Πλασμίδιο: Ένα μικρό κυκλικό μόριο DNA με μεγάλο δυναμικό

Τα πλασμίδια, μικρά κυκλικά μόρια DNA, χρησιμεύουν ως βασικοί φορείς για τον ανασυνδυασμό του DNA στην έρευνα της μοριακής βιολογίας και τη γονιδιακή θεραπεία. Η απόδοση και η ποιότητα των πλασμιδίων είναι ζωτικής σημασίας, με την υπερτυλιγμένη αναλογία και την περιεκτικότητα σε ενδοτοξίνες να είναι δύο σημαντικοί παράγοντες που επηρεάζουν την ποιότητα του πλασμιδίου.

Υποτύποι πλασμιδίου

Τα πλασμίδια που εξάγονται από το Escherichia coli (E. coli) υπάρχουν σε διάφορους υποτύπους: υπερτυλιγμένες (SC), ανοιχτές κυκλικές (OC) και γραμμικές (L) μορφές (Εικόνα 1). Μεταξύ αυτών, τα υπερτυλιγμένα πλασμίδια επιδεικνύουν εξαιρετική σταθερότητα, αντιγονικότητα και υψηλή αποτελεσματικότητα επιμόλυνσης και έκφρασης.

Σχήμα 1. Σχηματικό διάγραμμα κοινών υποτύπων πλασμιδίου

Στην ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης του πλασμιδικού DNA, η σειρά ταχύτητας μετανάστευσης είναι υπερτυλιγμένο DNA, γραμμικό DNA και ανοιχτό κυκλικό DNA (Εικόνα 2).

Εικόνα 2. Μοτίβο μετανάστευσης ηλεκτροφόρησης γέλης αγαρόζης διαφορετικών υποτύπων πλασμιδίου

Η Yaohai Bio-Pharma βελτιώνει συνεχώς τις διεργασίες και τις τεχνικές της για να διασφαλίσει ότι το υπερτυλιγμένο ποσοστό πλασμιδίων βαθμού επιμόλυνσης είναι ≥85% και αυτό των πλασμιδίων ερευνητικής ποιότητας είναι ≥50%. Ακολουθεί μια επίδειξη περίπτωσης (Εικόνα 3), όπου η ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης συνδυάζεται με το λογισμικό Gel-Pro Analyzer για την ανίχνευση της υπερελικωμένης αναλογίας.

Σχήμα 3. Αποτελέσματα ποιοτικής επιθεώρησης της αναλογίας υπερελικωμένης πλασμιδίου

ενδοτοξίνη

Η ενδοτοξίνη, ένα συστατικό του κυτταρικού τοιχώματος των Gram-αρνητικών βακτηρίων, αποτελείται κυρίως από τον λιποπολυσακχαρίτη Α (LPS-A) ως το τοξικό συστατικό του. Κατά την εκχύλιση του πλασμιδίου, η ενδοτοξίνη απελευθερώνεται στο διάλυμα λύσης, επηρεάζοντας σοβαρά την αποτελεσματικότητα της μορφομετατροπής πλασμιδίου στα κύτταρα. Επιπλέον, μπορεί να ενεργοποιήσει μη ειδικές ανοσολογικές αποκρίσεις στα κύτταρα, οδηγώντας σε ψευδώς θετικά αποτελέσματα στα πειράματα.

Η Yaohai Bio-Pharma υιοθετεί μια προσέγγιση «μη εισαγωγής» και «υψηλής αφαίρεσης», ελέγχοντας αυστηρά τη χρήση αντιδραστηρίων και υλικών που περιέχουν ενδοτοξίνη σε όλη τη διαδικασία καθαρισμού. Η εταιρεία έχει επίσης αναπτύξει μια αποτελεσματική μέθοδο αφαίρεσης ενδοτοξινών, προσφέροντας τρία επίπεδα περιεκτικότητας σε ενδοτοξίνες: ≤0.1 EU/μg, ≤0.01 EU/μg και ≤0.005 EU/μg.

Η Yaohai Bio-Pharma διαθέτει μια σειρά υπηρεσιών εκχύλισης πλασμιδίου υψηλής απόδοσης, ικανή να παρέχει 1 mg εκχυλισμένων πλασμιδίων σε μόλις μία εβδομάδα. Από προεπιλογή, παρέχει περισσότερες από επτά δοκιμές ποιοτικού ελέγχου (QC) για τη διασφάλιση της παράδοσης πλασμιδίων υψηλής ποιότητας, υψηλών προδιαγραφών από πολλαπλές προοπτικές.

Αναζητούμε επίσης ενεργά θεσμικούς ή μεμονωμένους παγκόσμιους εταίρους. Προσφέρουμε την πιο ανταγωνιστική αποζημίωση στον κλάδο. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις, μη διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μας: [email protected]