تحديد تركيبة الدهون LNP والكمية
أهمية تحليل تكوين الدهون LNP
تعمل الجسيمات النانوية الدهنية (LNPs)، التي تشتمل على الدهون الكاتيونية والكوليسترول والفوسفوليبيد والدهون المترافقة مع PEG، كأنظمة توصيل بارزة لمنتجات أدوية mRNA. يعتمد استقرار وسيولة الطبقة الثنائية للـ LNPs على خصائص ومحتويات الدهون المختلفة المستخدمة في نظام الصياغة. يعد تكوين الدهون مهمًا جدًا لمدى نجاح LNPs في توصيل الأدوية.
توفر Yaohai-BioPharma حلولاً لتحديد وقياس تركيبة الدهون mRNA-LNP باستخدام تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء مع طريقة الكشف عن الهباء الجوي المشحون (HPLC-CAD).
المتطلبات التنظيمية لتكوين الدهون
ووفقا للاعتبارات التنظيمية لمنظمة الصحة العالمية، "ينبغي وصف التركيبة النهائية للقاح، بما في ذلك الدهون، جنبا إلى جنب مع كمية المكونات في كل عرض."
المنهج التحليلي
تحليل الأداء |
طرق |
تكوين الدهون |
HPLC مدمج مع كاشف الهباء الجوي المشحون لكورونا (CAD) |
العملية
الخطوة 1. إعداد عينة الدهون
يعد اختيار المادة المخففة ذا أهمية قصوى لتحليل مكونات الدهون في منتجات الأدوية mRNA-LNP. يجب أن يقوم المخفف بحل كل مكون دهني بشكل فعال وتعطيل أي تفاعلات بين الدهون وmRNA المغلف. تشتمل المواد المخففة المحتملة على الإيثانول، والإيثانول/ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO)، والإيثانول/فورماميد، وإيثانول/أسيتات ثلاثي إيثيل أمين، وغيرها.
الخطوة 2. HPLC-CAD
تم دمج التحليل اللوني السائل للمرحلة العكسية (RP-HPLC) المقترن بكاشف الهباء الجوي المشحون (CAD) في اختبار تكوين الدهون LNP. نظرًا لأن الدهون تفتقر إلى الكروموفورات ولا تمتص الأشعة فوق البنفسجية دون اشتقاقها، فإن التطاير عادة ما يكون أمرًا صعبًا. CAD، كونه أكثر حساسية، يمكنه تمييز نطاق أوسع من محتوى الدهون. في السابق، تمت صياغة تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء (UHPLC) مقترنًا بطريقة كاشف الهباء الجوي المشحون (CAD) وتطبيقه في تحليل الدهون لدراسات LNP الصغيرة المسببة للتداخل.
الخطوة 3. تحليل البيانات
تتضمن كمية كل دهون داخل العينة حسابات مستمدة من المنحنى القياسي مضروبًا في عامل التخفيف. أسفرت هذه العملية عن محتوى الدهون لكل مكون داخل عينة mRNA-LNP.
حالة تحليل تكوين الدهون LNP باستخدام HPLC-CAD
استناداً إلى HPLC-CAD، طورت Yaohai-BioPharma طريقة قوية لتحليل مكونات الدهون في mRNA-LNP. تم التحقق من صحة هذه الطريقة لتكون خطية وقابلة للتكرار ودقيقة ودقيقة ومحددة لتركيبات LNP، والتي يمكن أن تدعم تطوير العملية وتطوير الصياغة واختبار الاستقرار وإطلاق mRNA-LNP.
الملف الكروماتوغرافي لأربعة دهون بواسطة طريقة HPLC-CAD الخاصة بـ Yaohai-BioPharma
الخطية لطريقة HPLC-CAD الخاصة بـ Yaohai-BioPharma (R2＞0.99)
EN
