Цхампионинг Репортер РНК методе модификације

Када се бира који метод модификације репортерске мРНК је пожељнији, не постоји дефинитиван одговор јер сваки метод и репортерски ген имају своје предности и применљиве сценарије. Ево неких уобичајених метода модификације мРНА и репортерских гена, заједно са њиховим карактеристикама и прикладношћу.

Методе модификације мРНА

метилација:

1. м6А: Повезано са стабилношћу мРНА, спајањем, транслацијом и обрадом миРНА. Изазови детекције укључују избор и локализацију антитела.
2. 5' Цап Нм: Побољшава стабилност, спајање, полиаденилацију и нуклеарни извоз. Помаже у разликовању сопствене РНК од стране РНК.
3. Псеудоуридилација: Мења кодоне, побољшава стабилност и реагује на стрес. Катализују псеудоуридин синтазе.

Увођење неприродних нуклеотида:

1. Уведено током транскрипције са двоструком стратегијом хемијске модификације. Побољшава стабилност, ефикасност и експресију протеина.

Репортер Генес

1. Зелени флуоресцентни протеински ген (ГФП): Предности: Лако се детектује, стабилна флуоресцентна својства, нетоксична за ћелије, погодна за снимање ћелија уживо. Недостаци: Ограничен интензитет флуоресценције.
2. Побољшани зелени флуоресцентни протеин (еГФП): Предности: Преко 6 пута светлији од ГФП дивљег типа, што га чини погоднијим као репортерски ген за проучавање експресије гена, регулације, диференцијације ћелија и локализације и транспорта протеина унутар организама.
3. Црвени флуоресцентни протеини (нпр. мЦхерри): Предности: Дуже таласне дужине ексцитације и емисије, што резултира нижом позадином током интрацелуларног снимања, одличном осветљеношћу флуоресценције и фотостабилношћу, и нижом ћелијском токсичношћу. Недостаци: Можда се не користи тако често као ГФП у одређеним експерименталним условима.
4. Фирефли Луциферасе: Предности: У присуству АТП-а, јона магнезијума и кисеоника, може катализовати оксидацију луциферина у оксилуциферин, емитујући биолуминисценцију. Погодан је за употребу као контрола за проучавање ефикасности транслације циљних гена у ћелијама сисара, виталности ћелија и ин виво тестова снимања.

Zakljucak

Када бирате који метод модификације репортерске мРНК је пожељнији, то зависи од специфичних експерименталних циљева, позадине истраживања и експерименталних услова. На пример, ако је потребна висока осетљивост, еГФП може бити бољи избор. Ако је потребно снимање на дужим таласним дужинама да би се смањиле позадинске сметње, црвени флуоресцентни протеини као што је мЦхерри могу бити прикладнији. Додатно, на основу специфичних потреба за модификацијом мРНК (нпр. побољшање стабилности, побољшање ефикасности транслације), може се изабрати одговарајући метод модификације.

Као први и највећи микробиолошки биолошки ЦРДМО у Великој Кини, Иаохаи Био-Пхарма нуди свеобухватна решења прилагођена на једном месту или самосталне услуге у распону од синтезе РНК, инжењеринга сојева и конструкције, развоја процеса узводно и низводно, до ГМП или не. - Производња лековитих супстанци на нивоу ГМП, услуге пуњења и завршетка за различите модалитете, као што су мРНА, цирцРНА, плазмид РНК, рекомбинантна протеини, пептиди, ензими, једнодоменска антитела и ВЛП за хуману и ветеринарску употребу.

Иаохаи Био-Пхарма такође активно тражи институционалне или појединачне глобалне партнере и нуди најконкурентнију надокнаду у индустрији. Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте: ЦРО@иаохаибио.цн