Βελτίωση της Διαδικασίας Καθαρισμού για Αναπαραγόμενο Ανθρώπινο Ινσουλίνη

Στα τελευταία χρόνια, η αύξηση των ασθενών με διαβήτη έχει οδηγήσει στην αύξηση της ζήτησης για ινσουλίνη, αλλά η κοινοπραγιά ινσουλίνη είναι σε περιορισμένη παροχή. Η αποδεκτική και οικονομική παραγωγή ινσουλίνης είναι κρίσιμη. Παράγεται κυρίως μέσω Escherichia coli (E. coli) και μαγούλας λόγω της γρήγορης ανάπτυξής τους και του χαμηλού κόστους, αλλά η E. coli αντιμετωπίζει περίπλοκες επεξεργασίες μετά την παραγωγή.

Γενική Περιγραφή της Επεξεργασίας Μετά την Παραγωγή:

Η καθαρισμού της αναδρομικής ανθρώπινης ινσουλίνης από τα σώματα περιclusão της E. coli περιλαμβάνει πολλά βήματα, συμπεριλαμβανομένων της ανάκτησης, της πλύσης, της διαλύσιμης και οξειδωτικής, της κοπής, της αντιμετάθεσης βουτύρου, της κρατηματικής καθαρισμού, της κατάθεσης, της αναφύσιωσης, της ενζυματικής κοπής και της μορφοποίησης.

Το Yaohai Bio-Pharma διαθέτει εκτεταμένη εμπειρία στην παραγωγή και καθαρισμό αναδρομικής ινσουλίνης, συνδυασμένη με μια ομάδα ειδικών, εξασφαλίζοντας ότι η παραγωγή ινσουλίνης σας ολοκληρώνεται με υψηλή αποτελεσματικότητα. Με βάση την εμπειρία μας από εκατοντάδες έργα, το Yaohai συνοψίζει πώς να βελτιωθεί ο Καθαριστικός Κύκλος Μετά την Παραγωγή για την Αναδρομική Ανθρώπινη Ινσουλίνη.

Ανάκτηση και Πλύσιμο Σωματιδίων Περιλήψεως:

Οι κύτταρες διατρέχουν με χρήση μηχανικών μεθόδων (όπως η υπερηχοβολία, υψηλή πίεσης ομογενοποίηση) ή αντισεψικής μεταχείρισης με λυσοζύμη, ακολουθούμενη από πλυσιμένα (που περιέχουν ouréa, Triton X-100, κλπ.) για να αφαιρεθούν οι ακαθαρσίες. Κατά τη διάρκεια του πλύσιμου, οι παράμετροι πρέπει να επιβεβαιωθούν για να εξασφαλιστεί η ποιότητα των πρωτεϊνών ενώ ελέγχονται τα κόστη.

Διάλυση και Εξωδικοποίηση Σωματιδίων Περιλήψεως:

Χρησιμοποιούνται υψηλοσυγκεντρώσεις αποσυνδετικών (όπως γκουανινιο χλωρικό και ouréa) για να διαλυθούν τα σώματα περιλήψεως, με προσθήκη dithiothreitol ή β-mercaptoethanol για να προληφθεί η δημιουργία λανθασμένων δεσμών δισυλφιδίου. Το pH και η θερμοκρασία επηρεάζουν σημαντικά τις αντιδράσεις διάλυσης και εξωδικοποίησης.

Αποκοπή και Αντιμεταθεση Βαφών:

Η κατάσχεση με κυανογόνο βρώμιο χρησιμοποιείται για να αφαιρεθεί η N-πρωταρχική αρχική αμινοξέα, αλλά παρουσιάζει θέματα δηλητηριότητας και χαμηλής συγκεκριμένωσης. Μέσω διαλύσεως, υπερφιλτρώσεως ή χρωματογραφίας εξclusion με βάση το μέγεθος, η αντιμεταθέση φωτιών αφαιρεί επιβλαβείς χημικά στοιχεία ενώ προετοιμάζει για επόμενες επιχειρήσεις.

Χρωματογραφική Καθαρισμού και Προβολή:

Χρησιμοποιούνται πολλαπλές χρωματογραφικές τεχνικές για να καθαρίσουν την ενσελίνη, συμπεριλαμβανομένης της χρωματογραφίας φιλίας, της χρωματογραφίας ανταλλαγής ιόντων, της χρωματογραφίας αντιστρόφου φάσης, της χρωματογραφίας υδροφοβικής αλληλεπίδρασης και της χρωματογραφίας εξclusion με βάση το μέγεθος. Οι μέθοδοι προβολής, όπως η προβολή pH και η κρυσταλλοποίηση με ζινκ, χρησιμοποιούνται για να αφαιρεθούν ρύποι και να συγκεντρώσουν τα πρωτεΐνα.

Αναπλάστευση:

Το λυμένο πρωτεΐνης διαβούρκεται σε ένα φιλτρώμα αναπλάστευσης για να προωθηθεί η σωστή δημιουργία δεσμών δισυφένιου και η συμπλοκή της πρωτεΐνης. Η χρωματογραφία υγρού παλινδρομικής συμπλόκησης πρωτεϊνών και η διάλυση είναι επίσης μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για αναπλάστευση.

Ενζυματική Κατάσχεση και Διαμόρφωση:

Ο τρύψινος και ο καρβοξυπεπτιδάση B χρησιμοποιούναι για να κλάσουν το C-πεπτίδιο, δημιουργώντας τον ενεργό ιερόδιμερο ζάχαρης. Τέλος, η κρυσταλλοποίηση και η λυοφιλικοποίηση χρησιμοποιούνται για να αφαιρεθούν οι υπόλοιπες αλάτες και φορτίων, προετοιμάζοντας μια σταθερή συνταγή. Προστίθενται συγκεκριμένα προσθέτα (όπως ζινκ και πρωταμίνη) για να καλύψουν διαφορετικές κλινικές ανάγκες.

Συμπέρασμα:

Μεταχείριση μετά από παραγωγή της ζάχαρης από E. coli είναι πολύπλοκη. Η μελλοντική επιστημονική προσοχή θα πρέπει να επικεντρωθεί στη βελτίωση αυτών των βημάτων για αποτελεσματική και οικονομική παραγωγή προκειμένου να καλύψει η ζήτηση και να μειώσει τους κόστους.

Το Yaohai Bio-Pharma αναζητά ενεργά παγκόσμιους εταίρους, θεσμικούς ή ιδιώτες, και προσφέρει την πιο ανταγωνιστική αποδοχή στη βιομηχανία. Εάν έχετε οποιαδήποτε ερώτηση, μην διστάσετε να μας επικοινωνήσετε: [email protected]