Παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων στο E. coli: Advances and Prospects

Τα μονοκλωνικά αντισώματα (mAbs), τα οποία είναι διαλυτές γλυκοπρωτεΐνες περίπου 150 kDa που αποτελούνται από βαριές και ελαφριές αλυσίδες, χρησιμοποιούνται ευρέως στη θεραπεία καρκίνων και αυτοάνοσων ασθενειών. Τα τελευταία χρόνια, οι μέθοδοι παραγωγής των mAbs και των παραγώγων τους έχουν γίνει ποικίλες, με Escherichia coli (Ε. coli) που αναδύεται ως σημαντικός ξενιστής για την παραγωγή θραυσμάτων αντισωμάτων.

Στην παραγωγή mAbs, η Yaohai Bio-Pharma διαπρέπει με την πλούσια εμπειρία Ε&Α. Με μια ώριμη πλατφόρμα, προηγμένο εξοπλισμό και καινοτόμο τεχνολογία πλήρους οικολογικής έκφρασης, η Yaohai προσφέρει υπηρεσίες ενιαίας στάσης από την κατασκευή τράπεζας κυψελών έως το γέμισμα και το φινίρισμα, πλήρως εξατομικευμένα mAb για πελάτες.

Μέθοδοι Παραγωγής mAbs σε Ε. coli

Το E. coli προσφέρει ταχεία ανάπτυξη, χαμηλό κόστος, ευκολία στη λειτουργία και ευελιξία στην έκφραση εντός του κυτταροπλάσματος, του περιπλάσματος ή του μέσου καλλιέργειας. Στο E. coli, η παραγωγή αντισωμάτων κατηγοριοποιείται κυρίως σε περιπλασμική, κυτταροπλασματική και ημι-οξειδωμένη κυτταροπλασματική παραγωγή, καθώς και σε συστήματα πρωτεϊνοσύνθεσης χωρίς κύτταρα (CFPS). Η περιπλασματική παραγωγή έχει επιτύχει υψηλές αποδόσεις λειτουργικής ανοσοσφαιρίνης G πλήρους μήκους (FL-IgG) μέσω βελτιστοποιημένης έκφρασης και ισορροπίας έκκρισης. Η κυτταροπλασματική παραγωγή αντιμετωπίζει προκλήσεις λόγω του αναγωγικού περιβάλλοντος, αλλά η λειτουργική FL-IgG έχει εκφραστεί επιτυχώς από στελέχη μηχανικής για τη δημιουργία ενός οξειδωτικού περιβάλλοντος. Το σύστημα CFPS έχει επιτύχει αποτελεσματική παραγωγή αντισωμάτων ρυθμίζοντας τις περιοχές έναρξης μετάφρασης και προσθέτοντας πρωτεΐνες συνοδηγού.

Χαρακτηρισμός αντισωμάτων και ποιοτικός έλεγχος

Ο ποιοτικός έλεγχος των αντισωμάτων περιλαμβάνει βιοχημικούς, βιοφυσικούς και βιολογικούς χαρακτηρισμούς. Ο βιοχημικός χαρακτηρισμός αναλύει τη δομή, την αλληλουχία και τη γλυκοζυλίωση των αντισωμάτων, μεταξύ άλλων. Ο βιοφυσικός χαρακτηρισμός αξιολογεί την ομοιογένεια, τη διαλυτότητα και τη σταθερότητα. Ο βιολογικός χαρακτηρισμός επικυρώνει τη βιοδραστικότητα των αντισωμάτων, συμπεριλαμβανομένων των ADCC και CDC, μεταξύ άλλων. Αν και τα απογλυκοσυλιωμένα αντισώματα που παράγονται στο E. coli στερούνται ορισμένων λειτουργιών τελεστή Fc, μελέτες έχουν δείξει ότι η σταθερότητά τους είναι παρόμοια με αυτή των γλυκοσυλιωμένων αντισωμάτων και παρουσιάζουν παρόμοια θεραπευτική αποτελεσματικότητα υπό δοκιμασμένες συνθήκες.

Για την αποκατάσταση ή την ενίσχυση των ανοσολογικών επιδράσεων των απογλυκοζυλιωμένων αντισωμάτων, οι περιοχές Fc μπορούν να κατασκευαστούν. Για παράδειγμα, τα μεταλλάγματα που συνδέονται με το FcɣRI μπορούν να υποβληθούν σε διαλογή για την ενίσχυση της λειτουργίας τελεστή ADCC. Αυτά τα κατασκευασμένα αντισώματα επιδεικνύουν σημαντικά βιολογικά αποτελέσματα και θεραπευτικές δυνατότητες τόσο in vitro όσο και in vivo.

Συμπέρασμα

Συνοπτικά, η παραγωγή απογλυκοζυλιωμένων αντισωμάτων στο E. coli έχει σημειώσει σημαντική πρόοδο στον τομέα της παραγωγής αντισωμάτων, μειώνοντας το κόστος και βελτιώνοντας την ποιότητα. Αν και δεν έχουν ορισμένες λειτουργίες τελεστή Fc, μέσω του μηχανικού σχεδιασμού, παρουσιάζουν βελτιωμένες λειτουργίες τελεστή και θεραπευτικές δυνατότητες. Αναμένεται ότι περισσότερα απογλυκοζυλιωμένα αντισώματα που παράγονται στο E. coli θα εισέλθουν σε κλινικές μελέτες στο μέλλον.

Αναζητούμε επίσης ενεργά θεσμικούς ή μεμονωμένους παγκόσμιους εταίρους. Προσφέρουμε την πιο ανταγωνιστική αποζημίωση στον κλάδο. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις, μη διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μας στο [email protected]