Monoklonale antistoffer Produksjon i E. coli: fremskritt og utsikter

Monoklonale antistoffer (mAbs), som er løselige glykoproteiner på omtrent 150 kDa bestående av tunge og lette kjeder, er mye brukt i behandlingen av kreft og autoimmune sykdommer. De siste årene har produksjonsmetodene for mAbs og deres derivater blitt mangfoldige, med Escherichia coli (E. coli) fremstår som en viktig vert for produksjon av antistofffragmenter.

I produksjon av mAbs utmerker Yaohai Bio-Pharma seg med rik FoU-erfaring. Med en moden plattform, avansert utstyr og nyskapende full-økologisk uttrykksteknologi, tilbyr Yaohai one-stop-tjenester fra cellebankkonstruksjon til fill&finish, fullt tilpassede mAbs for klienter.

Produksjonsmetoder for mAbs i E. coli

E. coli tilbyr rask vekst, lave kostnader, enkel betjening og fleksibilitet i uttrykk i cytoplasma, periplasma eller kulturmediet. I E. coli er antistoffproduksjon hovedsakelig kategorisert i periplasmatisk, cytoplasmatisk og semioksidert cytoplasmatisk produksjon, samt cellefri proteinsyntese (CFPS) systemer. Periplasmatisk produksjon har oppnådd høye utbytter av funksjonelt full-lengde immunoglobulin G (FL-IgG) gjennom optimalisert ekspresjon og sekresjonsbalanse. Cytoplasmatisk produksjon står overfor utfordringer på grunn av det reduserende miljøet, men funksjonell FL-IgG har blitt uttrykt med suksess av tekniske stammer for å skape et oksidativt miljø. CFPS-systemet har oppnådd effektiv antistoffproduksjon ved å justere translasjonsinitieringsregioner og legge til chaperoneproteiner.

Antistoffkarakterisering og kvalitetskontroll

Kvalitetskontroll av antistoffer inkluderer biokjemiske, biofysiske og biologiske karakteriseringer. Biokjemisk karakterisering analyserer blant annet antistoffstruktur, sekvens og glykosylering. Biofysisk karakterisering evaluerer homogenitet, løselighet og stabilitet. Biologisk karakterisering validerer antistoffbioaktivitet, inkludert ADCC og CDC, blant andre. Selv om deglykosylerte antistoffer produsert i E. coli mangler visse Fc-effektorfunksjoner, har studier vist at deres stabilitet er lik stabiliteten til glykosylerte antistoffer, og de viser lignende terapeutisk effekt under testede forhold.

For å gjenopprette eller forsterke immuneffektene til deglykosylerte antistoffer, kan Fc-domener konstrueres. For eksempel kan mutanter som binder seg til FcɣRI screenes for å forbedre ADCC-effektorfunksjonen. Disse konstruerte antistoffene viser betydelige biologiske effekter og terapeutisk potensial både in vitro og in vivo.

Konklusjon

Oppsummert har produksjonen av deglykosylerte antistoffer i E. coli gjort viktige fremskritt innen antistoffproduksjon, reduserte kostnader og forbedret kvalitet. Selv om de mangler visse Fc-effektorfunksjoner, viser de gjennom ingeniørdesign forbedrede effektorfunksjoner og terapeutisk potensial. Det er forventet at flere deglykosylerte antistoffer produsert i E. coli vil gå inn i kliniske studier i fremtiden.

Vi søker også aktivt etter institusjonelle eller individuelle globale partnere. Vi tilbyr den mest konkurransedyktige kompensasjonen i bransjen. Hvis du har spørsmål, kan du gjerne kontakte oss på [email protected]