mRNA wordt gesynthetiseerd door in vitro transcriptie (IVT) uit een gelineariseerd plasmide-DNA (pDNA). Er worden ook enkele bijproducten gevormd tijdens de IVT-procedure, waaronder dubbelstrengs RNA (dsRNA) dat wordt geïdentificeerd als belangrijke triggers voor de aangeboren immuunroute. Het is van cruciaal belang om onzuiverheden te verwijderen en hoge opbrengsten te verkrijgen zuiver mRNA voor in vitro/vivo mRNA-onderzoek en therapeutische toepassingen.
Yaohai Bio-Pharma heeft een reeks mRNA-synthesetechnologieën ontwikkeld om hierin te voorzien zeer zuiver mRNA, zoals sequentieontwerp en -optimalisatie, IVT, zuivering, lyofilisatie en inkapseling van lipide nanodeeltjes (LNP). Alle producten worden vrijgegeven onder de strenge kwaliteitscontrolenormen. Affiniteitschromatografie (AC), gebaseerd op de sterke en selectieve interactie tussen de 3'-polyA-staart van mRNA met stationaire fase oligo-dT, is een efficiënte en schaalbare zuiveringsstrategie voor mRNA.
Deliverables
| Product |
Aangepast zeer zuiver mRNA
|
| Lengte |
100~10,000 nucleotiden |
| RNA-inhoud |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Zuiverheid |
A260 / A280 |
| Identificeren en Zuiverheid |
Agarosegelelektroforese (AGE)
Capillaire elektroforese (CE)
|
| Buffer |
RNase-vrij water (vloeistof) |
| Verzending |
Verzenden met droogijs; of onder omgevingstemperatuur |
| Opbergen |
● Vloeibaar, bij of onder -20°C
● Gelyofiliseerd poeder, bij 4°C
|
| Aanvraag |
Ontwikkeling van LNP-formuleringen,
Celgebaseerde testen, dierproeven
|
Andere aanpasbare opties
| 5' Kap |
● afgetopte
● Cap0, co-afgetopt
● Cap1, co-afgetopt
● Cap1, enzymatische capping
|
| 5'UTR/3'UTR |
● Natuur UTR-sequentie
● Mutante/engineered UTR-sequentie
|
| 3' PolyA-staart |
● 100A ~120A staart (aanbevolen)
● Gesegmenteerde polyA-staart
● Andere aangepaste staart
|
| Gemodificeerde nucleosiden |
● Ongemodificeerde basen,
● Pseudouridine (Ψ),
● N1-Methylpseudouridine (N1Ψ),
● 5-methylcytosine (m5C),
● 5-methyluridine (m5U),
● 5-methoxyuridine (5moU),
● 2-thiouridine (s2U),
● 2′-O-methyl-U
● Overig
|
Casestudies
We ontwikkelden een meerstaps chromatografisch zuiveringsproces en bereidden mRNA voor met hoge zuiverheid en integriteit (>95%).
Fig. Analyse van mRNA met hoge zuiverheid (>98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
