Здраво. Да ли сте се икада запитали како научници могу клонирати РНК? РНК је овај посебан молекул који налазимо у нашим ћелијама који ради гомилу ствари за стварање протеина, а протеини су ту тако да наше тело може да ради све што треба. У овој епизоди, ми ћемо направити шетњу кроз далеко занимљивији протокол који користе истраживачи: ин витро транскрипт. А све то значи да научници узимају РНК и праве је много у епрувети (што је ова мала тегла коју користе лабораторије), тако да уђемо у сваки корак овде.
Након што сам завршио свој претходни пост, схватио сам да је последњи можда био мали пост-лабораториј за долазак на суво место; дакле, у складу са формом сада када сте добро и заиста у забавном (сиц РНА-прављењу) возу: Који ће реагенси иц бити потребни за ваш ЕФ?? Да бисмо ово постигли, биће нам потребни специјални протеини који се зову ензими, идентични Иаохаијевом производу Рекомбинантна Мидкине производња. Он катализује хемијске реакције, ови ензими помажу у разградњи. Дакле, сада нам треба само наш део ДНК. Ова функција је ДНК коју користимо као шаблон за копирање за нашу РНК. Потребне су и додатне регулаторне секвенце у РНК, односно нуклеотиди. Ови нуклеотиди су попут сићушних грађевинских блокова који се морају саставити да би се направила РНК. Такође користимо кратке цеви малог пречника да бисмо процену укуса убацили у друге. На крају, потребна нам је машина (термоциклер) која осигурава да наше реакције буду на правој температури. Поред тога, можда ће нам бити потребно неколико алата и производа за одређене експерименте.
Дакле, овде се ствари разилазе, имамо један РНК ланац и сада желимо да имамо више његових копија, такође Производња коњугираних ВЛП вакцина развио Иаохаи. Начин да се постигне коришћење другог ензима; Т7 РНК полимераза. Овај јединствени ензим, на пример, препознаје специфичне области унутар РНК. скакање за прављење много више копија РНК у поступку. У овом тренутку, Т7 РНК полимераза ће додати више РНК ланцу док се не створи маса транскрипта, или док му не кажемо да престане.
Након што смо изоловали РНК што је више могуће, скролујте даље доле да видите како да очистите и сачувате РНК за будућу употребу. Рхоадес: Неке од тих метода су мало више на екстремној страни у смислу изолације РНК - то не бисте увек користили, али понекад је потребно за одређене врсте експеримената. Када се наша РНК ослободи било каквих загађивача, може се чувати замрзнута. На овај начин је ово безбедно и можемо га касније користити у различитим експериментима.
Квалитет почетног материјала: уверите се да је ваш ДНК шаблон чист и да није сав изгорео. Такође можете допунити свеже реконституисане нуклеотиде и тек одмрзнуте ензиме да бисте повећали шансе за успешан експеримент.
Услови финог подешавања Сви ензими и њихови нуклеотиди раде боље на одређеној температури и пХ у вашем телу, као и Иаохаи Црвена флуоресцентна мРНА. Сада мало прилагодите нијансу између услова док не дођете до места где је кључ за ваше јединствено подешавање.
Реверзна транскриптаза је необичан ензим, јер прави копију ДНК од молекула РНК. Користили смо и ДНК и ДНК шаблон (цДНК) као улаз за нашу ин витро методу транскрипта за генерисање РНК. Међутим, у већини експеримената научници би желели да транскрибују ДНК у РНК. Реверзна транскрипција је место где добија исто име као Тестирање дистрибуције мРНА поли-А направио Иаохаи. То је непроцењив алат за науку - од проучавања РНК молекула унутар ћелија до производње комплементарних ДНК ланаца за даље експерименте.
Експерименти из стварног живота у којима је РНК један од најчешће коришћених молекуларних алата, заједно са Иаохаијевим производом Производња ВЛП вакцине у Е. цоли. Квантитативни тестови: Ови тестови могу открити количину било ког специфичног молекула присутног у узорку. На пример, научници могу синтетизовати ин витро препарат транскрипта РНК копија добијених од циљаног гена који се налази унутар ћелије. тражећи РНК, дијагностика може да покрене ланчану реакцију полимеразе (ПЦР) да појача те копије у узорку. Ово омогућава научницима да виде како се гени експримирају на ћелијама, па чак и омогућава неке анализе изузетно високе пропусности, као што је присуство бактеријске или вирусне инфекције, и дијагностицирање генетских поремећаја.
