Контрола квалитета и примена рекомбинантних протеина

Контрола квалитета рекомбинантних протеина је кључна за поузданост и поновљивост експерименталних података. Сваки корак, од дизајна пројекта до производног процеса, захтева строге стратегије контроле квалитета.

Стратегије контроле квалитета

Индустријски сектор се придржава строгих стандардних оперативних процедура, док академска заједница треба да унапреди стручно знање како би побољшала поновљивост података. Протеини са специфичном биолошком применом или биохемијским карактеристикама захтевају прилагођене стратегије контроле квалитета (КЦ).

Изазовни примери и решења

Иаохаи Био-Пхарма се може похвалити великим искуством у производњи и пречишћавању рекомбинантних протеина, заједно са тимом стручњака, осигуравајући да је ваша производња протеина завршена са високом чистоћом. Користећи наше искуство из стотина пројеката, Иаохаи љубазно сумира како оптимизирати пречишћавање протеина.

Протеини који везују нуклеинску киселину: Кораци уклањања нуклеинске киселине, као што су нуклеазе или преципитација ПЕИ, су неопходни. Однос А260нм/А280нм се прати да би се открила контаминација нуклеинском киселином.

Хеави Ферритин Хеави Цхаин 1 за крио-ЕМ: Кораци пречишћавања треба да се оптимизују и да се додају нуклеазе да би се смањио однос А260нм/А280нм и обезбедила чистоћа протеина.

Химерни протеин хумани дсРБЕЦ: Ћелијска лиза користи пуфер који садржи уреу, након чега следи поновно савијање на колони да би се добили функционално активни протеини.

Двовалентни катјони који везују протеине: Специфични двовалентни катјони се морају додати током експресије и пречишћавања, а хелатне агенсе треба избегавати.

Гвожђе-сумпорни протеини: Имидазол треба избегавати да би се спречило нарушавање кластера [2Фе ± 2С], обезбеђујући правилно савијање и функцију протеина.

Растворљиви фрагмент ЛЛТ1: Дизајн мутанта оптимизује формирање дисулфидне везе и савијање протеина, што резултира стабилним протеинима са високим приносом.

Кристализација ЦЛК1 киназе: Ко-експресија са λ-фосфатазом уклања фосфате са места фосфорилације, а хроматографија искључивања величине (СЕЦ) и хроматографија измене ањона се користе за добијање хомогеног ЦЛК1 без хетерогене фосфорилације.

Протеини за употребу антигена: Процена чистоће је неопходна да би се избегла контаминација високо имуногеним протеинима. За структурна епитопска антитела, тродимензионална конформација антигена мора да се одржава.

Протеини склони агрегацији: Стратегије као што су скрининг различитих сојева и снижавање температуре култивације се користе да би се ограничили проблеми агрегације, а осмишљене су стратегије брзог пречишћавања.

Уклањање ендотоксина: Методе као што су хроматографија са позитивним набојем и афинитетна хроматографија поликатион лиганда уклањају ендотоксине, обезбеђујући да су нивои ЛПС испод граница примене.

Протеински комплекси: Подјединице се експримирају одвојено и склапају ин витро или ко-експресују да формирају функционалне комплексе. Интегритет комплекса се оцењује хомогеношћу и моларном масом.

Zakljucak

Производња протеина почиње стратешким дизајном, узимајући у обзир биохемијске особине и примене. Током експресије, пречишћавања и контроле квалитета, услови и методе се оптимизују за стабилност, неагрегацију и природно стање. Пречишћени протеини служе разним низводним употребама, као што је биофизичка карактеризација.

Иаохаи Био-Пхарма такође активно тражи институционалне или појединачне глобалне партнере и нуди најконкурентнију надокнаду у индустрији. Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте: БД@иаохаибио.цн