বড় আকারের জিন সংশ্লেষণের জন্য উদ্ভাবনী সমাবেশ কৌশল

স্ক্র্যাচ থেকে বড় ডিএনএ টুকরা সংশ্লেষণের জন্য সমাবেশ প্রযুক্তি হল জিন সংশ্লেষণের মূল ভিত্তি, যা BioBrick™, TAR, BglBrick, গোল্ডেন গেট, গিবসন সমাবেশ, CPEC এবং ওভারল্যাপ পিসিআর-এর মতো পদ্ধতিগুলিকে অন্তর্ভুক্ত করে। একক ধাপে জিনের দৈর্ঘ্যের ডিএনএ সঠিকভাবে সংশ্লেষণে বর্তমান প্রযুক্তির সীমাবদ্ধতার কারণে, অংশে সংশ্লেষিত অলিগোনিউক্লিওটাইড খণ্ডগুলিকে লম্বা ডিএনএ খণ্ডে একত্রিত করতে ভিট্রো এবং ভিভো সমাবেশ কৌশলগুলিকে একত্রিত করা প্রয়োজন।

ভিট্রো সমাবেশ কৌশল

টুল এনজাইম ব্যবহার করার জন্য একটি সাধারণ প্রয়োজনীয়তা সহ খণ্ডের আকার এবং ক্রম বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে এগুলিকে বিভিন্ন পদ্ধতিতে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়। ডিএনএ পলিমারেজ পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে ওভারল্যাপ পিসিআর সহজ এবং দ্রুত কাজ করে। BioBrick এবং BglBrick পদ্ধতি, যা আইসোস্কিজোমারের উপর নির্ভর করে, প্রমিত সমাবেশ সক্ষম করে, যদিও বায়োব্রিক পদ্ধতি ফিউশন প্রোটিনের জন্য অনুপযুক্ত। গোল্ডেন গেট ক্লোনিং পদ্ধতি, টাইপ IIS সীমাবদ্ধতা এনজাইমের উপর ভিত্তি করে, একাধিক খণ্ডের দক্ষ নিরবিচ্ছিন্ন বন্ধনকে অনুমতি দেয়। গিবসন অ্যাসেম্বলি পদ্ধতি, যা একাধিক টুল এনজাইমের সংমিশ্রণ ব্যবহার করে, কয়েকশ কেবি পর্যন্ত টুকরো আকারে সীমাহীন বন্ধন সক্ষম করে। ডিএনএ উপাদানগুলির প্রমিত নকশা বিদ্যমান খণ্ডগুলির ব্যবহারের হার বাড়ায়।

ভিভো সমাবেশ কৌশল

যদিও ভিট্রো একত্রিত টুকরোগুলি কয়েকশ কেবি আকারে পৌঁছাতে পারে, ফলন প্রায়শই অপর্যাপ্ত হয়, জীবের ব্যবহার করে পরিবর্ধনের প্রয়োজন হয় যেমন ইসেরিচিয়া কোলি 20 kb-এর বেশি টুকরো একত্রিত করার ক্ষেত্রে, জীবের মধ্যে রিকম্বিন্যান্ট সিস্টেমগুলি প্রায়শই নিযুক্ত করা হয়, যার মধ্যে রয়েছে ব্যাসিলাস সাবটিলিস, ইস্ট এবং ইঞ্জিনিয়ারড ব্যাকটেরিয়া। ইস্ট, একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত হোস্ট হিসাবে, বহু বছর ধরে এর দক্ষ সমজাতীয় পুনর্মিলন ক্ষমতার জন্য স্বীকৃত। এটি বেশ কয়েকটি মেগাবেস (Mb) পর্যন্ত কৃত্রিম ক্রোমোজোম একত্রিত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। উপরন্তু, Saccharomyces cerevisiae ক্রোমোজোমের দৈর্ঘ্যের জন্য একটি অসাধারণ সহনশীলতা প্রদর্শন করে, যা উচ্চতর জীবের মধ্যে অতি-দীর্ঘ ক্রোমোজোম নির্মাণের জন্য খামির ব্যবহার করার জন্য একটি তাত্ত্বিক ভিত্তি প্রদান করে।

অ্যাপ্লিকেশন

ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা জিন সংশ্লেষণের জন্য প্রাথমিকভাবে দুটি সমাবেশ পদ্ধতি ব্যবহার করে: লিগেজ সমাবেশ এবং ডিএনএ পলিমারেজ সমাবেশ। লিগেস অ্যাসেম্বলি পদ্ধতি ডিএনএ লিগেজ ব্যবহার করে ওভারল্যাপিং এবং হাইব্রিডাইজড 5'-ফসফরিলেটেড অলিগোনিউক্লিওটাইড টুকরাকে ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ-তে সংযুক্ত করে। পলিমারেজ সমাবেশ পদ্ধতিটি হাইব্রিডাইজেশনের মাধ্যমে ওভারল্যাপিং অলিগোনিউক্লিওটাইড খণ্ডগুলিকে প্রসারিত করতে, বিভিন্ন দৈর্ঘ্যের মিশ্রণ প্রাপ্ত করতে এবং অবশেষে প্রাইমার ব্যবহার করে সফলভাবে একত্রিত পূর্ণ-দৈর্ঘ্যের খণ্ডগুলিকে প্রসারিত করতে ডিএনএ পলিমারেজ ব্যবহার করে। Yaohai's ক্লায়েন্টদের জিন সংশ্লেষণের নির্দিষ্ট প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে সাহায্য করতে পারে।

আমরা সক্রিয়ভাবে প্রাতিষ্ঠানিক বা ব্যক্তিগত বৈশ্বিক অংশীদার খুঁজছি। আমরা শিল্পে সবচেয়ে প্রতিযোগিতামূলক ক্ষতিপূরণ অফার করি। আপনার যদি কোন প্রশ্ন থাকে, আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন নির্দ্বিধায়: [email protected]