P. pastoris'e maagia: rekombinantse valgu tootmise kujundamine

Rekombinantsed valgud, mis on geenitehnoloogia meetodite kaudu peremeesrakkudes ekspresseeritud valgud, on leidnud laialdast rakendust biomeditsiinilistes uuringutes, teraapias ja diagnostikas. Sobiva ekspressioonisüsteemi valik on rekombinantsete valkude edukas ekspressioonis ülioluline tegur.

Yaohai Bio-Pharmal on enam kui kümneaastane kogemus pärmitüve raamatukogu ehitamise ja tootmise alal. Selles artiklis käsitleb Yaohai üksikasjalikult Pichia pastoris (P. pastoris) rekombinantse valgu ekspressioonisüsteemi üksikasju.

P. pastoris rekombinantse valgu ekspressioonisüsteemina

P. pastoris kui metüülotroofne pärm on võimeline tõhusalt kasutama C1 ühendeid, nagu metanool, muutes selle ideaalseks peremeheks rekombinantsete valkude tootmiseks. Protsess hõlmab sihtmärk-DNA-d kandva vektori sisestamist pärmi, kasutades rekombinantse valgu ekspresseerimiseks pärmi eukarüootseid rakulisi omadusi. Heteroloogne geeniekspressioonisüsteem, mis kasutab peremeesorganismina P. pastorist, on viimastel aastatel kiiresti arenenud ning seda peetakse oluliseks ja laialdaselt tunnustatud vahendiks molekulaarbioloogias rekombinantsete valkude tootmiseks.

Strateegia jaoks P. pastoris väljendussüsteem

Optimeerimisstrateegiad P. pastoris fermentatsiooniprotsessid

Fermentatsiooniprotsesside tõhususe suurendamiseks on P. pastoris'e kääritamise ajal tüvega manipuleerimise integreerimine ja erinevate strateegiate vastuvõtmine ülioluline. Kuigi on olemas P. pastoris'e fermentatsiooniks tavaliselt kasutatavad tingimused, sõltuvad optimaalsed tingimused suuresti soovitud produktist, kasutatavast geneetilisest koostisest ja sellest, kas toote reguleerimine saavutatakse konstitutiivse või indutseeritava promootori kaudu. P. pastoris'e eduka täiustamise, optimeerimise ja simulatsiooni peamised tegurid hõlmavad fermentatsiooniparameetrite reguleerimist, töörežiimide valikut ja matemaatiliste mudelite kasutamist. Fermentatsiooniprotsessi optimeerimine hõlmab parameetrite, nagu temperatuur, pH, söötme koostis ja lahustunud hapnik, täpset valimist, samuti sobivate töörežiimide, nagu pidev ja etteantud partii kääritamine. Lisaks saab fermentatsiooniprotsessi optimeerimise täiustamiseks kasutada genoomipõhiseid metaboolseid mudeleid ja matemaatilisi meetodeid.

Järeldus

Võrreldes bakteritega on P. pastorisel kui eukarüootsel organismil fermentatsiooniprotsessis ainulaadsed eelised. Seetõttu peetakse P. pastorist peamiseks mikroobseks platvormiks rekombinantsete valkude tootmisel. Soovitud valgu kõrge saagise saavutamiseks on vajalik protsessi optimeerimine.

Rakupanganduse tõhus ja kiire areng on toote turuletoomise protsessis ülioluline. Kui vajate P. pastoris'e või muude pärmitüvede ehitamist, võib Yaohai pakkuda teile laialdasi mikroobirakkude panganduse ehitamise kogemusi, professionaalseid regulatiivseid juhiseid ja CDMO-teenuseid. Oleme koostanud mõistliku arendusplaani, mis minimeerib rekombinantsete bioloogiliste toodete CMC arendustsüklit, vältides samas riske.

Otsime aktiivselt ka institutsionaalseid või individuaalseid globaalseid partnereid. Pakume valdkonna kõige konkurentsivõimelisemat tasu. Kui teil on küsimusi, võtke meiega julgelt ühendust: [email protected]