Championing Reporter RNA Modification Methods

כאשר בוחרים איזו שיטה של ​​שינויי mRNA של כתב עדיפה, אין תשובה מוחלטת מכיוון שלכל שיטה וגן כתב יש יתרונות משלו ותרחישים ישימים. להלן כמה שיטות נפוצות לשינוי mRNA וגנים מדווחים, יחד עם המאפיינים וההתאמה שלהם.

שיטות שינוי mRNA

מתילציה:

1. m6A: קשור ליציבות mRNA, שחבור, תרגום ועיבוד miRNA. אתגרי האיתור כוללים בחירת נוגדנים ולוקליזציה.
2. 5' Cap Nm: משפר יציבות, שחבור, פוליאדנילציה וייצוא גרעיני. עוזר להבחין בין RNA עצמי ל-RNA זר.
3. פסאודורידילציה: משנה קודונים, משפר את היציבות ומגיב ללחץ. מזורז על ידי סינתזות פסאודורידין.

הקדמה של נוקלאוטידים לא טבעיים:

1. הוצג במהלך שעתוק עם אסטרטגיית שינוי כימי כפולה. זה משפר יציבות, יעילות וביטוי חלבון.

כתב ג'נס

1. גן חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP): יתרונות: קל לזיהוי, תכונות הקרינה יציבות, לא רעיל לתאים, מתאים להדמיית תאים חיים. חסרונות: עוצמת הקרינה מוגבלת.
2. חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (eGFP): יתרונות: בהיר יותר פי 6 מ-GFP מסוג פרא, מה שהופך אותו למתאים יותר כגן כתב לחקר ביטוי גנים, ויסות, התמיינות תאים, לוקליזציה והובלה של חלבונים בתוך אורגניזמים.
3. חלבונים ניאון אדומים (למשל, mCherry): יתרונות: אורכי גל עירור ופליטות ארוכים יותר, וכתוצאה מכך רקע נמוך יותר במהלך הדמיה תוך תאית, בהירות פלואורסצנטית מצוינת ויציבות פוטו, ורעילות תאית נמוכה יותר. חסרונות: עשוי שלא להיות בשימוש נפוץ כמו GFP בתנאים ניסיוניים מסוימים.
4. גחלילית לוציפראז: יתרונות: בנוכחות ATP, יוני מגנזיום וחמצן, זה יכול לזרז את החמצון של לוציפרין לאוקסילוציפרין, תוך פליטת ביולוגית. זה מתאים לשימוש כבקר לחקר יעילות התרגום של גני מטרה בתאי יונקים, כדאיות תאים ומבחני הדמיה in vivo.

סיכום

כאשר בוחרים איזו שיטה של ​​שינויי mRNA של כתב עדיפה, זה תלוי ביעדים ניסויים ספציפיים, רקע מחקר ותנאי ניסוי. לדוגמה, אם נדרשת רגישות גבוהה, eGFP עשוי להיות בחירה טובה יותר. אם יש צורך בהדמיה באורכי גל ארוכים יותר כדי להפחית הפרעות רקע, חלבונים ניאון אדומים כמו mCherry עשויים להתאים יותר. בנוסף, בהתבסס על צרכי השינוי הספציפיים של mRNA (למשל, שיפור היציבות, שיפור יעילות התרגום), ניתן לבחור את שיטת השינוי המתאימה.

בתור ה-CRDMO המיקרוביאלי הביולוגי הראשון והגדול ביותר בסין הגדולה, Yaohai Bio-Pharma מציעה פתרונות מותאמים מקצה לקצה או שירותים עצמאיים, החל מסינתזת RNA, הנדסת זנים ובנייה, פיתוח תהליכים במעלה הזרם ומורד הזרם, ועד ל-GMP או לא. - ייצור חומרי תרופות ברמת GMP, ושירותי מילוי וגימור עבור שיטות שונות, כגון mRNA, circRNA, פלסמיד RNA, חלבונים רקומביננטיים, פפטידים, אנזימים, נוגדנים מתחום יחיד ו-VLPs לשימוש אנושי וטרינרי.

Yaohai Bio-Pharma גם מחפשת באופן פעיל שותפים גלובליים מוסדיים או בודדים ומציעה את התמורה התחרותית ביותר בתעשייה. אם יש לך שאלות, אנא אל תהסס לפנות אלינו: [email protected]