ARNm este sintetizat prin transcripție in vitro (IVT) dintr-un ADN plasmid liniarizat (pDNA). Unele produse secundare se formează, de asemenea, în timpul procedurii IVT, inclusiv ARN-ul dublu catenar (ARNds) identificat ca declanșatori majori pentru calea imună înnăscută. Este esențial să eliminați impuritățile și să obțineți randamente mari de ARNm pur pentru cercetarea ARNm in vitro/vivo și aplicații terapeutice.
Yaohai Bio-Pharma a stabilit un set de tehnologii de sinteză a ARNm pentru a oferi ARNm foarte pur, cum ar fi proiectarea și optimizarea secvenței, IVT, purificarea, liofilizarea și încapsularea nanoparticulelor lipidice (LNP). Toate produsele sunt lansate conform standardelor stricte de control al calității. Cromatografia de afinitate (AC), bazată pe interacțiunea puternică și selectivă dintre coada 3′ poliA a ARNm cu oligo dT în fază staționară, este o strategie de purificare eficientă și scalabilă pentru ARNm.
livrabile
| Produs |
ARNm foarte pur personalizat
|
| Lungime |
100~10,000 de nucleotide |
| Conținut de ARN |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Puritate |
A260 / A280 |
| Identificare și puritate |
Electroforeza pe gel de agaroză (AGE)
Electroforeza capilară (CE)
|
| Tampon |
Apă fără RNază (lichid) |
| Livrarea |
Navă cu gheață uscată; sau la temperatura mediului ambiant |
| Stocare |
● Lichid, la sau sub -20°C
● Pulbere liofilizată, la 4°C
|
| Aplicatii |
Dezvoltarea formulării LNP,
Teste pe bază de celule, experiment pe animale
|
Alte opțiuni personalizabile
| 5' Cap |
● neredusă
● Cap0, co-limitat
● Cap1, co-limitat
● Cap1, acoperire enzimatică
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Nature UTR secvență
● Mutant/Secvență UTR proiectată
|
| 3' Coada PolyA |
● 100A ~ 120A coadă (recomandat)
● Coada poliA segmentată
● Altă coadă personalizată
|
| Nucleozide modificate |
● Baze nemodificate,
● Pseudouridină (Ψ),
● N1-Metilpseudouridină (N1Ψ),
● 5-metilcitozină (m5C),
● 5-metiluridină (m5U),
● 5-metoxiuridină (5moU),
● 2-tiouridină (s2U),
● 2′-O-metil-U
● Altele
|
Studiu de caz
Am dezvoltat un proces de purificare prin cromatografie în mai multe etape și am preparat ARNm cu puritate și integritate ridicate (>95%).
Fig. Analiza ARNm cu puritate ridicată (>98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
