Produksi Protein Rekombinan: Strain E. coli yang Dimodifikasi

Escherichia coli (E. coli) telah memainkan peran penting dalam menghasilkan protein rekombinan di industri biopharmasi, berfungsi sebagai vektor ekspresi pertama untuk produksi obat biologis. E. coli memiliki keunggulan seperti pertumbuhan cepat, manipulasi genetik yang mudah, dan sintesis protein rekombinan yang cepat. Modifikasi luas telah menjadikan E. coli pilihan optimal untuk ekspresi protein, yang mengarah pada desain berbagai strain E. coli yang dimodifikasi.

Yaohai Bio-Pharma fokus pada menyediakan layanan outsourcing satu atap untuk fermentasi, pengembangan proses pemurnian dan formulasi, serta produksi serangkaian biopharmaka menggunakan sistem ekspresi E. coli. Berdasarkan pengalaman luas Yaohai, kami merangkum bahwa empat strain E. coli umum digunakan untuk produksi protein rekombinan dan karakteristiknya.

Strain BL 21

Berasal dari garis keturunan E. coli B, strain BL21 tidak memiliki protease Lon dan protease membran luar OmpT. Protease Lon terutama memecah protein eksogen, sementara OmpT terutama memecah protein matriks ekstraseluler. Kehadiran dua protease utama ini dapat secara efektif mencegah degradasi protein rekombinan.

Strain Origami

Strain Origami, turunan dari E. coli K-12, memiliki mutasi pada tioreredoksin reductase dan glutathione reductase, yang memfasilitasi pembentukan protein yang dilipat dengan benar yang mengandung ikatan disulfida dan meningkatkan kelarutan protein. Strain Origami, termasuk Origami, Origami 2, dan Origami B, cocok untuk ekspresi protein aktif yang mengandung ikatan disulfida.

Strain SHuffle

Strain SHuffle secara konstitutif mengekspresikan disulfida isomerase DsbC di sitoplasma, mempromosikan pembentukan ikatan disulfida yang benar pada protein oksidasi. Ini juga berfungsi sebagai kaper molekuler untuk pelipatan protein, membantu dalam pembentukan konformasi yang benar.

Strain Rosetta

Strain Rosetta melengkapi E. coli dengan tRNA yang sesuai dengan kodon langka, bertujuan untuk meningkatkan tingkat ekspresi gen eksogen, terutama gen eukariotik, dalam sistem prokariotik. Turunan dari BL21 dan membawa plasmid pRARE yang tahan kloramfenikol, ia melengkapi enam tRNA yang sesuai dengan kodon langka (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, dan GGA) yang semula tidak ada dalam E. coli, memberikan ekspresi protein yang lebih "universal".

Kesimpulan

Tiga faktor utama untuk produksi sukses protein rekombinan adalah inang, vektor, dan kondisi kultur. Berdasarkan pemahaman tentang sifat fisikokimia protein rekombinan, keunggulan unik setiap strain, dan kebutuhan spesifik eksperimen, inang yang paling sesuai harus dipilih. Selain itu, faktor-faktor seperti vektor plasmid, suhu, dan pengindu harus dioptimalkan untuk meningkatkan ekspresi protein.

Yaohai Bio-Pharma juga aktif mencari mitra global, baik lembaga maupun individu, dan menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri. Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami: [email protected]