Искориштавање моћи стратегије ферментације са ферментацијом Србија

Пицхиа пасторис се широко користи у производњи различитих хетерологних протеина. Технологија ферментације високе густине ћелија (ХЦДФ), имплементирана кроз Фед-Батцх храњење, успешно је постигла производњу великих размера биофармацеутика и индустријских ензима. У прецизно контролисаним медијима, коришћењем ХЦДФ технологије се могу добити рекомбинантни протеини високог приноса, високе активности и исплативи.

Недавна истраживања показују да се кроз ХЦДФ стратегије улажу напори да се повећа производња и активност хетерологних протеина у Пицхиа пасторис. ХЦДФ технологија омогућава постизање кластера високог нивоа без напора у дефинисаним медијима, чиме се омогућава набавка обилних рекомбинантних протеина са повећаном активношћу и смањеним трошковима кроз ХЦДФ. Међутим, избор одговарајуће ХЦДФ стратегије за оптимизацију експресије специфичних протеина на високом нивоу у Пицхиа пасторис остаје изазов.

Ферментација велике густине ћелија (ХЦДФ)

Пицхиа пасторис се истиче у производњи хетерологних протеина, фаворизованих за ХЦДФ у аутоматизованим биореакторима. ХЦДФ има 3 фазе: шаржа глицерола, храњење и индукција метанола. Иаохаи Био-Пхарма се може похвалити више од деценије искуства у микробној ферментацији и послужила је преко 400 пројеката. Компанија поседује опсежну експертизу и добро развијену технологију, што јој омогућава да користи различите ХЦДФ стратегије за побољшање ефикасности производње протеина.

Метанол служи и као индуктор АОКС1 и као извор угљеника, али његова концентрација се мора контролисати да би се спречила токсичност. Процена различитих стратегија храњења метанолом је кључна за оптимизацију раста Пицхиа пасторис и експресије протеина

Стратегија индукције метанола

У стратегији индукције метанола ХЦДФ са напајаном шаржом, стратегије индукције засноване на стању обухватају скуп контролних методологија које регулишу додатно додавање метанола путем онлајн/оффлине или контроле унапред/обрнуто. Међу стратегијама статистичке индукције, главне су μ-стат, раствор раствореног кисеоника (ДО), метанол-стат и биомаса-стат.

1.1 μ-стат

μ-стат стратегија одржава биомасу стабилном контролом μ, помажући репродуктивност и проучавањем μ-овог ефекта на експресију протеина. Међутим, недостаје му директна контрола метанола и ДО, ризикујући акумулацију и стварање РОС.

1.2 ДО-стат

ДО-стат стратегија индиректно регулише исхрану метанола контролисањем раствореног кисеоника да би се одржала оксигенација, али не фиксира концентрацију метанола и брзину раста, што може утицати на проучавање експресије протеина. Оксигенација представља изазов у ​​аеробној ферментацији, и док суплементација чистог кисеоника може бити скупа и токсична, повећање притиска је економичнији приступ који такође може повећати активност протеина.

1.3 Метанол-стат

Неадекватна контрола концентрације метанола представља ограничења и за μ-стат и за ДО-стат стратегије. Статистичке стратегије метанола, које раде у укључено/искључено режиму, склоне су флуктуацијама и немају прецизност. Насупрот томе, ПИД контролери нуде прецизнију регулацију концентрације метанола, побољшавајући укупну ефикасност ферментације.

1.4 Биомаса-стат

Стратегија за статистику биомасе дефинише однос између биомасе и храњења метанолом, оптимизујући брзину храњења метанолом како би се повећао принос протеина. Онлине праћење биомасе је практичније, при чему је проточна цитометрија пожељна метода. На скали од 1000Л, оптимизација брзине храњења метанола значајно побољшава активност ензима, принос и продуктивност, надмашујући ферментацију у балону.

Стратегија заједничког храњења

Глицерол, као инхибитор АОКС1 промотера, мора се у потпуности конзумирати пре индукције метанола да би се избегло сузбијање производње протеина. Ко-супстрати могу повећати активност ензима, али вишак глицерола може штетити расту и експресији. Сорбитол, аскорбинска киселина, манитол и други могу заменити глицерол, смањујући време протеолизе и култивације и повећавајући експресију протеина.

Банка сојева захтева усвајање одговарајућих метода очувања и смештај у одговарајуће окружење да би се одржала стабилност карактеристика соја. Иаохаи Био-Пхарма може да испуни захтеве за очување залиха глицерола (преко замрзивача на ултра ниским температурама или течним азотом) и конзервацију квасца и Е. цоли сушењем замрзавањем.

Стратегија изазвана ограничењем

Код Пицхиа пасторис, рестриктивни услови попут ниске ДО, концентрације метанола и ограничења кисеоника повећавају експресију рекомбинантног протеина. Услови ограничени кисеоником активирају промотор АОКС1 преко акумулације метанола, повећавајући излаз протеина уз смањење топлоте. Индукција на ниској температури повећава принос, активност, стабилност и одрживост ћелија, али повећава трошкове хлађења. Ограничење пХ и азота такође помаже експресији, што захтева опрез да би се избегли проблеми у раду. Ограничење азота значајно повећава специфичну продуктивност протеина.

Иаохаи Био-Пхарма такође активно тражи институционалне или појединачне глобалне партнере и нуди најконкурентнију надокнаду у индустрији. Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте: БД@иаохаибио.цн