mRNA অখণ্ডতা
এমআরএনএ ইন্টিগ্রিটি অ্যানালাইসিসের তাৎপর্য
এমআরএনএগুলি তাদের অন্তর্নিহিত অস্থিরতার জন্য স্বীকৃত এবং বাহ্যিক কারণগুলির উপস্থিতিতে খণ্ডিত হওয়ার জন্য সংবেদনশীল, বিশেষত ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (আইভিটি) এবং পরিশোধন প্রক্রিয়ার সময়, যেখানে সর্বব্যাপী নিউক্লিয়াসগুলি একটি চ্যালেঞ্জ তৈরি করে। এমআরএনএ-ভিত্তিক ওষুধের পরবর্তী উন্নয়নে এমআরএনএ অখণ্ডতার মূল্যায়ন অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ, যা নিরাপত্তা এবং পণ্যের প্রাপ্যতা উভয়ই নিশ্চিত করে।
Yaohai-BioPharma ব্যাপক mRNA অখণ্ডতা পরীক্ষার পরিষেবা প্রদান করে, গবেষণা এবং ক্লিনিকাল ট্রায়াল উভয়ের জন্য কঠোর মানের মান মেনে চলা, অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (AGE), কৈশিক ইলেক্ট্রোফোরেসিস (CEG), এবং উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) এর মতো পদ্ধতি ব্যবহার করে।
mRNA অখণ্ডতার জন্য নিয়ন্ত্রক প্রয়োজনীয়তা
WHO এর নিয়ন্ত্রক বিবেচনা অনুযায়ী, "mRNA এর কাঠামোর অখণ্ডতাকে mRNA প্রকাশের জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ মানের বৈশিষ্ট্য হিসাবে বিবেচনা করা হয়। সুতরাং, এমআরএনএ অখণ্ডতা, শতাংশ অক্ষত এমআরএনএ, শতাংশ এমআরএনএ খণ্ড এবং আরও অনেক কিছুর জন্য নিয়ন্ত্রণ প্রয়োজন।"
বিশ্লেষণী পদ্ধতি
বিশ্লেষণ |
পদ্ধতি |
mRNA অখণ্ডতা |
AGE, Agarosegইলেক্ট্রোফোরসিস |
সিজিই,কৈশিক ইলেক্ট্রোফোরসিস |
CGE-LIF, হালকা প্ররোচিত ফ্লুরোসেন্স সনাক্তকরণ সহ কৈশিক জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস |
অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা এমআরএনএ ইন্টিগ্রিটি
Agarose জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস মোট RNA এর অখণ্ডতা মূল্যায়নের জন্য একটি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত কৌশল। এর মধ্যে একটি ডিনাচারিং অ্যাগারোজ জেলের উপর আরএনএ নমুনা চালানো জড়িত, যা ইথিডিয়াম ব্রোমাইড বা এসওয়াইবিআর গ্রিন দিয়ে দাগযুক্ত। অ্যাগারোজের সমন্বয়ে গঠিত ডিনাচারিং জেল, যখন বৈদ্যুতিক প্রবাহ প্রয়োগ করা হয় তখন আকারের উপর ভিত্তি করে আরএনএ আলাদা করতে সহায়তা করে। যেহেতু নেতিবাচক চার্জযুক্ত আরএনএ জেলের ইতিবাচক প্রান্তের দিকে স্থানান্তরিত হয়, ছোট ছোট টুকরোগুলি আরও দ্রুত গতিতে চলে যায়, ফলে আরএনএ অণুর আকার-ভিত্তিক বাছাই হয়।
ক্যাপিলারি জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা mRNA ইন্টিগ্রিটি
ক্যাপিলারি জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (CGE) দৈর্ঘ্য দ্বারা RNA অণুর অখণ্ডতা পরিমাপ করার জন্য একটি উচ্চ-রেজোলিউশন বিশ্লেষণাত্মক পন্থা হিসাবে দাঁড়িয়েছে। এই মূল্যায়ন গুণমান নিশ্চিতকরণ, ক্ষমতা বোঝার এবং উত্পাদন প্রক্রিয়াগুলির অপ্টিমাইজেশনের জন্য তাত্পর্য রাখে। অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের মতো, CGE তাদের চার্জ এবং আকারের উপর ভিত্তি করে RNA খণ্ডকে আলাদা করতে একটি বৈদ্যুতিক প্রবাহ ব্যবহার করে। CGE-তে, একটি কৈশিক একটি ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক দিয়ে মিশ্রিত একটি বিচ্ছেদ জেল ম্যাট্রিক্স দিয়ে ভরা হয়। কৈশিক বরাবর RNA এর গতিবিধি তার আকারের উপর নির্ভরশীল এবং সনাক্তকরণ অতিবেগুনী (UV) বা আলো-প্ররোচিত ফ্লুরোসেন্স (LIF) ডিটেক্টর ব্যবহার করে অর্জন করা হয়।
EN
