Mengungkap Dosis Optimal RNA Laporan eGFP

Dalam biologi molekuler dan bioteknologi, protein fluoresen hijau terkuat (eGFP) telah muncul sebagai gen pelapor penting karena kemampuannya untuk menghasilkan fluoresensi hijau terang pada 509 nm. Protein ini, yang awalnya diisolasi dari ubur-ubur Aequorea victoria, merupakan penanda deteksi langsung dalam budidaya sel mamalia, memfasilitasi pemantauan dan optimasi efisiensi transfeksi. Namun, muncul pertanyaan: berapa dosis optimal RNA pelapor eGFP untuk mencapai tingkat ekspresi yang diinginkan?

Penelitian menunjukkan bahwa efektivitas RNA laporan eGFP sangat bergantung pada dosisnya, terutama dalam konteks RNA lingkaran (circRNA) dan mRNA yang memperkuat diri sendiri (saRNA). Studi yang dilakukan oleh tim Katrien Remaut di Grup Penelitian Nanomedicine Universitas Ghent telah menyoroti hubungan rumit antara dosis saRNA dan efisiensi translasinya dalam sel retina. Mereka menemukan bahwa dosis rendah saRNA, di bawah ambang batas aktivasi imun bawaan, memungkinkan ekspresi protein yang efisien. Hal ini menekankan pentingnya kontrol dosis yang tepat untuk memanfaatkan potensi penuh RNA laporan eGFP.

Dalam aplikasi praktis, konsentrasi eGFP mRNA yang umum digunakan dapat bervariasi dari mikrogram (μg) hingga nanogram per mikroliter (ng/μL). Sebagai contoh, dalam eksperimen transfeksi, dosis antara 0,05 μg hingga 0,5 μg eGFP mRNA telah terbukti menghasilkan tingkat ekspresi yang signifikan pada berbagai jenis sel, dengan persentase sel positif mencapai hingga 99-100% dalam beberapa kasus. Perlu dicatat bahwa pada dosis di bawah 0,1 μg, saRNA menunjukkan tingkat ekspresi yang lebih unggul dibandingkan mRNA linear, menunjukkan keunggulan self-amplifying-nya.

Kemampuan adaptasi RNA laporan eGFP tidak hanya terletak pada fluoresensi yang terang dan stabil, tetapi juga pada fleksibilitasnya terhadap berbagai setup eksperimental. Peneliti dapat menyesuaikan dosis untuk memenuhi kebutuhan spesifik mereka, memastikan kontrol presisi atas tingkat ekspresi gen. Fitur ini menjadikan eGFP alat yang sangat berharga untuk mempelajari fungsi gen, memantau nasib sel, dan mengoptimalkan protokol transfeksi.

Secara keseluruhan, dosis optimal RNA laporan eGFP sangat bergantung pada konteks eksperimen dan hasil yang diinginkan. Dengan secara hati-hati memilih dosis yang tepat, para peneliti dapat memanfaatkan potensi penuh dari gen pelapor serba guna ini, meningkatkan pemahaman kita tentang mekanisme molekuler dan mendorong inovasi dalam bioteknologi.

Yaohai Bio-Pharma adalah perusahaan biologis pertama dan terbesar yang didedikasikan untuk sistem ekspresi mikroba CRDMO di Tiongkok Besar. Kami berkomitmen untuk memenuhi kebutuhan klinis dan komersial pelanggan global kami untuk obat-obatan biologis, vaksin, dan diagnostik untuk penggunaan manusia dan veteriner.

Kami juga secara aktif mencari mitra global, baik lembaga maupun individu. Kami menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri. Jika Anda memiliki pertanyaan, silakan hubungi kami: [email protected]