ייצור חלבון רקומביננטי: זני E. coli מהונדסים יִשְׂרָאֵל

Escherichia coli (E. coli) מילא תפקיד משמעותי בייצור חלבונים רקומביננטיים בתעשיית הביו-פרמצבטיקה, המשמש כווקטור הביטוי הראשון לייצור רפואה ביולוגית. E. coli מתגאה בצמיחה מהירה, במניפולציה גנטית נוחה ובסינתזה מהירה של חלבונים רקומביננטיים, בין היתר. שינויים נרחבים הפכו את E. coli לבחירה אופטימלית לביטוי חלבון, מה שהוביל לעיצוב של זנים מהונדסים שונים של E. coli.

Yaohai Bio-Pharma מתמחה במתן שירותי מיקור חוץ נקודתיים עבור תסיסה, טיהור, פיתוח תהליכי ניסוח וייצור של סדרת ביו-פרמצבטיקה באמצעות מערכות ביטוי E. coli. לגבי הניסיון הרב של Yaohai, סיכמנו כי ארבעה זני E. coli נפוצים משמשים לייצור חלבון רקומביננטי ותכונותיהם.

זן BL 21

נגזר משושלת E. coli B, זן BL21 חסר Lon פרוטאז ופרוטאז קרום חיצוני OmpT. Lon protease מפרק בעיקר חלבונים אקסוגניים, בעוד OmpT מפרק בעיקר חלבונים מטריצה ​​תאיים. היעדר שני פרוטאזות מפתח אלו יכול למנוע ביעילות את הפירוק של חלבונים רקומביננטיים.

זן אוריגמי

לזן אוריגמי, נגזרת של E. coli K-12, יש מוטציות ב- thioredoxin reductase וב- glutathione reductase, המאפשרות יצירת חלבונים מקופלים נכון המכילים קשרי דיסולפיד ומגבירות את מסיסות החלבון. זן האוריגמי, כולל אוריגמי, אוריגמי 2 ואוריגמי B, מתאימים לביטוי של חלבונים פעילים המכילים קשרי דיסולפיד.

זן דשדוש

זן SHuffle מבטא באופן מכונן את איזומראז DsbC בקשר הדיסולפיד בציטופלזמה, ומקדם יצירת קשרים דיסולפידיים נכונים בחלבונים מחומצנים. הוא משמש גם כמלווה מולקולרי לקיפול חלבון, המסייע ביצירת המבנה הנכון.

זן רוזטה

זן Rosetta משלים את E. coli עם tRNAs התואמים לקודונים נדירים, במטרה לשפר את רמת הביטוי של גנים אקסוגניים, במיוחד גנים אוקריוטיים, במערכות פרוקריוטיות. נגזר מ-BL21 ונושא את הפלסמיד pRARE העמיד לכלורמפניקול, הוא משלים שישה tRNAs התואמים לקודונים נדירים (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC ו-GGA) שנעדרו במקור ב-E. coli, מה שמספק ביטוי חלבון "אוניברסלי" יותר.

סיכום

שלושת הגורמים העיקריים לייצור מוצלח של חלבונים רקומביננטיים הם תנאי המארח, הווקטור והתרבות. בהתבסס על הבנה של התכונות הפיזיקליות-כימיות של החלבון הרקומביננטי, היתרונות הייחודיים של כל זן, והצרכים הספציפיים של הניסוי, יש לבחור את המארח המתאים ביותר. בנוסף, יש לבצע אופטימיזציה של גורמים כגון וקטורי פלסמיד, טמפרטורה ומשרצים כדי לשפר את ביטוי החלבון.

Yaohai Bio-Pharma גם מחפשת באופן פעיל שותפים גלובליים מוסדיים או בודדים ומציעה את התמורה התחרותית ביותר בתעשייה. אם יש לך שאלות, אנא אל תהסס לפנות אלינו: [email protected]