Παραγωγή μονοκλωνικών αντισώματων σε E. coli: Προόδοι και Προοπτικές

Τα μονοκλωνικά αντισώματα (mAbs), τα οποία είναι διάλυσης γλυκοπρωτεΐνες περίπου 150 kDa που αποτελούνται από βαριές και ελαφρές συμβολές, χρησιμοποιούνται ευρέως στη θεραπεία των καρκινών και των αυτοανοσιώδων νόσων. Στα τελευταία χρόνια, οι μέθοδοι παραγωγής των mAbs και των παραγώγων τους έχουν γίνει διαφορετικές, με το Escherichia coli ( E. coli ) να εμφανιζόταν ως σημαντικός φιλοξενητής για την παραγωγή κομμάτιων αντισώματος.

Στην παραγωγή mAbs, το Yaohai Bio-Pharma ανέβαλλε με πλούσια εμπειρία R&D. Με μια ώριμη πλατφόρμα, προηγμένο εξοπλισμό και καινοτόμο τεχνολογία πλήρους οικολογικής έκφρασης, το Yaohai προσφέρει υπηρεσίες από την κατασκευή τραπεζικού κυττάρου μέχρι την τελική εμπλήρωση, πλήρως προσαρμόζοντας τα mAbs για τους πελάτες.

Μέθοδοι παραγωγής mAbs στο E. coli

Το E. coli προσφέρει γρήγορη αύξηση, χαμηλούς κόστους, εύκολη χρήση και ευελιξία στην έκφραση μέσα στο κυτοπλάσμα, το περιπλάσμα ή το μέσο κουλτύρας. Στο E. coli, η παραγωγή αντισώματων κατηγοριοποιείται κυρίως σε περιπλασματική, κυτοπλασματική και ημι-οξειδωμένη κυτοπλασματική παραγωγή, καθώς και σε ανυπολήπτως πρωτεϊνικά συστήματα (CFPS). Η περιπλασματική παραγωγή έχει επιτύχει υψηλά βαθμούς παραγωγής λειτουργικού πλήρους μήκους immunoglobulin G (FL-IgG) μέσω βελτιωμένων μεθόδων έκφρασης και ισορροπίας απόδοσης. Η κυτοπλασματική παραγωγή αντιμετωπίζει προκλήσεις λόγω του μειωτικού περιβάλλοντος, αλλά το λειτουργικό FL-IgG έχει εκφραστεί με επιτυχία με τη μεταγενετική μεταβολή φυλών για να δημιουργηθεί ένα οξειδωτικό περιβάλλον. Το σύστημα CFPS έχει επιτύχει αποτελεσματική παραγωγή αντισώματων με την προσαρμογή των περιοχών εκκίνησης μετάφρασης και την προσθήκη πρωτεϊνών επιστάτη.

Χαρακτηρισμός και Ελεγχος Ποιότητας Αντισώματων

Η έλεγχος ποιότητας αντισώματος περιλαμβάνει χημειωδείς, βιοφυσικές και βιολογικές χαρακτηριστικές. Η χημειωδής χαρακτηριστική αναλύει τη δομή, την ακολουθία και τη γλυκοσύληση των αντισωμάτων, μεταξύ άλλων. Η βιοφυσική χαρακτηριστική επισκοπεύει την ομοιογένεια, τη λύσιμη και τη σταθερότητα. Η βιολογική χαρακτηριστική επιβεβαιώνει τη βιοδραστηριότητα των αντισωμάτων, συμπεριλαμβανομένων των ADCC και CDC, μεταξύ άλλων. Αν και τα άγλυκοσυλημένα αντισώματα που παράγονται στο E. coli έχουν έλλειψη σε ορισμένες λειτουργίες Fc effector, μελετές έχουν δείξει ότι η σταθερότητά τους είναι παρόμοια με εκείνη των γλυκοσυλημένων αντισωμάτων και εμφανίζουν παρόμοια θεραπευτική αποτελεσματικότητα υπό τις δοκιμαστικές συνθήκες.

Για να επαναφερθούν ή ενισχυθούν οι ανοσολογικές επιπτώσεις των άγλυκοσυλημένων αντισωμάτων, μπορούν να μηχανικευτούν οι περιοχές Fc. Για παράδειγμα, μπορούν να φιλτραρεθούν μútants που συνδέονται με το FcɣRI για να ενισχυθεί η λειτουργία του ADCC effector. Αυτά τα μηχανικευμένα αντισώματα δείχνουν σημαντικά βιολογικά αποτελέσματα και θεραπευτικό δυναμικό και in vitro και in vivo.

Συμπέρασμα

Συνοπτικά, η παραγωγή απογλευκωμένων αντισώματων σε E. coli έχει κάνει σημαντική πρόοδο στον τομέα της παραγωγής αντισώματων, μείωντας τους κόστους και βελτιώνοντας την ποιότητα. Αν και έλλειψαν ορισμένες λειτουργίες Fc effector, μέσω μηχανικής σχεδιασμού, εμφανίζουν αυξημένες λειτουργίες effector και θεραπευτικό δυναμικό. Υπολογίζεται ότι περισσότερα απογλευκωμένα αντισώματα που παράγονται σε E. coli θα εισέλθουν σε κλινικές μελέτες στο μέλλον.

Είμαστε επίσης ενεργά σε αναζήτηση ιδρυματικών ή μεμονωμένων παγκόσμιων εταίρων. Προσφέρουμε την καλύτερη ανταγωνιστική αποδοχή στον τομέα. Εάν έχετε οποιαδήποτε ερώτηση, μην διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μας στο [email protected]