ин витро Транскрипт Протокол је водећи ЦДМО у микробној биологији. Наш фокус је био на вакцинама и терапеутицима произведеним од микроба који су погодни за управљање здрављем људи, ветеринара, као и кућних љубимаца. Поседујемо најсавременије РД платформе и производну технологију која покрива целокупну процедуру почевши од развоја сојева микроба и банкарства ћелија, преко развоја процеса и метода, до комерцијалне и клиничке производње која обезбеђује успешну испоруку иновативних решења. Временом смо акумулирали огромно знање о биолошкој обради на бази микроба. Преко 200 пројеката је успешно завршено, а ми помажемо нашим клијентима да се придржавају прописа као што су ФДА САД и ЕУ ЕМА. Такође им помажемо да се крећу у Аустралији ТГА и Кине НМПА. Наша професионална стручност и велико искуство нам омогућавају да брзо одговоримо на захтеве тржишта и пружимо ЦДМО услуге по мери.
Иаохаи Био-Пхарма има искуство у производњи биолошких лекова креираних на основу ин витро Транскрипт протокола. Нудимо прилагођена РД и производна решења, а истовремено се бринемо да нема ризика. Били смо укључени у различите модалитете као што су рекомбинантне подјединичне вакцине, пептидни хормони, цитокини, фактори раста, ензими антитела са једним доменом, плазмидна ДНК МРНА и још много тога. Специјалиста смо за многе микроорганизме, укључујући екстрацелуларну и интрацелуларну секрецију квасца (приноси до 15г/Л) као и за интрацелуларно растворљиво и инклузионо тело бактерија (приноси до 10г/Л). Такође смо креирали БСЛ-2 платформу за ферментацију за стварање бактеријских вакцина. Фокусирамо се на побољшање процеса, повећање приноса производа и смањење трошкова производње. Користећи јак технолошки тим, можемо да обезбедимо брзу и поуздану испоруку пројекта која ће брже довести ваш производ на тржиште.
Иаохаи Био-Пхарма, 10 најбољих произвођача биолошких производа, специјализована је за микробну ферментацију. Изградили смо модеран објекат са робусним РД могућностима и напредном опремом. Имамо пет линија за производњу лековитих супстанци које су у складу са ГМП захтевима за микробну ферментацију и пречишћавање. Такође имамо две аутоматизоване линије пуњења за кертриџе, бочице и напуњене шприцеве. Ваге за ферментацију које су доступне за употребу крећу се од ин витро Транскрипт протокола до 2000Л. Спецификације за пуњење бочице крећу се од 1мл до 25мл. спецификације за пуњење напуњених шприца или картриџа крећу се од приближно 1-3 мл. Наш производни погон усаглашен са цГМП-ом обезбеђује константно снабдевање клиничким узорцима као и комерцијалним артиклима. Наша фабрика производи велике молекуле који се шаљу на свет.
Иаохаи БиоПхарма је Топ 10 микробних ЦДМО који укључује ин витро протокол транскрипта као и регулаторне послове. Имамо систем управљања квалитетом који је у складу са актуелним ГМП стандардима као и глобалним прописима. Наш тим регулаторних стручњака је стручан у глобалним регулаторним оквирима како би убрзао биолошка лансирања. Обезбеђујемо следљиве производне процесе квалитетних производа, као и усклађеност са правилима УС ФДА и ЕУ ЕМА. Аустралијски ТГА и Кинески НМПА су такође задовољни. Иаохаи БиоПхарма је успешно прошла ревизију на лицу места од стране квалификоване особе (КП) Европске уније за наш систем квалитета ГМП као и за наше производне погоне. Штавише, извршили смо прве сертификационе провере за ИСО9001 систем управљања квалитетом, ИСО14001 систем управљања заштитом животне средине и ИСО45001 систем управљања здрављем и безбедношћу на раду.