כל הקטגוריות
ENEN
שלמות mRNA

שלמות mRNA

עמוד הבית >  שלמות mRNA

שלמות mRNA

המשמעות של ניתוח שלמות mRNA

mRNAs מזוהים על חוסר היציבות המובנית שלהם והם רגישים לפרגמנטציה בנוכחות גורמים חיצוניים, במיוחד במהלך תהליכי שעתוק במבחנה (IVT) וטיהור, שבהם נוקלאזות בכל מקום מהווים אתגר. הערכת שלמות ה-mRNA חיונית בפיתוח העוקב של תרופות מבוססות mRNA, מה שמבטיח הן בטיחות והן זמינות המוצר.

Yaohai-BioPharma מספקת שירותי בדיקת תקינות mRNA מקיפים, תוך שימוש בשיטות כגון אלקטרופורזה של ג'ל agarose (AGE), אלקטרופורזה נימית (CEG) וכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC), תוך הקפדה על תקני איכות מחמירים הן למחקר והן לניסויים קליניים.

דרישות רגולטוריות לשלמות mRNA

על פי השיקולים הרגולטוריים של WHO, "שלמות המבנה של ה-mRNA נחשבת לתכונת איכות קריטית לשחרור ה-mRNA. לפיכך, יש צורך בשליטה על שלמות ה-mRNA, אחוז ה-mRNA השלם, אחוז שברי ה-mRNA וכן הלאה."

שיטה אנליטית

אָנָלִיזָה

שיטות

שלמות mRNA

AGE, Agarosegאלקטרופורזה

CGE,אלקטרופורזה נימית

CGE-LIF, אלקטרופורזה של ג'ל נימי עם זיהוי הקרינה המושרה על ידי אור

שלמות mRNA על ידי אגרוס ג'ל אלקטרופורזה

אלקטרופורזה של ג'ל אגרוז היא טכניקה בשימוש נרחב להערכת שלמות ה-RNA הכולל. זה כולל הפעלת דגימת ה-RNA על ג'ל אגרוז דנטורציה, מוכתם באתידיום ברומיד או SYBR גרין. הג'ל הדנטורטי, המורכב מאגרוז, מקל על ההפרדה של RNA על בסיס גודל כאשר מופעל זרם חשמלי. כאשר ה-RNA הטעון השלילי נודד לעבר הקצה החיובי של הג'ל, שברים קטנים יותר נעים מהר יותר, וכתוצאה מכך מיון מבוסס גודל של מולקולות RNA.

שלמות mRNA על ידי אלקטרופורזה של ג'ל נימי

אלקטרופורזה של ג'ל נימי (CGE) עומדת בתור גישה אנליטית ברזולוציה גבוהה שחשובה למדידת שלמות מולקולות RNA לפי אורך. להערכה זו יש משמעות לאבטחת איכות, הבנת העוצמה ואופטימיזציה של תהליכי ייצור. בדומה לאלקטרופורזה של ג'ל אגרוז, CGE משתמש בזרם חשמלי להפרדת שברי RNA בהתבסס על המטען והגודל שלהם. ב-CGE, נימים ממלאים במטריצת ג'ל הפרדה החדורה בצבע ניאון. תנועת ה-RNA לאורך הנימים מותנית בגודלו, והגילוי מושג באמצעות גלאי קרינה אולטרה סגול (UV) או אור (LIF).

קבל הצעת מחיר חינם

נהיה בקשר