LNP Lipied Samestelling Identifiseer en Hoeveelheid
Die Belangrikheid van LNP Lipied Samestelling Analise
Lipied-nanopartikels (LNP's), wat kationiese lipied, cholesterol, fosfolipied en PEG-gekonjugeerde lipied bevat, dien as prominente afleweringstelsels vir mRNA-geneesmiddelprodukte. Die stabiliteit en dubbellaag-vloeibaarheid van LNP's hang af van die eienskappe en inhoud van die verskillende lipiede wat in die formuleringsisteem gebruik word. Die samestelling van die lipiede is baie belangrik vir hoe goed LNP's dwelms aflewer.
Yaohai-BioPharma bied oplossings vir die identifisering en kwantifisering van mRNA-LNP-lipiedsamestelling deur gebruik te maak van die hoëprestasie-vloeistofchromatografie met gelaaide aërosol-opsporing (HPLC-CAD) metode.
Regulerende vereistes vir lipiedsamestelling
Volgens die WGO se regulatoriese oorwegings, "moet die finale samestelling van die entstof, insluitend die lipiede, beskryf word saam met die hoeveelheid van die komponente in elke aanbieding."
Analitiese metode
Analise |
Metodes |
Lipied samestelling |
HPLC gekombineer met Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Prosedure
Stap 1. Lipiedmonstervoorbereiding
Die keuse van verdunningsmiddel is van kardinale belang vir die ontleding van lipiedkomponente in mRNA-LNP geneesmiddelprodukte. Die verdunningsmiddel behoort elke lipiedkomponent effektief op te los en enige interaksies tussen lipiede en ingekapselde mRNA te ontwrig. Potensiële verdunningsmiddels sluit in etanol, etanol/dimetielsulfoksied (DMSO), etanol/formamied, etanol/triëtielamienasetaat, en ander.
Stap 2. HPLC-CAD
Omgekeerde fase vloeistofchromatografie (RP-HPLC) gepaard met 'n gelaaide aerosol detektor (CAD) is ingesluit in LNP lipied samestelling toetsing. Aangesien lipiede nie chromofore het nie en nie ultraviolet (UV) straling absorbeer sonder derivatisering nie, is vervlugtiging tipies uitdagend. CAD, wat meer sensitief is, kan 'n breër spektrum van lipiedinhoud onderskei. Voorheen is 'n ultrahoë werkverrigting vloeistofchromatografie (UHPLC) tesame met 'n gelaaide aërosoldetektor (CAD) metode geformuleer en toegepas in lipiedanalise vir klein interfererende RNA (siRNA) LNP studies.
Stap 3. Data-analise
Die hoeveelheid van elke lipied binne die monster behels berekeninge afgelei van die standaardkromme vermenigvuldig met die verdunningsfaktor. Hierdie proses het die lipiedinhoud vir elke bestanddeel binne die mRNA-LNP monster opgelewer.
Geval van LNP Lipied Samestelling Analise met HPLC-CAD
Gebaseer op HPLC-CAD, het Yaohai-BioPharma 'n robuuste metode ontwikkel vir die ontleding van lipiedkomponente van mRNA-LNP. Hierdie metode is bekragtig om lineêr, herhaalbaar, presies, akkuraat en spesifiek vir LNP-formulerings te wees, wat prosesontwikkeling, formuleringsontwikkeling, stabiliteitstoetsing en mRNA-LNP-vrystelling kan ondersteun.
Chromatografiese profiel van 4 lipiede deur Yaohai-BioPharma se HPLC-CAD metode
Die lineariteit van Yaohai-BioPharma se HPLC-CAD-metode (R2＞0.99)
EN
