LNP লিপিড রচনা শনাক্তকরণ এবং পরিমাণ
এলএনপি লিপিড রচনা বিশ্লেষণের তাত্পর্য
ক্যাটানিক লিপিড, কোলেস্টেরল, ফসফোলিপিড এবং পিইজি-কনজুগেট লিপিড সমন্বিত লিপিড ন্যানো পার্টিকেলস (LNPs), mRNA ড্রাগ পণ্যের জন্য বিশিষ্ট ডেলিভারি সিস্টেম হিসাবে কাজ করে। LNP-এর স্থায়িত্ব এবং দ্বিস্তরীয় তরলতা ফর্মুলেশন সিস্টেমে ব্যবহৃত বিভিন্ন লিপিডের বৈশিষ্ট্য এবং বিষয়বস্তুর উপর নির্ভর করে। এলএনপি কতটা ভালোভাবে ওষুধ সরবরাহ করে তার জন্য লিপিডের গঠন খুবই গুরুত্বপূর্ণ।
ইয়াওহাই-বায়োফার্মা চার্জড অ্যারোসল ডিটেকশন (HPLC-CAD) পদ্ধতির সাথে উচ্চ-কার্যক্ষমতা সম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে mRNA-LNP লিপিড কম্পোজিশন শনাক্ত ও পরিমাণ নির্ধারণের জন্য সমাধান প্রদান করে।
লিপিড রচনার জন্য নিয়ন্ত্রক প্রয়োজনীয়তা
WHO-এর নিয়ন্ত্রক বিবেচনা অনুযায়ী, "লিপিড সহ ভ্যাকসিনের চূড়ান্ত রচনা প্রতিটি উপস্থাপনায় উপাদানের পরিমাণের সাথে বর্ণনা করা উচিত।"
বিশ্লেষণী পদ্ধতি
বিশ্লেষণ |
পদ্ধতি |
লিপিড রচনা |
এইচপিএলসি করোনা চার্জড অ্যারোসল ডিটেক্টর (সিএডি) এর সাথে মিলিত |
কার্যপ্রণালী
ধাপ 1. লিপিড নমুনা প্রস্তুতি
এমআরএনএ-এলএনপি ড্রাগ পণ্যগুলিতে লিপিড উপাদানগুলির বিশ্লেষণের জন্য ডাইলুয়েন্টের পছন্দটি সর্বাধিক গুরুত্ব বহন করে। তরল কার্যকরভাবে প্রতিটি লিপিড উপাদান দ্রবীভূত করা উচিত এবং লিপিড এবং encapsulated mRNA মধ্যে কোনো মিথস্ক্রিয়া ব্যাহত করা উচিত. সম্ভাব্য মিশ্রিত উপাদানগুলি ইথানল, ইথানল/ডাইমিথাইল সালফক্সাইড (DMSO), ইথানল/ফরমামাইড, ইথানল/ট্রাইথিলামাইন অ্যাসিটেট এবং অন্যান্যকে অন্তর্ভুক্ত করে।
ধাপ 2. HPLC-CAD
রিভার্স ফেজ লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (RP-HPLC) একটি চার্জড অ্যারোসল ডিটেক্টর (CAD) এর সাথে যুক্ত করা হয়েছে LNP লিপিড কম্পোজিশন টেস্টিং-এ। প্রদত্ত যে লিপিডগুলিতে ক্রোমোফোরের অভাব থাকে এবং ডেরিভেটাইজেশন ছাড়া অতিবেগুনী (ইউভি) বিকিরণ শোষণ করে না, উদ্বায়ীকরণ সাধারণত চ্যালেঞ্জিং। CAD, আরও সংবেদনশীল, লিপিড সামগ্রীর একটি বিস্তৃত বর্ণালী বুঝতে পারে। পূর্বে, একটি আল্ট্রাহাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (ইউএইচপিএলসি) একটি চার্জড অ্যারোসল ডিটেক্টর (সিএডি) পদ্ধতির সাথে প্রণয়ন করা হয়েছিল এবং ছোট হস্তক্ষেপকারী আরএনএ (সিআরএনএ) এলএনপি গবেষণার জন্য লিপিড বিশ্লেষণে প্রয়োগ করা হয়েছিল।
ধাপ 3. ডেটা বিশ্লেষণ
নমুনার মধ্যে প্রতিটি লিপিডের পরিমাণের সাথে তরল ফ্যাক্টর দ্বারা গুণিত স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা থেকে প্রাপ্ত গণনা জড়িত। এই প্রক্রিয়াটি mRNA-LNP নমুনার মধ্যে প্রতিটি উপাদানের জন্য লিপিড সামগ্রী প্রদান করে।
এইচপিএলসি-সিএডি সহ এলএনপি লিপিড কম্পোজিশন বিশ্লেষণের কেস
HPLC-CAD-এর উপর ভিত্তি করে, Yaohai-BioPharma mRNA-LNP-এর লিপিড উপাদানগুলির বিশ্লেষণের জন্য একটি শক্তিশালী পদ্ধতি তৈরি করেছে। এই পদ্ধতিটি LNP ফর্মুলেশনগুলির জন্য রৈখিক, পুনরাবৃত্তিযোগ্য, সুনির্দিষ্ট, নির্ভুল এবং নির্দিষ্ট হওয়ার জন্য বৈধ করা হয়েছিল, যা প্রক্রিয়া উন্নয়ন, গঠন উন্নয়ন, স্থিতিশীলতা পরীক্ষা এবং mRNA-LNP প্রকাশকে সমর্থন করতে পারে।
ইয়াওহাই-বায়োফার্মার এইচপিএলসি-সিএডি পদ্ধতিতে 4টি লিপিডের ক্রোমাটোগ্রাফিক প্রোফাইল
ইয়াওহাই-বায়োফার্মার HPLC-CAD পদ্ধতির রৈখিকতা (R2＞0.99)
EN
