Ćao. Da li si ikada se pitao kako naučnici mogu da kloniraju RNA? RNA je ta posebna molekula koju pronađemo u našim ćelijama i ona radi mnogo stvari za proizvodnju proteina, a proteini su tu da bi naše telo moglo da obavlja sve potrebne funkcije. U ovom izdanju, uraditi ćemo pregled mnogo zanimljivijeg protokola koji koriste istraživači: in vitro transkript. A to znači da naučnici uzimaju RNA i proizvode ga u velikom količinu u probici (koja je taj malen posud što laboratorijski koriste), pa hajde da razmotrimo svaki korak.
Završivši svoj prethodni članak, shvatio sam da je poslednji mogao biti malo suvi - dođite da se pridružite zabavi u mokrom labu; dakle, u skladu sa tim, sada kada ste uistinu na trenu zabave (RNA-proizvodnje): Koji reagenti će vam trebati za vaš EF?? Da bismo to postigli, trebace nam posebni proteini nazvani enzimi, identični proizvodu Yaohai Proizvodnja rekombinantnog Midkine . On katalizuje hemijske reakcije, ove enzime pomažu u raspalu. Sada nam je potreban samo naš komad DNA. Ova funkcija je DNA koji koristimo kao šablon za kopiranje za naš RNA. Dodatne regulatorne sekvence u RNA-u, a imenicno nukleotidi, su takođe neophodni. Ti nukleotidi su kao mali građevini koje je potrebno sastaviti da bi se napravio RNA. Takođe koristimo kratke cijevi male dijametra da bismo uključili procenu okusa u druge. Na kraju, nam je potrebna mašina (termocikler) koja obezbeđuje da naše reakcije budu na tačnoj temperaturi. Dodatno, možda ćemo imati potrebu za nekoliko alata i proizvoda za određene eksperimente.
Ovde se stvari razdvajaju, imamo jedan lanac RNA i sada želimo da imamo više kopija njega, takođe Proizvodnja konjugovanih VLP vakcina razvio Yaohai. Način da se to postigne je korišćenjem još jednog enzima; T7 RNA polimeraze. Ovaj jedinstveni enzim, na primer, prepoznaje specifične oblasti unutar RNA. skočna zona za pravljenje mnogo više kopija RNA u nastavku. U ovom trenutku, više će biti dodato lancu RNA od strane T7 RNA polimeraze dok se ne napravi veliki broj transkripta ili dok nam ne treba da prestane.
Nakon što smo izolirali RNA onoliko koliko je moguće, skrolujte dalje da biste saznali kako da očistite i pohranite RNA za buduću upotrebu. Rod: Neki od tih metoda su malo ekstremniji u pogledu izolacije RNA — ne biste ih uvijek koristili, ali ponekad su potrebni za određene vrste eksperimenata. Kada naša RNA bude sasvim slobodna od bilo kakvih kontaminanata, može se čuvati zamrznuta. Na taj način je sigurna i možemo je kasnije koristiti u raznim eksperimentima.
Kvalitet početnog materijala: pobrinite se da vaš DNA šablon bude čist i da nije previše oštećen. Takođe možete dopuniti svežim rekonstituisanim nukleotidima i novopreljevanih enzima da maksimizujete šanse za uspješan eksperiment.
Prilagođavanje uslova: Svi enzimi i njihovi nukleotidi bolje funkcionišu uz određenu temperaturu i pH unutar vašeg tela, kao i kod Yaohaija Crveno fluorescentska mRNA . Sada malo prilagodite nuance između uslova dok ne dođete do ključne točke za vaš jedinstven postavku.
Obrnuti transkriptaz je neobičan enzim, jer iz RNA molekula pravi kopiju DNA. Koristili smo i DNAs i DNA šablon (cDNA) kao ulaz za našu in vitro transkripcioni metod za generisanje RNA. Međutim, u većini eksperimenata biologska želja je da se DNA transkripuje u RNA. Obrnuta transkripcija dobija svoje ime po istom principu. testiranje distribucije mRNA poli-A napravio Yaohai. Predstavlja neocenjiv alat u celoj naučnoj zajednici - od proučavanja RNA molekula unutar stanica do proizvodnje komplementarnih DNA lancova za daljnje eksperimente.
