το mRNA συντίθεται με in vitro μεταφορά (IVT) από ένα γραμμικοποιημένο πλάσμιδο DNA (pDNA). Δημιουργούνται επίσης κάποια παράγωγα κατά τη διαδικασία IVT, συμπεριλαμβανομένης της διγραμμικής RNA (dsRNA), η οποία έχει αναγνωριστεί ως κύριοι καταστιβιστές της φυσικής ανοσοποιητικής διαδρομής. Είναι κρίσιμο να αφαιρεθούν οι μιασματικές ουσίες και να επιτευχθούν υψηλοί όγκοι καθαρού mRNA για έρευνα mRNA εξωτερικής/έμβιας και θεραπευτικές εφαρμογές.
Το Yaohai Bio-Pharma έχει αναπτύξει μια σειρά τεχνολογιών σύνθεσης mRNA για να παρέχει ακριβώς καθαρό mRNA , όπως σχεδιασμός και βελτίωση ακολουθίας, IVT, καθαρισμό, λυοφιλικοποίηση και περιεγχώριση σε λιπιδικά νανοσωματίδια (LNP). Όλα τα προϊόντα απελευθερώνονται με τις αυστηρές πρότυπες ελέγχου ποιότητας. Η προσυγκεντρωτική χρωματογραφία (AC), με βάση τη δυνατή και επιλεκτική αλληλεπίδραση μεταξύ του 3′ polyA tail του mRNA με το σταθερό φάσμα oligo dT, είναι μια αποτελεσματική και μεγεθύνσιμη στρατηγική καθαρισμού για mRNA.
Αποτελέσματα
| Προϊόν |
Παραγωγή Ακριβώς Καθαρού mRNA
|
| Μήκος |
100~10.000 νουκλεοτίδες |
| Περιεχόμενο RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Καθαρότητα |
A260/A280 |
| Εξαγωγή και Καθαρότητα |
Ηλεκτροφόρηση σε Αγαρωσή (AGE)
Ηλεκτροφόρηση σε Καπιλλάριο (CE)
|
| Ρυθμιστής |
Νερό RNase free (υγρό) |
| Μεταφορές |
Μεταφορά με ξηρό πάγο ή σε κλιματικές συνθήκες |
| Αποθήκευση |
● Υγρό, σε ή κάτω από -20°C
● Λυοφιλισμένο φωτιάρι, στους 4°C
|
| Εφαρμογή |
Ανάπτυξη διατύπωσης LNP,
Δοκιμές με βάση κύτταρα, Εκπειρία σε ζώα
|
Άλλες Προσαρμοσμένες Επιλογές
| κάπ 5' |
● Χωρίς κάπ
● Κάπ0, συν-κάπ
● Κάπ1, συν-κάπ
● Κάπ1, ένζυματος καπάρισμος
|
| 5’ UTR/3’ UTR |
● Φυσική ακολουθία UTR
● Αλλοιωμένη/Μηχανικά σχεδιασμένη ακολουθία UTR
|
| 3' PolyA Δευτερόλογο |
● 100A ~120A Ουρά (συστεματικά)
● Διαμερισμένη ουρά polyA
● Άλλη προσαρμογή
|
| Τροποποιημένα νουκλεοσίδια |
● Ανεπεξεργασμένα βάσεις,
● Ψευδούριδο (Ψ),
● N1-Μεθυλψευδούριδο (N1Ψ),
● 5-μεθυλκυτοσίνη (m5C),
● 5-μεθυλουριδίνη (m5U),
● 5-μεθοξυουριδίνη (5moU),
● 2-θιοουριδίνη (s2U),
● 2′-O-methyl-U
● Άλλοι
|
Μελέτη περιπτώσεων
Ανέπτυξαμε διαδικασία καθάρισης με πολλαπλή χρωματογραφία και ετοιμάσαμε mRNA με υψηλό βαθμό καθαρότητας και ακεραιότητας (>95%).
Σχ. Ανάλυση mRNA με υψηλή καθαρότητα (＞98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
