Productie van monoklonale antilichamen in E. coli: ontwikkelingen en vooruitzichten

Monoklonale antilichamen (mAbs), oplosbare glycoproteïnen van ongeveer 150 kDa bestaande uit zware en lichte ketens, worden veel gebruikt bij de behandeling van kanker en auto-immuunziekten. De laatste jaren zijn de productiemethoden van mAbs en hun derivaten divers geworden, met Escherichia coli (E. coli) en ontwikkelt zich tot een belangrijke gastheer voor de productie van antilichaamfragmenten.

In de productie van mAbs blinkt Yaohai Bio-Pharma uit met rijke R&D-ervaring. Met een volwassen platform, geavanceerde apparatuur en innovatieve volledig ecologische expressietechnologie biedt Yaohai one-stop-services van celbankconstructie tot fill&finish, waarbij mAbs volledig op maat worden gemaakt voor klanten.

Productiemethoden van mAbs in E. coli

E. coli biedt snelle groei, lage kosten, gebruiksgemak en flexibiliteit in expressie binnen het cytoplasma, periplasma of kweekmedium. In E. coli wordt antilichaamproductie voornamelijk gecategoriseerd in periplasmatische, cytoplasmatische en semi-geoxideerde cytoplasmatische productie, evenals celvrije proteïnesynthese (CFPS) systemen. Periplasmatische productie heeft hoge opbrengsten van functioneel full-length immunoglobuline G (FL-IgG) bereikt door geoptimaliseerde expressie en secretiebalans. Cytoplasmatische productie kent uitdagingen vanwege de reducerende omgeving, maar functioneel FL-IgG is succesvol tot expressie gebracht door stammen te manipuleren om een ​​oxidatieve omgeving te creëren. Het CFPS-systeem heeft efficiënte antilichaamproductie bereikt door translatie-initiatieregio's aan te passen en chaperonne-eiwitten toe te voegen.

Karakterisering en kwaliteitscontrole van antilichamen

Kwaliteitscontrole van antilichamen omvat biochemische, biofysische en biologische karakteriseringen. Biochemische karakterisering analyseert onder andere de structuur, sequentie en glycosylering van antilichamen. Biofysische karakterisering evalueert homogeniteit, oplosbaarheid en stabiliteit. Biologische karakterisering valideert de bioactiviteit van antilichamen, waaronder ADCC en CDC. Hoewel gedeglycosyleerde antilichamen die in E. coli worden geproduceerd bepaalde Fc-effectorfuncties missen, hebben studies aangetoond dat hun stabiliteit vergelijkbaar is met die van geglycosyleerde antilichamen en dat ze onder geteste omstandigheden een vergelijkbare therapeutische werkzaamheid vertonen.

Om de immuuneffecten van gedeglycosyleerde antilichamen te herstellen of te verbeteren, kunnen Fc-domeinen worden gemanipuleerd. Mutanten die bijvoorbeeld binden aan FcɣRI kunnen worden gescreend om de ADCC-effectorfunctie te verbeteren. Deze gemanipuleerde antilichamen vertonen significante biologische effecten en therapeutisch potentieel, zowel in vitro als in vivo.

Conclusie

Samenvattend heeft de productie van gedeglycosyleerde antilichamen in E. coli belangrijke vooruitgang geboekt op het gebied van antilichaamproductie, kosten verlaagd en kwaliteit verbeterd. Hoewel ze bepaalde Fc-effectorfuncties missen, vertonen ze door technisch ontwerp verbeterde effectorfuncties en therapeutisch potentieel. Er wordt verwacht dat meer gedeglycosyleerde antilichamen die in E. coli worden geproduceerd in de toekomst klinische studies zullen ondergaan.

We zijn ook actief op zoek naar institutionele of individuele wereldwijde partners. We bieden de meest concurrerende compensatie in de industrie. Als u vragen hebt, neem dan gerust contact met ons op via [email protected]