Плазмид: Мали кружни молекул ДНК са великим потенцијалом

Плазмиди, мали кружни молекули ДНК, служе као есенцијални вектори за рекомбинацију ДНК у истраживању молекуларне биологије и генској терапији. Принос и квалитет плазмида су од пресудног значаја, при чему су пропорција суперцоиллед и садржај ендотоксина два значајна фактора која утичу на квалитет плазмида.

Подтипови плазмида

Плазмиди екстраховани из Есцхерицхиа цоли (Е. цоли) постоје у различитим подтиповима: супернамотани (СЦ), отворени кружни (ОЦ) и линеарни (Л) облици (Слика 1). Међу њима, суперцоилирани плазмиди показују одличну стабилност, антигеност и високу ефикасност трансфекције и експресије.

Слика 1. Шематски дијаграм уобичајених подтипова плазмида

У електрофорези плазмидне ДНК у агарозном гелу, редослед брзине миграције је суперзамотана ДНК, линеарна ДНК и отворена кружна ДНК (слика 2).

Слика 2. Образац миграције електрофорезе агарозног гела различитих подтипова плазмида

Иаохаи Био-Пхарма је континуирано унапређивала своје процесе и технике како би осигурала да удео суперсмотаних плазмида за трансфекцију буде ≥85%, а плазмида за истраживање ≥50%. Следи демонстрација случаја (Слика 3), где се електрофореза у агарозном гелу комбинује са софтвером Гел-Про Анализер да би се открио супернамотани део.

Слика 3. Резултати инспекције квалитета пропорције суперцоилед плазмида

Ендотоксин

Ендотоксин, компонента ћелијског зида грам-негативних бактерија, првенствено се састоји од липополисахарида А (ЛПС-А) као његове токсичне компоненте. Током екстракције плазмида, ендотоксин се ослобађа у раствор за лизу, што озбиљно утиче на ефикасност трансфекције плазмида у ћелије. Поред тога, може активирати неспецифичне имуне одговоре у ћелијама, што доводи до лажних позитивних резултата у експериментима.

Иаохаи Био-Пхарма усваја приступ „неувођења“ и „високог уклањања“, стриктно контролишући употребу реагенса и материјала који садрже ендотоксин током процеса пречишћавања. Компанија је такође развила ефикасан метод уклањања ендотоксина, који нуди три нивоа садржаја ендотоксина: ≤0.1 ЕУ/µг, ≤0.01 ЕУ/µг и ≤0.005 ЕУ/µг.

Иаохаи Био-Пхарма поседује високопропусну линију за екстракцију плазмида, способну да испоручи 1 мг екстрахованих плазмида за само недељу дана. Подразумевано, пружа више од седам тестова контроле квалитета (КЦ) како би се обезбедила испорука висококвалитетних плазмида високог стандарда из више перспектива.

Такође активно тражимо институционалне или појединачне глобалне партнере. Нудимо најконкурентнију накнаду у индустрији. Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте: ЦРО@иаохаибио.цн