ফেড-ব্যাচ ফার্মেন্টেশন কৌশলের শক্তি ব্যবহার করা

Pichia pastoris ব্যাপকভাবে বিভিন্ন heterologous প্রোটিন উত্পাদন ব্যবহৃত হয়. হাই-সেল-ডেনসিটি ফার্মেন্টেশন (HCDF) প্রযুক্তি, ফেড-ব্যাচ খাওয়ানোর মাধ্যমে বাস্তবায়িত, সফলভাবে বায়োফার্মাসিউটিক্যালস এবং শিল্প এনজাইমের বড় আকারের উৎপাদন অর্জন করেছে। সুনির্দিষ্টভাবে নিয়ন্ত্রিত মিডিয়াতে, HCDF প্রযুক্তির ব্যবহার উচ্চ-ফলন, উচ্চ-ক্রিয়াকলাপ এবং খরচ-কার্যকর রিকম্বিন্যান্ট প্রোটিন পেতে পারে।

সাম্প্রতিক গবেষণা ইঙ্গিত করে যে এইচসিডিএফ কৌশলগুলির মাধ্যমে, পিচিয়া প্যাস্টোরিসে হেটেরোলগাস প্রোটিনের উত্পাদন এবং কার্যকলাপ বাড়ানোর চেষ্টা করা হচ্ছে। HCDF প্রযুক্তি সংজ্ঞায়িত মিডিয়াতে উচ্চ-স্তরের সেল ক্লাস্টারের অনায়াসে প্রাপ্তির অনুমতি দেয়, যার ফলে HCDF এর মাধ্যমে উন্নত কার্যকলাপ এবং কম খরচ সহ প্রচুর রিকম্বিনেন্ট প্রোটিন অর্জন করতে সক্ষম হয়। যাইহোক, পিচিয়া প্যাস্টোরিসে নির্দিষ্ট প্রোটিনের উচ্চ-স্তরের অভিব্যক্তিকে অপ্টিমাইজ করার জন্য উপযুক্ত এইচসিডিএফ কৌশল নির্বাচন করা একটি চ্যালেঞ্জ রয়ে গেছে।

উচ্চ-কোষ-ঘনত্ব গাঁজন (HCDF)

Pichia pastoris heterologous প্রোটিন উৎপাদনে উৎকৃষ্ট, স্বয়ংক্রিয় বায়োরিয়াক্টরগুলিতে HCDF-এর পক্ষে। এইচসিডিএফের 3টি পর্যায় রয়েছে: গ্লিসারোল ব্যাচ, খাওয়ানো এবং মিথানল আনয়ন। ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা মাইক্রোবিয়াল গাঁজনে এক দশকেরও বেশি অভিজ্ঞতা নিয়ে গর্ব করে এবং 400 টিরও বেশি প্রকল্পে কাজ করেছে। কোম্পানির ব্যাপক দক্ষতা এবং উন্নত প্রযুক্তি রয়েছে, এটি প্রোটিন উৎপাদনের দক্ষতা উন্নত করতে বিভিন্ন HCDF কৌশল ব্যবহার করতে সক্ষম করে।

মিথানল AOX1 এবং কার্বন উত্স উভয়েরই সূচনা করে, তবে বিষাক্ততা রোধ করতে এর ঘনত্ব নিয়ন্ত্রণ করা আবশ্যক। বিভিন্ন মিথানল খাওয়ানোর কৌশল মূল্যায়ন করা পিচিয়া প্যাস্টোরিস এবং প্রোটিন এক্সপ্রেশনের বৃদ্ধিকে অপ্টিমাইজ করার জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ

মিথানল আনয়ন কৌশল

ফেড-ব্যাচ এইচসিডিএফ মিথানল আনয়ন কৌশলে, রাষ্ট্র-ভিত্তিক আনয়ন কৌশলগুলি নিয়ন্ত্রণ পদ্ধতির একটি সেটকে অন্তর্ভুক্ত করে যা অনলাইন/অফলাইন বা ফরোয়ার্ড/রিভার্স নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে মিথানলের সম্পূরক সংযোজন নিয়ন্ত্রণ করে। পরিসংখ্যানগত আনয়ন কৌশলগুলির মধ্যে, প্রধানগুলির মধ্যে রয়েছে μ-স্ট্যাট, দ্রবীভূত অক্সিজেন (DO)-স্ট্যাট, মিথানল-স্ট্যাট এবং বায়োমাস-স্ট্যাট।

1.1 μ-স্ট্যাট

μ-স্ট্যাট কৌশল μ নিয়ন্ত্রণ করে, প্রজননযোগ্যতাকে সহায়তা করে এবং প্রোটিনের অভিব্যক্তিতে μ-এর প্রভাব অধ্যয়ন করে জৈববস্তুকে স্থির রাখে। যাইহোক, এটিতে সরাসরি মিথানল এবং ডিও নিয়ন্ত্রণের অভাব রয়েছে, যা জমে থাকা এবং ROS তৈরির ঝুঁকিপূর্ণ।

