Εξερευνήστε τον συναρπαστικό κόσμο της βροχόπτωσης χλωριούχου λιθίου

Η καθίζηση με χλωριούχο λίθιο χρησιμοποιείται ευρέως για τον διαχωρισμό του RNA από το διάλυμα.

Ακολουθεί η ανάλυση της διαδικασίας:

1. Προετοιμασία δείγματος: Ξεκινήστε με ένα δείγμα που περιέχει RNA, όπως π.χ in-vitro μείγμα μεταγραφής.

2. Προσθήκη χλωριούχου λιθίου: Προσθέστε κατάλληλο όγκο πυκνού διαλύματος χλωριούχου λιθίου στο διάλυμα RNA.

3. Επώαση: Μετά την προσθήκη χλωριούχου λιθίου, το διάλυμα επωάζεται σε χαμηλή θερμοκρασία, γενικά γύρω στους -20°C. Αυτό αναγκάζει τα μόρια RNA να καθιζάνουν έξω από το διάλυμα.

4. Φυγοκέντρηση: Μετά την επώαση, το διάλυμα φυγοκεντρείται σε υψηλή ταχύτητα. Αυτό διαχωρίζει το κατακρημνισμένο RNA από το υπόλοιπο διάλυμα, το οποίο περιέχει ακαθαρσίες.

5. Πλύσιμο: Μόλις ολοκληρωθεί η φυγοκέντρηση, αφαιρέστε προσεκτικά το υπερκείμενο αλλά χωρίς να παρεμποδίσετε την καθίζηση του RNA. Πλύνετε τα σωματίδια RNA με κρύα αιθανόλη ή ισοπροπυλική αλκοόλη για να αφαιρέσετε τυχόν εναπομείνασες ακαθαρσίες.

6. Επαναιώρημα RNA: Μετά την πλύση, το ίζημα RNA ξηραίνεται για λίγο στον αέρα και στη συνέχεια επαναιωρείται σε κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα, όπως ρυθμιστικό διάλυμα ΤΕ (ρυθμιστικό διάλυμα Tris-EDTA) ή απεσταγμένο νερό. Ενδέχεται να απαιτούνται ήπια ροή με πιπέτα ή δινορεύματα για την επαρκή επαναιώρηση του RNA.

7. Ποσοτικοποίηση και ανάλυση: Τέλος, το απομονωμένο RNA ποσοτικοποιείται με φασματοσκοπία υπεριώδους ή με μέθοδο φθορισμού. Αυτό καθορίζει τη συγκέντρωση και την καθαρότητα του δείγματος RNA, η οποία είναι σημαντική για κατάντη εφαρμογές όπως η ενθυλάκωση LNP και η μορφομετατροπή των κυττάρων.

Η Yaohai Bio-Pharma είναι ειδικευμένη στη χρήση της μεθόδου καθίζησης με χλωριούχο λίθιο στη διαδικασία παραγωγής επειδή είναι απλή, χαμηλού κόστους και παράγει υψηλής ποιότητας RNA κατάλληλο για μια ποικιλία εφαρμογών μοριακής βιολογίας. Ωστόσο, είναι σημαντικό να βελτιστοποιηθούν οι συνθήκες (π.χ. συγκέντρωση χλωριούχου λιθίου, χρόνος επώασης, ταχύτητα φυγοκέντρησης) για να επιτευχθούν τα καλύτερα αποτελέσματα για ένα συγκεκριμένο δείγμα.

Βασιζόμενοι στην ισχυρή και ιδιόκτητη πλατφόρμα μας RNASci, παρέχουμε επίσης εξατομικευμένες υπηρεσίες σύνθεσης RNA, καθώς και προϊόντα καταλόγου mRNA (έως 10 kb), circRNA (έως 4 kb) και LNP. Έχουμε δημιουργήσει ένα πλήρες σύνολο τεχνολογιών σύνθεσης mRNA/circRNA για να παρέχουμε RNA υψηλής ποιότητας, όπως σχεδιασμό και βελτιστοποίηση αλληλουχίας, IVT, κυκλοποίηση, καθαρισμό και ενθυλάκωση LNP. Όλα τα προϊόντα κυκλοφορούν σύμφωνα με τα αυστηρά πρότυπα ποιοτικού ελέγχου.

Το Yaohai Bio-Pharma είναι το πρώτο και μεγαλύτερο βιολογικό CRDMO αφιερωμένο στα συστήματα μικροβιακής έκφρασης στην ευρύτερη Κίνα. Προσφέρουμε ολοκληρωμένες λύσεις προσαρμοσμένες από άκρο σε άκρο ή αυτόνομες υπηρεσίες που κυμαίνονται από σύνθεση RNA, μηχανική στελεχών και κατασκευή, ανάπτυξη διεργασιών ανάντη και κατάντη, έως παραγωγή φαρμακευτικών ουσιών σε επίπεδο GMP ή μη GMP και υπηρεσίες πλήρωσης και φινιρίσματος για διάφορα τροποποιήσεις, όπως mRNA, circRNA, πλασμιδικό RNA, ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες, πεπτίδια, ένζυμα, αντισώματα μονής περιοχής (sdAbs) και VLPs. Δεσμευόμαστε να καλύψουμε τις κλινικές και εμπορικές ανάγκες των παγκόσμιων πελατών σε βιολογικά φάρμακα, εμβόλια και διαγνωστικά τόσο για ανθρώπινη όσο και για κτηνιατρική χρήση.

Η Yaohai Bio-Pharma αναζητά επίσης ενεργά θεσμικούς ή μεμονωμένους παγκόσμιους εταίρους και προσφέρει την πιο ανταγωνιστική αποζημίωση στον κλάδο. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις, μη διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μας: [email protected]