রিকম্বিন্যান্ট হিউম্যান ইনসুলিনের পরিশোধন প্রক্রিয়ার অপ্টিমাইজেশন

সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, ডায়াবেটিস রোগীদের বৃদ্ধি ইনসুলিনের চাহিদা বৃদ্ধি করেছে, কিন্তু সাশ্রয়ী মূল্যের ইনসুলিনের সরবরাহ কম। দক্ষ, সাশ্রয়ী মূল্যের ইনসুলিন উৎপাদন অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। দ্রুত বৃদ্ধি এবং কম খরচের কারণে প্রধানত Escherichia coli (E. coli) এবং ঈস্টের মাধ্যমে উৎপাদিত, E. coli জটিল প্রবাহ প্রক্রিয়াকরণের সম্মুখীন হয়।

ডাউনস্ট্রিম প্রক্রিয়াকরণের সারসংক্ষেপ:

ই. কোলাই ইনক্লুশন বডি থেকে রিকম্বিন্যান্ট হিউম্যান ইনসুলিন পরিশোধনের ক্ষেত্রে একাধিক ধাপ জড়িত, যার মধ্যে রয়েছে পুনরুদ্ধার, ধোয়া, দ্রাব্যীকরণ এবং জারণ, ক্লিভেজ, বাফার এক্সচেঞ্জ, ক্রোমাটোগ্রাফিক পরিশোধন, বৃষ্টিপাত, পুনর্জন্ম, এনজাইমেটিক ক্লিভেজ এবং ফর্মুলেশন।

ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা রিকম্বিন্যান্ট ইনসুলিন উৎপাদন এবং পরিশোধনে ব্যাপক অভিজ্ঞতা অর্জন করেছে, বিশেষজ্ঞদের একটি দল সহ, যা নিশ্চিত করে যে আপনার ইনসুলিন উৎপাদন উচ্চ দক্ষতার সাথে সম্পন্ন হয়েছে। শত শত প্রকল্প থেকে আমাদের অভিজ্ঞতা কাজে লাগিয়ে, ইয়াওহাই রিকম্বিন্যান্ট হিউম্যান ইনসুলিনের জন্য ডাউনস্ট্রিম পরিশোধন প্রক্রিয়াটি কীভাবে অপ্টিমাইজ করা যায় তা সারসংক্ষেপে বর্ণনা করেছেন।

অন্তর্ভুক্তি দেহ পুনরুদ্ধার এবং ধোয়া:

কোষগুলিকে যান্ত্রিক পদ্ধতি (যেমন আল্ট্রাসনোকেশন, উচ্চ-চাপ সমজাতকরণ) বা লাইসোজাইম চিকিত্সা ব্যবহার করে ব্যাহত করা হয়, তারপরে ধোয়ার বাফার (ইউরিয়া, ট্রাইটন এক্স-১০০, ইত্যাদি ধারণকারী) ব্যবহার করে অমেধ্য অপসারণ করা হয়। ধোয়ার সময়, খরচ নিয়ন্ত্রণের সাথে সাথে প্রোটিনের গুণমান নিশ্চিত করার জন্য পরামিতিগুলি অপ্টিমাইজ করা প্রয়োজন।

অন্তর্ভুক্তি শরীরের দ্রাব্যীকরণ এবং জারণ:

উচ্চ-ঘনত্বের ডিনাচুরেন্ট (যেমন গুয়ানিডিন হাইড্রোক্লোরাইড এবং ইউরিয়া) অন্তর্ভুক্তি বস্তুগুলিকে দ্রবণীয় করতে ব্যবহৃত হয়, ভুল ডাইসালফাইড বন্ধন গঠন রোধ করার জন্য ডাইথিওথ্রেইটল বা β-মেরক্যাপটোইথানল যোগ করা হয়। pH এবং তাপমাত্রা দ্রবণীয়করণ এবং জারণ বিক্রিয়াকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে।

ক্লিভেজ এবং বাফার এক্সচেঞ্জ:

সায়ানোজেন ব্রোমাইড ক্লিভেজ এন-টার্মিনালের অ্যামিনো অ্যাসিড অপসারণের জন্য ব্যবহৃত হয়, তবে এটি বিষাক্ততা এবং কম নির্দিষ্টতার সমস্যা তৈরি করে। ডায়ালাইসিস, আল্ট্রাফিল্ট্রেশন বা আকার বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফির মাধ্যমে, বাফার এক্সচেঞ্জ পরবর্তী অপারেশনের প্রস্তুতির জন্য ক্ষতিকারক বিকারকগুলি অপসারণ করে।

ক্রোমাটোগ্রাফিক পরিশোধন এবং বৃষ্টিপাত:

ইনসুলিন বিশুদ্ধ করার জন্য একাধিক ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল ব্যবহার করা হয়, যার মধ্যে রয়েছে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি, আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি, রিভার্সড-ফেজ ক্রোমাটোগ্রাফি, হাইড্রোফোবিক ইন্টারঅ্যাকশন ক্রোমাটোগ্রাফি এবং আকার বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি। অমেধ্য অপসারণ এবং প্রোটিন ঘনীভূত করার জন্য বৃষ্টিপাত পদ্ধতি, যেমন pH বৃষ্টিপাত এবং দস্তা স্ফটিককরণ ব্যবহার করা হয়।

পুনর্নবীকরণ:

দ্রাব্য প্রোটিনকে একটি পুনঃনৈপুণ্য বাফারে মিশ্রিত করা হয় যাতে ডাইসালফাইড বন্ধন এবং প্রোটিন ভাঁজ সঠিকভাবে গঠন করা যায়। প্রোটিন-ভাঁজ তরল ক্রোমাটোগ্রাফি এবং ডায়ালাইসিসও পুনঃনৈপুণ্যের জন্য ব্যবহৃত পদ্ধতি।

এনজাইমেটিক ক্লিভেজ এবং ফর্মুলেশন:

ট্রিপসিন এবং কার্বক্সিপেপ্টিডেস বি সি-পেপটাইডকে বিচ্ছিন্ন করার জন্য ব্যবহৃত হয়, যা সক্রিয় ইনসুলিন হেটেরোডাইমার তৈরি করে। অবশেষে, স্ফটিককরণ এবং লাইওফিলাইজেশন অবশিষ্ট লবণ এবং বাফার অপসারণের জন্য ব্যবহৃত হয়, যা একটি স্থিতিশীল ফর্মুলেশন তৈরি করে। বিভিন্ন ক্লিনিকাল চাহিদা পূরণের জন্য নির্দিষ্ট সংযোজন (যেমন জিঙ্ক এবং প্রোটামিন) যোগ করা হয়।

উপসংহার:

ইনসুলিনের নিম্নগামী প্রক্রিয়াকরণ থেকে ই কোলাই জটিল। ভবিষ্যতের লক্ষ্য হওয়া উচিত চাহিদা মেটাতে এবং খরচ কমাতে দক্ষ, সাশ্রয়ী উৎপাদনের জন্য এই পদক্ষেপগুলি সর্বোত্তম করার উপর।

ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা সক্রিয়ভাবে প্রাতিষ্ঠানিক বা ব্যক্তিগত বৈশ্বিক অংশীদারদের সন্ধান করছে এবং শিল্পে সবচেয়ে প্রতিযোগিতামূলক ক্ষতিপূরণ প্রদান করে। আপনার যদি কোন প্রশ্ন থাকে, আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন নির্দ্বিধায়: [email protected]