1.2 DO-স্ট্যাট

ডিও-স্ট্যাট কৌশল অক্সিজেনেশন বজায় রাখার জন্য দ্রবীভূত অক্সিজেন নিয়ন্ত্রণ করে মিথানল ফিডকে পরোক্ষভাবে নিয়ন্ত্রণ করে, কিন্তু এটি মিথানলের ঘনত্ব এবং বৃদ্ধির হার ঠিক করে না, যা প্রোটিনের প্রকাশের অধ্যয়নকে প্রভাবিত করতে পারে। বায়বীয় গাঁজনে অক্সিজেনেশন একটি চ্যালেঞ্জ তৈরি করে, এবং বিশুদ্ধ অক্সিজেনের পরিপূরক ব্যয়বহুল এবং বিষাক্ত হতে পারে, চাপ বৃদ্ধি একটি আরও অর্থনৈতিক পদ্ধতি যা প্রোটিনের কার্যকলাপকেও উন্নত করতে পারে।

1.3 মিথানল-স্ট্যাট

মিথানল ঘনত্বের অপর্যাপ্ত নিয়ন্ত্রণ μ-স্ট্যাট এবং ডিও-স্ট্যাট উভয় কৌশলেই সীমাবদ্ধতা সৃষ্টি করে। মিথানল পরিসংখ্যানগত কৌশলগুলি, যা একটি চালু/বন্ধ মোডে কাজ করে, ওঠানামার প্রবণ এবং নির্ভুলতার অভাব রয়েছে। বিপরীতে, পিআইডি কন্ট্রোলাররা সামগ্রিক গাঁজন কার্যকারিতা বাড়ায়, মিথানল ঘনত্বের আরও সুনির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণ সরবরাহ করে।

1.4 বায়োমাস-স্ট্যাট

বায়োমাস-স্ট্যাট কৌশল বায়োমাস এবং মিথানল খাওয়ানোর মধ্যে সম্পর্ককে সংজ্ঞায়িত করে, প্রোটিন ফলন বাড়ানোর জন্য মিথানল খাওয়ানোর হারকে অনুকূল করে। বায়োমাসের অনলাইন নিরীক্ষণ আরও বাস্তব, প্রবাহ সাইটোমেট্রি পছন্দের পদ্ধতি। একটি 1000L স্কেলে, মিথানল খাওয়ানোর হারকে অপ্টিমাইজ করা এনজাইমের কার্যকলাপ, ফলন এবং উত্পাদনশীলতাকে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করে, ফ্লাস্ক গাঁজনকে ছাড়িয়ে যায়।

কো-ফিডিং কৌশল

গ্লিসারল, একটি AOX1 প্রোমোটার ইনহিবিটর হিসাবে, প্রোটিন উত্পাদন দমন এড়াতে মিথানল আনয়নের আগে সম্পূর্ণরূপে গ্রহণ করা আবশ্যক। কো-সাবস্ট্রেটগুলি এনজাইমের কার্যকলাপকে বাড়িয়ে তুলতে পারে তবে অতিরিক্ত গ্লিসারল বৃদ্ধি এবং প্রকাশের ক্ষতি করতে পারে। সরবিটল, অ্যাসকরবিক অ্যাসিড, ম্যানিটল এবং অন্যান্যগুলি গ্লিসারলকে প্রতিস্থাপন করতে পারে, প্রোটিওলাইসিস এবং চাষের সময় হ্রাস করে এবং প্রোটিনের অভিব্যক্তি বাড়ায়।

স্ট্রেনের বৈশিষ্ট্যের স্থিতিশীলতা বজায় রাখার জন্য স্ট্রেন ব্যাঙ্কের যথাযথ সংরক্ষণ পদ্ধতি এবং উপযুক্ত পরিবেশে স্থাপন করা আবশ্যক। ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা গ্লিসারল স্টক সংরক্ষণের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে পারে (অতি-নিম্ন তাপমাত্রার ফ্রিজার বা তরল নাইট্রোজেনের মাধ্যমে) এবং খামির এবং ই. কোলাই সংরক্ষণ-শুকানোর জন্য।

সীমাবদ্ধতা-প্ররোচিত কৌশল

পিচিয়া প্যাস্টোরিসে, কম ডিও, মিথানল ঘনত্বের মতো সীমাবদ্ধ অবস্থা, এবং অক্সিজেন সীমা রিকম্বিন্যান্ট প্রোটিন এক্সপ্রেশন বাড়ায়। অক্সিজেন-সীমিত অবস্থা মিথানল জমার মাধ্যমে AOX1 প্রোমোটারকে সক্রিয় করে, তাপ কমানোর সময় প্রোটিন আউটপুট বাড়ায়। লো-টেম্প ইনডাকশন ফলন, ক্রিয়াকলাপ, স্থিতিশীলতা এবং কোষের কার্যকারিতা বাড়ায় কিন্তু শীতল করার খরচ যোগ করে। pH এবং নাইট্রোজেন সীমাবদ্ধতা অভিব্যক্তিতে সহায়তা করে, অপারেশনাল সমস্যাগুলি এড়াতে সতর্কতা প্রয়োজন। নাইট্রোজেন সীমাবদ্ধতা উল্লেখযোগ্যভাবে নির্দিষ্ট প্রোটিন উত্পাদনশীলতা বাড়ায়।

ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা সক্রিয়ভাবে প্রাতিষ্ঠানিক বা ব্যক্তিগত বৈশ্বিক অংশীদারদের সন্ধান করছে এবং শিল্পে সবচেয়ে প্রতিযোগিতামূলক ক্ষতিপূরণ প্রদান করে। আপনার যদি কোন প্রশ্ন থাকে, আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন নির্দ্বিধায়: [email protected]