Πλάσμιδος: Ένα Μικρό Κυκλικό ΔΝΑ Μόριο με Μεγάλο Δυναμικό

Τα πλάσμιδα, μικρά κυκλικά DNA μόρια, λειτουργούν ως βασικοί διαφορικοί για την αναπαρασύνθεση DNA στην έρευνα μοριακής βιολογίας και την θεραπεία γονιδίων. Η απόδοση και η ποιότητα των πλασμίδων είναι κρίσιμες, με την αναλογία των υπερβαλλόμενων (supercoiled) και το περιεχόμενο ενδοτοξειών να είναι δύο σημαντικοί παράγοντες που επηρεάζουν την ποιότητα των πλασμίδων.

Υποτύποι Πλασμίδων

Τα πλάσμιδα που εξάγονται από το Escherichia coli (E. coli) υπάρχουν σε διάφορους υποτύπους: υπερβαλλόμενη (SC), ανοιχτή κυκλική (OC) και γραμμική (L) μορφή (Σχήμα 1). Απ' αυτά, τα υπερβαλλόμενα πλάσμιδα παρουσιάζουν άριστη σταθερότητα, αντιγενικότητα και υψηλή αποδοση της μεταφοράς και της έκφρασης.

Σχήμα 1. Διαγραμματική Αναπαράσταση Κοινών Υποτύπων Πλασμίδων

Στην ηλεκτροφόρηση σε αγγειοζύμη, η τάξη της ταχύτητας μεταφοράς των πλασμιδιών DNA είναι υπερβαλλόμενο DNA, γραμμικό DNA και ανοιχτή κυκλική DNA (Σχήμα 2).

Σχήμα 2. Μοτίβο Μεταφοράς Ηλεκτροφόρησης σε Αγγειοζύμη Διαφόρων Υποτύπων Πλασμίδων

Η Yaohai Bio-Pharma έχει βελτιώσει συνεχώς τις διαδικασίες και τις τεχνικές της για να εξασφαλίσει ότι η αναμορφωτική αναλογία των πλάσμιδων μεγάλης επιβολής είναι ≥85% και εκείνη των πλάσμιδων ερευνητικού επιπέδου είναι ≥50%. Το επόμενο είναι μια παρουσίαση περιπτώσεων (Σχήμα 3), όπου η αγαρωσηλική ηλεκτροφόρηση συνδυάζεται με το λογισμικό Gel-Pro Analyzer για να ανιχνευθεί η αναμορφωτική αναλογία.

Σχήμα 3. Αποτελέσματα Ελέγχου Ποιότητας της Αναμορφωτικής Αναλογίας των Πλάσμιδων

Ενδοτοξίνη

Το ενδοτοξίνο, ένα συστατικό της κελλιδιακής τοιχώσεως των γραμματικών αρνητικών βακτηρίων, αποτελείται κυρίως από λιποπολυσάκχαρο A (LPS-A) ως τον τοξικό του συστατικό. Κατά την εξαγωγή πλάσμιδων, το ενδοτοξίνο απελευθερώνεται στη λύση λύσης, επηρεάζοντας σοβαρά την αποδοτικότητα της επιβολής των πλάσμιδων στα κύτταρα. Επιπλέον, μπορεί να ενεργοποιήσει μη-συγκεκριμένες ανοσολογικές απαντήσεις στα κύτταρα, προκαλώντας ψευδοθετικά αποτελέσματα στα πειράματα.

Το Yaohai Bio-Pharma εφαρμόζει μια προσέγγιση "χωρίς εισαγωγή" και "ψηλής αφαίρεσης", ελέγχοντας αυστηρά τη χρήση ιοντόπλοκων και υλικών που περιέχουν ενδοτοξίνες κατά τη διάρκεια της διαδικασίας καθαρισμού. Το εταιρικό έχει επίσης αναπτύξει μια αποτελεσματική μέθοδο αφαίρεσης ενδοτοξινών, προσφέροντας τρία επίπεδα περιεχομένου ενδοτοξινών: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, και ≤0.005 EU/µg.

Το Yaohai Bio-Pharma διαθέτει μια γραμμή υπηρεσίας υψηλής διάβρωσης για την αποστολή πλάσματος, μπορώντας να παρέχει 1 mg αποστολικού πλάσματος σε λιγότερο από μια εβδομάδα. Από προεπιλογή, προσφέρει πάνω από επτά (7) ελέγχους ποιότητας (QC) για να εξασφαλίσει την παράδοση υψηλής ποιότητας και υψηλών προτύπων πλάσματος από διάφορες οπτικές γωνίες.

Επιζητούμε ενεργά παγκόσμιους συνεργάτες, ιδρύματα ή μεμονωμένες οντότητες. Προσφέρουμε την πιο ανταγωνιστική αποζητητική στον τομέα. Εάν έχετε κάποιες ερωτήσεις, μην διστάσετε να μας επικοινωνήσετε: [email protected]