U stvarnim eksperimentima, u kojima se RNA koristi kao jedan od najčešće korišćenih molekularnih alata, uz proizvod Yaohai. Proizvodnja VLP vakcina u E. coli . Količinske analize: Ove teste se mogu koristiti da se utvrdi količina bilo koje određene molekule prisutne u uzorku. Na primer, naučnici mogu sintetizovati in vitro pripremu transkripta RNA kopija izvedenih iz ciljnog gene unutar ćelije. Dijagnostika zatim može provesti analizu tih kopija, u slučaju da traže RNA, dijagnostika može izvršiti reakciju lanca polimeraze (PCR) kako bi se ove kopije umnožile u uzorku. To omogućava naučnicima da vide kako se gene izražavaju na ćelijama, a čak omogućava i neke ekstremno visokoproduktivne analize, kao što je prisutnost bakterijske ili virusne infekcije, i dijagnozu genetskih poremećaja.
in vitro Transcript Protocol je vodeći u oblasti CDMO za mikrobiološke biologike. Naš fokus je bio na vakcinama i terapijama proizvedenim od mikroorganizama koje su prilagođene upravljanju zdravstvom kod čoveka, veterinarske medicine kao i zdravstva domaćih životinja. Posedujemo najmodernije R i D platforme i tehnologiju proizvodnje koje obuhvataju celokupan postupak, počevši od razvoja mikrobioloških štrika i bankovanja ćelija, preko razvoja procesa i metoda, do kliničke i komercijalne proizvodnje, što osigurava uspešno dostavljanje inovativnih rešenja. Tokom vremena smo nagomilali ogroman znanstveni kapital vezan za mikrobiološku obradu. Preko 200 projekata su uspešno završeni, a podržavamo naše klijente da se pridrže propisima poput onih od US FDA i EU EMA. Takođe ih podržavamo pri navigaciji kroz Australia TGA i Kina NMPA. Naše profesionalno stručnjaci i obiman iskustva omogućavaju nam brzu reakciju na tržišne zahteve i pružanje prilagođenih CDMO usluga.
Yaohai Bio-Pharma ima iskustvo u proizvodnji bioloških lekova kreiranih preko protokola transkripcije in vitro. Ponudjujemo prilagođena rešenja za istraživanje i razvoj (RD) i proizvodnju, osiguravajući da ne postoje rizici. Bili smo uključeni u različite modalitete kao što su subjedinične vakcine rekombinantne, peptidni hormoni, citozini, faktori rasta, jednodomenske antitela enzime, plazmidna DNA mRNA, i mnoge druge. Specijalizirani smo u mnoge mikroorganizme, uključujući kvasinu ekstracelularnu i intracelularnu sekreciju (dohodak do 15g/L), kao i bakterije intracelularne rastvorive i inkluzioni tijelo (dohodak do 10g/L). Takođe smo stvorili platformu za fermentaciju na nivou BSL-2 kako bismo izradili bakterijske vakcine. Fokusiramo se na unapređivanje procesa, povećanje dohoda proizvoda i smanjenje troškova proizvodnje. Koristeći čvrstu timsku tehnologiju, možemo osigurati brzu i pouzdanu dostavu projekata koja će vaš proizvod doneti na tržište brže.
Yaohai Bio-Pharma, jedan od deset vodećih proizvođača bioloških proizvoda, se bavi mikrobijskom fermentacijom. Izgradili smo savremenu vezu sa jakim mogućnostima za istraživanje i razvoj (RD) i naprednim opremom. Imamo pet linija za proizvodnju farmaceutske tvari koje odgovaraju GMP zahtevima za mikrobijsku fermentaciju i čišćenje. Takođe imamo dve automatske linije za ispunjavanje kartridža, flašica i prenapunjenih šprica. Kapacitet fermentacije raspoloživ za korišćenje se kreće od in vitro Transkript Protokola do 2000L. Specifikacije za ispunjavanje flašice idu od 1ml do 25ml. Specifikacije za ispunjavanje prenapunjenih šprica ili kartridža su otprilike od 1-3ml. Naše cGMP-saglasne proizvodne vezove osiguravaju stalnu dostavu kliničkih uzoraka kao i komercijalnih artikala. Naša fabrika proizvodi velike molekule koje se šalju širom sveta.
Yaohai BioPharma je jedna od deset najvećih mikrobioloških CDMO-ova koja uključuje protokol in vitro transkripcije kao i regulativne poslove. Imamo sistem upravljanja kvalitetom koji je u skladu sa trenutnim GMP standardima kao i globalnim regulacijama. Naš tim stručnjaka za regulativne poslove vješto radi unutar globalnih regulativnih okvira kako bi ubrzao izlazak bioloških proizvoda na tržište. Osiguravamo praćenje procesa proizvodnje, kvalitetne proizvode te poštovanje pravila US FDA i EU EMA. Australia TGA i Kina NMPA su takođe zadovoljni. Yaohai BioPharma je uspešno prošla inspekciju na mestu od strane kvalifikovane osobe (QP) Europske unije za naš sistem kvaliteta GMP i našu proizvodnu objekat. Pored toga, prošli smo prvu certifikaciju audita ISO9001 Sistema upravljanja kvalitetom, ISO14001 Sistema upravljanja okvim i ISO45001 Sistema upravljanja sigurnošću rada.