উচ্চ-মানের প্লাজমিড নিষ্কাশনের গোপনীয়তা আনলক করা

প্লাজমিড নিষ্কাশন গবেষকদের জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। জিন ভেক্টর হিসাবে, প্লাজমিডগুলি ভ্যাকসিন গবেষণা এবং জিন থেরাপিতে গুরুত্বপূর্ণ, যেখানে গুণমান গুরুত্বপূর্ণ। মূল মানের কারণগুলির মধ্যে রয়েছে সুপারকোয়েলড অনুপাত এবং এন্ডোটক্সিন সামগ্রী। নিয়মাবলী পরিবর্তিত হয়: FDA ≥80%, SMPA ≥85%, NMPA ≥90%, <5% রৈখিক/খোলা-বৃত্তাকার DNA সহ। ক্লায়েন্ট প্রায়ই ≥95% সুপারকোয়েল পছন্দ করে। এন্ডোটক্সিনের মাত্রা হল: গবেষণা (>50 EU/µg), ট্রান্সফেকশন (<50 EU/µg), এবং এন্ডোটক্সিন-মুক্ত (<0.1 EU/µg)।

সুপারকোয়েলড প্লাজমিড ডিএনএ

Escherichia coli থেকে প্লাজমিডের মধ্যে রয়েছে সুপারকোয়েলড (SC), ওপেন সার্কুলার (OC), এবং লিনিয়ার (L) DNA। উচ্চ SC অনুপাত ট্রান্সফেকশন দক্ষতা এবং অভিব্যক্তি বাড়ায়। উদাহরণস্বরূপ, একটি 85.45% SC প্লাজমিডের স্থানান্তর 2.5x বেশি, এবং একটি 93.28% SC প্লাজমিডের HGF অভিব্যক্তি 1.8x বেশি, যা SC DNA-এর শ্রেষ্ঠত্ব নিশ্চিত করে।

খোলা-বৃত্তাকার ডিএনএ: যখন ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ-এর একটি স্ট্র্যান্ড ভেঙে যায়, তখন সুপারকোয়েল করা কাঠামোটি আলগা হয়ে যায়, একটি বৃহত্তর আয়তনের সঙ্গে একটি খোলা-বৃত্তাকার প্লাজমিড তৈরি করে যা ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় সবচেয়ে ধীর গতিতে স্থানান্তরিত হয় এবং শীর্ষে অবস্থান করে।

রৈখিক ডিএনএ: প্লাজমিড ডিএনএ-র উভয় স্ট্র্যান্ড ভেঙে গেলে, একটি রৈখিক কাঠামো তৈরি হয়, তুলনামূলকভাবে ছোট আয়তনের যা খোলা-বৃত্তাকার ডিএনএ থেকে দ্রুত স্থানান্তরিত হয় কিন্তু সুপারকোয়েলড ডিএনএ থেকে ধীর, দ্বিতীয় অবস্থানে থাকে।

সুপারকোয়েলড ডিএনএ: দুটি হেলিক্স পরস্পর সংযুক্ত, ডিএনএ হেলিক্সের উপর ভিত্তি করে একটি সুপারকোয়েলড কাঠামোতে মোচড় দেয়। এটির আয়তন সবচেয়ে ছোট এবং ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় সবচেয়ে দ্রুত স্থানান্তরিত হয়, নীচের দিকে অবস্থান করে।

সুপারকোয়েলড অনুপাতের পরিমাণগত বিশ্লেষণ

ল্যাবগুলি ইলেক্ট্রোফোরেসিস চিত্রগুলির মাধ্যমে সুপারকোয়েলড অনুপাত বিচার করতে অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (AGE) এবং জেল-প্রো বিশ্লেষক ব্যবহার করে। একটি চিত্র 97.539% SC DNA দেখায়, অন্যটি 63.833% SC এবং 36.167% OC DNA (লিনিয়ার ডিএনএ দৃশ্যমান নয়) দেখায়।

প্লাজমিডে এন্ডোটক্সিনের রহস্য

এন্ডোটক্সিন হল গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়ার কোষ প্রাচীরের বাইরের স্তরের একটি উপাদান, যা ব্যাকটেরিয়ার মৃত্যু বা লাইসিসের পরে মুক্তি পায়, এতে বিষাক্ত লিপোপলিস্যাকারাইড এ থাকে। প্লাজমিড নিষ্কাশনের সময়, এন্ডোটক্সিন লাইসিস দ্রবণে প্রবেশ করে, যা ট্রান্সফেকশনের কার্যকারিতাকে প্রভাবিত করে এবং অনির্দিষ্ট প্রতিরোধ ক্ষমতাকে ট্রিগার করে। পরীক্ষায় মিথ্যা পজিটিভের জন্য।

এন্ডোটক্সিনের পরিমাণগত এবং গুণগত বিশ্লেষণ

লিমুলাস অ্যামিবোসাইট লাইসেট (এলএএল) পরীক্ষা লিপোপলিস্যাকারাইড (এলপিএস) এ 2-কেটো-3-ডিঅক্সিওকটোনিক অ্যাসিড (কেডিও) এর সাথে সমষ্টির মাধ্যমে এন্ডোটক্সিন সনাক্ত করে। এটি গুণগত এবং আধা-পরিমাণগত, নমুনার সাথে মিশ্রিত করার সময় জমাট বা রঙ পরিবর্তনের মাধ্যমে এন্ডোটক্সিনের উপস্থিতি নির্দেশ করে।

ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা এন্ডোটক্সিন-মুক্ত সুপারকোয়েলড প্লাজমিড অফার করে। Yaohai-এ আউটসোর্সিং ট্রান্সফেকশন এবং এক্সপ্রেশন দক্ষতা বাড়ায়। বিতরণ করা প্লাজমিডের ≥95% SC অনুপাত (গড় 85%±10%) এবং এন্ডোটক্সিনের মাত্রা ≤0.1, ≤0.01, বা ≤0.005 EU/μg।

আমরা সক্রিয়ভাবে প্রাতিষ্ঠানিক বা ব্যক্তিগত বৈশ্বিক অংশীদার খুঁজছি। আমরা শিল্পে সবচেয়ে প্রতিযোগিতামূলক ক্ষতিপূরণ অফার করি। আপনার যদি কোন প্রশ্ন থাকে, আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন নির্দ্বিধায়: [email protected]