LNP липидниот состав Идентификување и количина
Значењето на анализата на липидниот состав на LNP
Липидните наночестички (LNPs), кои содржат катјонски липиди, холестерол, фосфолипиди и липиди со PEG-коњугат, служат како истакнати системи за испорака за производите на лекови од mRNA. Стабилноста и двослојната флуидност на LNP зависат од својствата и содржината на различните липиди што се користат во системот за формулација. Составот на липидите е многу важен за тоа колку добро LNP ги испорачуваат лековите.
Yaohai-BioPharma обезбедува решенија за идентификување и квантифицирање на липидниот состав на mRNA-LNP со помош на методот на течна хроматографија со високи перформанси со детекција на наелектризиран аеросол (HPLC-CAD).
Регулаторни барања за липидниот состав
Според регулаторните размислувања на СЗО, „Конечниот состав на вакцината, вклучувајќи ги и липидите, треба да се опише заедно со количината на компонентите во секоја презентација“.
Аналитички метод
Анализа |
Методи |
Липиден состав |
HPLC во комбинација со Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
постапка
Чекор 1. Подготовка на примерок од липиди
Изборот на разредувачот е од огромно значење за анализата на липидните компоненти во лековите производи на mRNA-LNP. Разредувачот треба ефикасно да ја раствори секоја липидна компонента и да ги наруши сите интеракции помеѓу липидите и инкапсулираната mRNA. Потенцијалните разредувачи опфаќаат етанол, етанол/диметилсулфоксид (DMSO), етанол/формамид, етанол/триетиламин ацетат и други.
Чекор 2. HPLC-CAD
Течна хроматографија со обратна фаза (RP-HPLC) поврзана со наполнет аеросолен детектор (CAD) е вградена во тестирањето на липидниот состав на LNP. Имајќи предвид дека на липидите им недостасуваат хромофори и не апсорбираат ултравиолетово (УВ) зрачење без дериватизација, испарувањето е типично предизвик. CAD, бидејќи е почувствителен, може да препознае поширок спектар на содржина на липиди. Претходно, течна хроматографија со ултра високи перформанси (UHPLC) заедно со метод на наелектризиран аеросол детектор (CAD) беше формулирана и применета во липидна анализа за мали интерферентни РНК (siRNA) LNP студии.
Чекор 3. Анализа на податоци
Количеството на секој липид во примерокот вклучува пресметки добиени од стандардната крива помножена со факторот на разредување. Овој процес ја даде содржината на липидите за секоја состојка во примерокот mRNA-LNP.
Случај на анализа на составот на липидите на LNP со HPLC-CAD
Врз основа на HPLC-CAD, Yaohai-BioPharma разви робустен метод за анализа на липидните компоненти на mRNA-LNP. Овој метод беше потврден дека е линеарен, повторлив, прецизен, точен и специфичен за формулациите на LNP, што може да го поддржи развојот на процесот, развојот на формулацијата, тестирањето на стабилноста и ослободувањето на mRNA-LNP.
Хроматографски профил на 4 липиди со методот HPLC-CAD на Yaohai-BioPharma
Линеарноста на методот HPLC-CAD на Yaohai-BioPharma (R2-0.99)
EN
