Plazmidové šablóny mRNA: kľúčové prvky a dizajnové stratégie

Vytváranie mRNA pre vakcíny alebo terapie začína dobre navrhnutým plazmidovým templátom. Tu je rýchly sprievodca kľúčovými prvkami a tým, ako sú optimalizované na úspech.

Promotér: Kde sa začína prepis

Promótor T7 je najobľúbenejšou voľbou na spustenie syntézy mRNA. Jeho klasická sekvencia „TAATACGACTCACTATAGGG“ zaisťuje účinnú transkripciu. V priebehu času vedci vyvinuli variácie, ako sú šablóny GG, AG a AT / AU, aby mohli pracovať s pokročilými systémami uzatvárania, ako sú CleanCap alebo samozosilňovacie platformy RNA.

Linearizácia: Presné rezanie plazmidu

Aby sa zabránilo nekonečnému prepisovaniu plazmidu, je potrebné ho rozrezať na konkrétnom mieste. Enzýmy typu IIS, ako napríklad BspQⅠ alebo BsaⅠ, sú ideálne pre túto prácu. Odstrihnú DNA mimo svojej rozpoznávacej sekvencie, pričom za sebou nezanechajú žiadne ďalšie kúsky a zachovajú rozhodujúci polyA chvost.

Plán mRNA: Stavebné kamene úspechu

Sekvencia mRNA obsahuje 5' uzáver, nepreložené oblasti (UTR), kódujúcu sekvenciu (CDS) a polyA koniec. Tu je návod, ako je každá časť navrhnutá:

• UTR: Môžu byť požičané z vysoko exprimovaných prirodzených génov (ako sú tie vo vírusoch) alebo prispôsobené pomocou pokročilých algoritmov pre lepší výkon.
• CDS: Vedci najprv navrhnú proteínovú sekvenciu, potom optimalizujú kód DNA pre efektívnu expresiu.
• PolyA chvost: Úsek 100–120 adenínov alebo segmentovaná verzia ako 30A + Linker + 70A zaisťuje, že mRNA zostane stabilná a funkčná.

Zvládnutím týchto prvkov môžu výskumníci vytvoriť výkonné šablóny mRNA pre všetko od vakcín až po špičkové terapie. Budúcnosť medicíny začína tu!

Yaohai Bio-Pharma je platforma špecializujúca sa na služby pre systémy mikrobiálnej expresie. Na základe desaťročí odborných znalostí Yaohai vyvinul komplexný súbor technológií v súlade s GMP na syntézu lineárnej a kruhovej mRNA, ktorý ponúka vysokokvalitné produkty RNA, ktoré zahŕňajú návrh a optimalizáciu sekvencií, génovú syntézu, in vitro transkripciu (IVT), cirkularizáciu, purifikáciu RNA a zapuzdrenie LNP.

Aktívne tiež hľadáme inštitucionálnych alebo individuálnych globálnych partnerov. Ponúkame najkonkurencieschopnejšiu kompenzáciu v odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhajte nás kontaktovať: [email protected]