উচ্চ গুণবত্তার প্ল্যাজমিড নিষ্কাশনের গোপন রহস্য খুলে তোলা

প্লাজমিড নিষ্কাশন গবেষকদের জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। জিন ভেক্টর হিসেবে, প্লাজমিড ভ্যাকসিন গবেষণা এবং জিন চিকিৎসায় মৌলিক ভূমিকা পালন করে, যেখানে গুণগত মান গুরুত্বপূর্ণ। মূল গুণগত উপাদানগুলোতে সুপারকোইলড অনুপাত এবং এনডোটক্সিন ফলাফল অন্তর্ভুক্ত। নিয়মাবলী বিভিন্ন: FDA ≥80%, SMPA ≥85%, NMPA ≥90%, এবং <5% লিনিয়ার/অপেন-সার্কুলার DNA। গ্রাহকরা অনেক সময় ≥95% সুপারকোইলড পছন্দ করেন। এনডোটক্সিন স্তরগুলো হল: গবেষণা (>50 EU/µg), ট্রান্সফেশন (<50 EU/µg), এবং এনডোটক্সিন-ফ্রি (<0.1 EU/µg)।

সুপারকোইলড প্লাজমিড DNA

এশেরিশিয়া কোলাই থেকে প্লাজমিড গুলোতে সুপারকোইলড (SC), অপেন-সার্কুলার (OC), এবং লিনিয়ার (L) DNA অন্তর্ভুক্ত। উচ্চ SC অনুপাত ট্রান্সফেশনের দক্ষতা এবং ব্যঞ্জন বৃদ্ধি করে। উদাহরণস্বরূপ, 85.45% SC প্লাজমিডের ট্রান্সফেশন 2.5x বেশি এবং 93.28% SC প্লাজমিডের HGF ব্যঞ্জন 1.8x বেশি, যা SC DNA-এর উত্তমত্ব নিশ্চিত করে।

ওপেন-সার্কুলার ডিএনএ: যখন ডবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএর একটি স্ট্র্যান্ড ভেঙে যায়, তখন সুপারকয়েলড স্ট্রাকচার আংশিকভাবে খোলা হয় এবং একটি ওপেন-সার্কুলার প্ল্যাজমিড গঠিত হয়, যা বৃহত্তর আয়তনের সাথে ইলেকট্রোফোরেসিসে সবচেয়ে ধীরে চলে এবং উপরে অবস্থান করে।

লিনিয়ার ডিএনএ: যখন প্ল্যাজমিড ডিএনএর দুটি স্ট্র্যান্ডই ভেঙে যায়, তখন একটি লিনিয়ার স্ট্রাকচার গঠিত হয়, যা বেশি ছোট আয়তনের সাথে ওপেন-সার্কুলার ডিএনএর তুলনায় তাড়াতাড়ি চলে কিন্তু সুপারকয়েলড ডিএনএর তুলনায় ধীরে চলে এবং দ্বিতীয় অবস্থানে থাকে।

সুপারকয়েলড ডিএনএ: দুটি হেলিক্স পরস্পরকে ঘিরে ধরে এবং ডিএনএ হেলিক্সের উপর ভিত্তি করে সুপারকয়েলড স্ট্রাকচার গঠন করে। এটি সবচেয়ে ছোট আয়তনের এবং ইলেকট্রোফোরেসিসে সবচেয়ে তাড়াতাড়ি চলে এবং নিচে অবস্থান করে।

সুপারকয়েলড অনুপাতের পরিমাণগত বিশ্লেষণ

ল্যাবসমূহ ইলেকট্রোফোরেসিসের ছবি ব্যবহার করে সুপারকয়েলড অনুপাত নির্ধারণ করে এজি-এ (এগারোজ গেল ইলেকট্রোফোরেসিস) এবং গেল-প্রো অ্যানালাইজারের মাধ্যমে। একটি ছবি ৯৭.৫৩৯% এসসি ডিএনএ দেখায়, অন্যটিতে ৬৩.৮৩৩% এসসি এবং ৩৬.১৬৭% ওসি ডিএনএ দেখা যায় (লিনিয়ার ডিএনএ দৃশ্যমান নয়)।

প্ল্যাজমিডে এন্ডোটক্সিনের রহস্য

এন্ডোটক্সিন হল গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়ার সেল ওয়ালের বাইরের লেয়ারের একটি উপাদান, যা ব্যাকটেরিয়ার মৃত্যু বা লাইসিস পরে ছাড়িয়ে আসে, এবং তোক্সিক লিপোপলিস্যাকারাইড A ধারণ করে। প্ল্যাজমিড একস্ট্রাকশনের সময়, এন্ডোটক্সিন লাইসিস সলিউশনে প্রবেশ করে, যা ট্রান্সফেকশনের দক্ষতা প্রভাবিত করে এবং অ-স্পষ্ট ইমিউন প্রতিক্রিয়া সংঘটিত করে, ফলে পরীক্ষায় মিথ্যা ধনাত্মক ফলাফল হতে পারে।

এন্ডোটক্সিনের পরিমাণিক এবং গুণগত বিশ্লেষণ

লিমুলাস এমিবোসাইট লাইসেট (LAL) পরীক্ষা লিপোপলিস্যাকারাইড (LPS)-এর ২-কেটো-৩-ডিওক্সিঅক্টোনিক এসিড (KDO) সঙ্গে এন্ডোটক্সিনের সংযোজন মাধ্যমে এন্ডোটক্সিন চিহ্নিত করে। এটি গুণগত এবং অর্ধ-পরিমাণিক, যা নমুনা মিশ্রণের সাথে ঝটপটে সংঘটিত হয় বা রং পরিবর্তনের মাধ্যমে এন্ডোটক্সিনের উপস্থিতি নির্দেশ করে।

যাওহাই বায়ো-ফার্মা এন্ডোটক্সিন-মুক্ত সুপারকোইল্ড প্ল্যাজমিড প্রদান করে। যাওহাইতে আউটসোর্সিং করা ট্রান্সফেকশন এবং এক্সপ্রেশনের দক্ষতা বাড়ায়। প্রদত্ত প্ল্যাজমিডের ≥৯৫% SC অনুপাত (গড় ৮৫%±১০%) এবং এন্ডোটক্সিনের মাত্রা ≤০.১, ≤০.০১, বা ≤০.০০৫ EU/μg।

আমরা গোটা বিশ্বের প্রতিষ্ঠানিক বা ব্যক্তিগত সহযোগীদেরও খুব উৎসাহিতভাবে খুঁজছি। আমরা শিল্পকায় সবচেয়ে প্রতিদ্বন্দ্বিতামূলক পুরস্কার প্রদান করি। যদি আপনার কোনো প্রশ্ন থাকে, তবে দয়া করে আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন: [email protected]