LC-MS سے مولیکولر وزن کی تصدیق
مکمل مولیکولر وزن ہمیشہ بائیولوگکلز کا ایک مہتمم خصوصیت کے طور پر پہچانا جاتا رہا ہے۔ مکمل مولیکولر وزن تجزیہ کو پروٹین / پیپٹائڈ مندرجات کی تشریح اور بائیولوگکلز کی تصدیق کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ مولیکل وزن کو اندازہ لگانے کا عمل تنظیمی ہدایات کا ایک ضروری معاملہ ہے۔
Yaohai Bio-Pharma نیٹیو، ریڈوسڈ، N-ڈیگلائیکوسیلیٹڈ شرط کے تحت مکمل مولیکولر وزن کی تجزیہ پیش کرتی ہے۔ ہم مکمل مولیکولر وزن کو تعین کرنے کے لیے Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) کا استعمال کرتے ہیں۔
مولیکولر وزن کے لیے تنظیمی ضروریات
ICH Q6 میں تجویز کی گئی ہے کہ 'مولیکولر وزن (یا سائز) کو سائز اخراج کرومیٹوگرافی، SDS-پالی ایکرائلیم جیل الیکٹروفوریسیس (ریڈوسڈ اور غیر ریڈوسڈ شرائط کے تحت)، میس سپیکٹرومسٹری (MS)، اور دیگر مناسب طریقوں کے ذریعہ تعین کیا جائے۔'
انالیٹیکل میتھڈز
تجزیہ |
طریقے |
مولیکولر وزن |
اصلی، کم شدہ، N-ڈیگلائوسائیٹڈ پروٹینز یا سبسٹیوٹ کے لیے LC-MS / مائع کرویوگرافی / الیکٹروسپری میس سپیکٹرومیٹری (LC / ES-MS) |
تحلیلی طریقہ عمل
پوری مولیکلر وزن:
- آرڈر کے مطابق نیچے والے نمونے پر LC-MS کارواں.
- LC-MS ڈیٹا تحلیل.
کم شدہ مولیکلر وزن:
- ایک مناسب کم کرنے والے عامل سے پروٹین نمونے کو معاملہ کرنا؛
- کم شدہ پروٹین پر LC-MS کارواں؛
- LC-MS ڈیٹا تحلیل.
N-ڈیگلائوسائیٹڈ مولیکلر وزن:
- ایک مناسب انزایم سے N-گلائیکنز کو ہٹانا;
- N-دیگلائوسایٹڈ پروٹین پر LC-MS کا انجام دینا؛
- LC-MS ڈیٹا تحلیل.
کم ہوئے اور N-دیگلائوسایٹڈ مولیکular وزن:
- ایک مناسب کم کرنے والے عامل سے پروٹین نمونے کو معاملہ کرنا؛
- ایک مناسب انزایم سے N-گلائیکنز کو ہٹانا;
- کم ہوئے اور N-دیگلائوسایٹڈ پروٹین پر LC-MS کا انجام دینا؛
- LC-MS ڈیٹا تحلیل.
پروٹین سبیونٹ مولیکular وزن:
- سبسیکشن کٹنگ
- پروٹین سبیونٹ پر LC-MS کا انجام دینا
- LC-MS ڈیٹا تحلیل