Πρότυπα πλασμιδίου mRNA: Βασικά στοιχεία και στρατηγικές σχεδίασης

Η δημιουργία mRNA για εμβόλια ή θεραπείες ξεκινά με ένα καλά σχεδιασμένο πρότυπο πλασμιδίου. Ακολουθεί ένας γρήγορος οδηγός για τα βασικά στοιχεία και πώς βελτιστοποιούνται για επιτυχία.

The Promoter: Where Transcription Begins

Ο προαγωγέας Τ7 είναι η πιο δημοφιλής επιλογή για την έναρξη της σύνθεσης mRNA. Η κλασική του ακολουθία, "TAATACGACTCACTATAGGG", εξασφαλίζει αποτελεσματική μεταγραφή. Με την πάροδο του χρόνου, οι επιστήμονες ανέπτυξαν παραλλαγές όπως τα πρότυπα GG, AG και AT/AU για να λειτουργούν με προηγμένα συστήματα κάλυψης, όπως το CleanCap ή οι αυτοενισχυόμενες πλατφόρμες RNA.

Γραμμικοποίηση: Κοπή του πλασμιδίου για ακρίβεια

Για να σταματήσει η ατελείωτη μεταγραφή του πλασμιδίου, πρέπει να κοπεί σε μια συγκεκριμένη θέση. Τα ένζυμα τύπου IIS, όπως το BspQⅠ ή το BsaⅠ, είναι τέλεια για αυτή τη δουλειά. Κόβουν το DNA έξω από την αλληλουχία αναγνώρισής τους, χωρίς να αφήνουν επιπλέον κομμάτια πίσω και διατηρώντας την κρίσιμη ουρά polyA.

Το προσχέδιο mRNA: Δομικά στοιχεία της επιτυχίας

Η αλληλουχία mRNA περιλαμβάνει ένα κάλυμμα 5', αμετάφραστες περιοχές (UTRs), μια κωδικοποιητική αλληλουχία (CDS) και μια ουρά πολυΑ. Δείτε πώς σχεδιάζεται κάθε μέρος:

• UTR: Αυτά μπορούν να δανειστούν από φυσικά γονίδια υψηλής έκφρασης (όπως αυτά στους ιούς) ή να σχεδιαστούν ειδικά με χρήση προηγμένων αλγορίθμων για καλύτερη απόδοση.
• CDS: Οι επιστήμονες σχεδιάζουν πρώτα την πρωτεϊνική αλληλουχία και μετά βελτιστοποιούν τον κώδικα του DNA για αποτελεσματική έκφραση.
• PolyA Tail: Ένα τέντωμα 100–120 αδενινών ή μια τμηματοποιημένη έκδοση όπως το 30A + Linker + 70A, διασφαλίζει ότι το mRNA παραμένει σταθερό και λειτουργικό.

Με τον έλεγχο αυτών των στοιχείων, οι ερευνητές μπορούν να δημιουργήσουν ισχυρά πρότυπα mRNA για τα πάντα, από εμβόλια έως θεραπείες αιχμής. Το μέλλον της ιατρικής ξεκινά εδώ!

Η Yaohai Bio-Pharma, είναι μια επιχείρηση πλατφόρμας που ειδικεύεται στις υπηρεσίες για συστήματα μικροβιακής έκφρασης. Βασιζόμενη σε μια δεκαετία εμπειρίας, η Yaohai έχει αναπτύξει μια ολοκληρωμένη σειρά τεχνολογιών συμβατών με GMP για τη σύνθεση γραμμικού και κυκλικού mRNA, προσφέροντας προϊόντα RNA υψηλής ποιότητας που περιλαμβάνουν σχεδιασμό και βελτιστοποίηση αλληλουχίας, σύνθεση γονιδίων, μεταγραφή in vitro (IVT), κυκλοποίηση, καθαρισμό RNA και ενθυλάκωση LNP.

Αναζητούμε επίσης ενεργά θεσμικούς ή μεμονωμένους παγκόσμιους εταίρους. Προσφέρουμε την πιο ανταγωνιστική αποζημίωση στον κλάδο. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις, μη διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μας: [email protected]