Podrška Metodama Modifikacije Reporter RNA

Kada biramo koji način modifikacije reporter mRNA je preferabilan, nema odlučujuće odgovora, jer svaki metod i reporter gen ima svoje prednosti i primenljive scenarije. Evo nekih uobičajenih metoda modifikacije mRNA i reporter gena, uz njihove karakteristike i prilagodljivost.

metodi modifikacije mRNA

Metilacija:

1. m6A : Povezana sa stabilnošću mRNA, splicingom, prevodom i obradom miRNA. Izazovi pri detekciji uključuju izbor antitela i lokalizaciju.
2. 5' Kap Nm : Pojačava stabilnost, splicing, poliadenilaciju i jezgrenski eksport. Pomaga da razlikuje sam-RNA od stranog RNA.
3. Pseudouridilacija : Menja kodone, pojačava stabilnost i reaguje na stres. Katalizovana pseudouridil sintazama.

Uvođenje ne-prirodnih nukleotida:

1. Uveđeno tijekom transkripcije sa dvostrukom hemijskom modifikacijskom strategijom. Poboljšava stabilnost, učinkovitost i izraz proteina.

Reporter Geni

1. Gen Zelenog Florescentnog Proteina (GFP) : Prednosti: Lako otkrivo, stabilna fluorescencija, neštetan za ćelije, pogodan za slikanje živih ćelija. Mane: Ograničena intenzitet fluorescenca.
2. Poboljšani Zeleni Florescentni Protein (eGFP) : Prednosti: Preko šest puta jača od divljeg tipa GFP-a, što ga čini još više prikladnim kao reporter gen za proučavanje izraza gene, regulacije, diferenciranja ćelija i lokalizacije i transporta proteina unutar organizama.
3. Crveni Florescentni Protein (npr., mCherry) : Prednosti: Duži talasi pobude i emisije, što rezultira nižim pozadinskim šumom tijekom intracelularnog slikanja, odlična jasnoća fluorescenca i fotostabilnost, te niža toksičnost za ćelije. Mane: Može se manje koristiti od GFP-a u određenim eksperimentalnim uvjetima.
4. Luciferaza svetlokriva : Prednosti: U prisutnosti ATP-a, magnezijum ionskih i kiseonika, može katalizirati oksidaciju luciferina u oksiluciferin, emitujući bioluminsenciju. Odgovara za upotrebu kao kontrola za proučavanje efikasnosti translacije ciljanih gena u mašovitim ćelijama, života ćelija i in vivo slikarskih asesmana.

Закључак

Kada je potrebno odabrati koji način modifikacije izveštaja mRNA je preferabilan, zavisi od specifičnih eksperimentalnih ciljeva, istraživačkih pozadina i eksperimentalnih uslova. Na primer, ako je potrebna visoka osetljivost, eGFP može biti bolji izbor. Ako je potrebno slikanje dužim talasnim dužinama kako bi se smanjila pozadinska interferencija, crvene fluorescentske proteine poput mCherry mogu biti prikladniji. Dodatno, na osnovu specifičnih potreba za modifikacijom mRNA (npr., poboljšanje stabilnosti, povećanje efikasnosti translacije), može se izabrati odgovarajući način modifikacije.

Kao prvi i najveći CRDMO mikrobioloških bioproizvoda u Velikoj Kini, Yaohai Bio-Pharma nudi kompletna prilagođena rešenja ili pojedinačne usluge, od RNA sinteze, inženjerstva i konstrukcije štedova, razvoja gornje i donje struje procesa, do proizvodnje farmaceutske tvari na GMP ili ne-GMP nivou, kao i usluge ispunjavanja za različite modele, kao što su mRNA, circRNA, plazmidni RNA, rekombinantni proteini, peptidi, enzimi, jednodomenski antitela i VLP-ovi za ljudsku i veterinarsku upotrebu.

Yaohai Bio-Pharma takođe aktivan je u pretrazi globalnih partnera, institucija ili pojedinki, i nudi najkonkurentsiju naknadu u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]