Kontrola kvaliteta i primene rekombinantnih proteina

Kontrola kvaliteta rekombinantnih proteina je ključna za pouzdanost i reprodukcibilnost eksperimentalnih podataka. Svaki korak, od dizajna projekta do procesa proizvodnje, zahteva stroge strategije kontrole kvaliteta.

Strategije Kontrole Kvaliteta

Industrijski sektor pridržava strogo standardnih operativnih procedura, dok akademska zajednica treba da poboljša profesionalnu znanju kako bi poboljšala reprodukciju podataka. Proteini sa specifičnim biološkim primenama ili biohemijskim karakteristikama zahtevaju prilagođene strategije kontrole kvaliteta (QC).

Izazovne Primeri i Rešenja

Yaohai Bio-Pharma poseduje obiman iskustvo u proizvodnji i čišćenju rekombinantnih proteina, uz tim stručnjaka, osiguravajući da vaša proizvodnja proteina bude izvršena s visokom čistoćom. Koristeći naše iskustvo iz stotina projekata, Yaohai sažeto objašnjava kako optimizirati čišćenje proteina.

Proteini koji se vezuju za nukleinske kiseline: Koraci za uklanjanje nukleinsih kiselina, kao što su nukleaze ili PEI precipitacija, su neophodni. Omjer A260nm/A280nm se praći kako bi se otkrila kontaminacija nukleinsim kiselinama.

Miševa Ferritin Teži Lан 1 za krio-EM: Koraci čišćenja moraju biti optimizirani, a nuklease moraju biti dodate da se smanji omjer A260nm/A280nm i osigura čistoća proteina.

Hibridni Protein Čovekov dsRBEC: Lišavanje stanica koristi bufer koji sadrži ureu, nakon čega se vrši refoldiranje na koloni kako bi se dobili funkcionalno aktivni protein.

Proteini koji se vezuju za divalente katione: Trebaju se dodavati specifični divalenti kationi tijekom izražavanja i čišćenja, a helaatori treba izbjegavati.

Željezno-Sufidni Protein: Imidazol treba izbjegavati kako bi se spriječilo poremećanje [2Fe ± 2S] klastera, osiguravajući pravilno foldiranje i funkciju proteina.

Rastvoriti fragment LLT1: Mutant dizajn optimizuje formiranje disulfidnih veza i foldanje proteina, što rezultira stabilnim i visokoproduktivnim proteinima.

Krištalizacija CLK1 kinaze: Ko-ekspresija sa λ-fosfatazom uklanja fosfat grupe sa sitovnih mesta, a veličinska izlučiva hromatografija (SEC) i anionska zamjenska hromatografija koriste se za dobijanje homogenog CLK1-a bez heterogenog fosforiliranja.

Proteini za korišćenje kao antigeni: Ocena čistoće je neophodna da bi se izbegla kontaminacija sa vrlo imunogenim proteinima. Za strukturne epitope antitela, treba održati trodimenzionalnu konformaciju antigena.

Proteini podložni agregaciji: Strategije poput testiranja različitih štedova i smanjenja temperature uzgoja koriste se za ograničavanje problema agregacije, a prave se brze strategije čišćenja.

Uklanjanje endotoksa: Metode poput pozitivno-nabijene hromatografije i afinitetne hromatografije polikationskim ligandom uklanjaju endotoksine, osiguravajući da su nivoi LPS ispod granica primene.

Kompleksi proteina: Podjedinice se izražavaju posebno i montiraju in vitro ili su zajedno izražene da bi formirale funkcionalne komplekse. Integritet kompleksa procenjuje se na osnovu homogenosti i molare mase.

Закључак

Proizvodnja proteina počinje strategijskim dizajnom, uzimajući u obzir biohemikalna svojstva i primene. Tijekom izražavanja, čišćenja i kontrolisanja kvaliteta, uslovi i metode optimiziraju se za stabilnost, neprikupljanje i prirodno stanje. Čišćeni proteini služe raznim daljnjim upotrebama, kao što je biološka karakterizacija.

Yaohai Bio-Pharma takođe aktivan je u pretrazi globalnih partnera, institucija ili pojedinki, i nudi najkonkurentsiju naknadu u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]