمونز/پیپٹائڈس، سائٹوکائنز، گروتھ فیکٹرز (جی ایف)، انزائمز، کولاجز، وغیرہ
N-Glycan پروفائلنگ کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ICH Q6B رہنما خطوط کے مطابق، "گلائکوپروٹینز کے لیے، کاربوہائیڈریٹ مواد (غیر جانبدار شکر، امینو شکر، اور سیالک ایسڈ) کا تعین کیا جاتا ہے۔ مزید برآں، کاربوہائیڈریٹ چینز کی ساخت، اولیگوساکرائیڈ پیٹرن (اینٹینری پروفائل)، اور پولی پیپٹائڈ چین کی گلائکوسیلیشن سائٹ (سائٹس) کا ممکنہ حد تک تجزیہ کیا جاتا ہے۔
تجزیاتی طریقہ
| تجزیہ |
طریقے |
| N-glycan پروفائلنگ |
مائع کرومیٹوگرافی-ماس سپیکٹرو میٹری (LC-MS) جاری کردہ اور لیبل والے گلائکینز کا تجزیہ |
طریقہ کار
1. پیپٹائڈ N-Glycosidase F (PNGase F) کے ساتھ انزیمیٹک گلائکن ریلیز
2. 2-aminobenzamide (2-AB) کے ذریعہ جاری کردہ گلائکینز کی اخذ
3. TSK امائیڈ پر کاٹے گئے N-glycans کو صاف کرنا - 80 کالم اگر بڑی مقدار میں ڈٹرجنٹ، غیر مستحکم نمکیات، یا مفت امینو گروپ والے مواد موجود ہوں۔
4. فلوروسینٹ 2-امینوبینزامائڈ (2-AB) کے ذریعے لیبل لگانا
5. لیبل لگے ہوئے N-glycans کا LC-MS تجزیہ
6. ڈیٹا تجزیہ
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نہیں
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
