ایم آر این اے سالمیت
ایم آر این اے انٹیگریٹی تجزیہ کی اہمیت
mRNAs کو ان کی موروثی عدم استحکام کی وجہ سے پہچانا جاتا ہے اور بیرونی عوامل کی موجودگی میں ٹکڑے ٹکڑے ہونے کے لیے حساس ہوتے ہیں، خاص طور پر ان وٹرو ٹرانسکرپشن (IVT) اور پیوریفیکیشن کے عمل کے دوران، جہاں ہر جگہ نیوکلیز ایک چیلنج کا باعث بنتے ہیں۔ mRNA کی سالمیت کا اندازہ mRNA پر مبنی دوائیوں کے بعد کی ترقی میں بہت اہم ہے، جو کہ حفاظت اور مصنوعات کی دستیابی دونوں کو یقینی بناتا ہے۔
Yaohai-BioPharma جامع mRNA سالمیت کی جانچ کی خدمات فراہم کرتا ہے، تحقیق اور کلینیکل ٹرائلز دونوں کے لیے سخت معیار کے معیارات پر عمل کرتے ہوئے، ایگرز جیل الیکٹروفورسس (AGE)، کیپلیری الیکٹروفورسس (CEG)، اور اعلی کارکردگی والے مائع کرومیٹوگرافی (HPLC) جیسے طریقوں کو استعمال کرتا ہے۔
mRNA سالمیت کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ڈبلیو ایچ او کے ریگولیٹری تحفظات کے مطابق، "ایم آر این اے کی ساخت کی سالمیت کو ایم آر این اے کی رہائی کے لیے ایک اہم معیار کا وصف سمجھا جاتا ہے۔ اس طرح، mRNA کی سالمیت، فیصد برقرار mRNA، فیصد mRNA کے ٹکڑے وغیرہ کے لیے کنٹرول کی ضرورت ہے۔
تجزیاتی طریقہ
تجزیہ |
طریقے |
mRNA سالمیت |
AGE، Agarosegالیکٹروفورسس |
CGE،کیپلیری الیکٹروفورسس |
CGE-LIF، روشنی کی حوصلہ افزائی فلوروسینس کا پتہ لگانے کے ساتھ کیپلیری جیل الیکٹروفورسس |
ایم آر این اے انٹیگریٹی بذریعہ ایگروز جیل الیکٹروفورسس
Agarose جیل الیکٹروفورسس کل RNA کی سالمیت کا جائزہ لینے کے لیے ایک وسیع پیمانے پر استعمال کی جانے والی تکنیک ہے۔ اس میں آر این اے کے نمونے کو ڈینیچرنگ ایگروز جیل پر چلانا شامل ہے، جو ایتھیڈیم برومائیڈ یا ایس وائی بی آر گرین سے داغدار ہے۔ ڈینیچرنگ جیل، ایگروز پر مشتمل ہے، جب برقی رو لگائی جاتی ہے تو سائز کی بنیاد پر آر این اے کو الگ کرنے میں سہولت فراہم کرتا ہے۔ جیسا کہ منفی چارج شدہ RNA جیل کے مثبت سرے کی طرف ہجرت کرتا ہے، چھوٹے ٹکڑے زیادہ تیزی سے حرکت کرتے ہیں، جس کے نتیجے میں RNA مالیکیولز کی سائز پر مبنی چھانٹی ہوتی ہے۔
کیپلیری جیل الیکٹروفورسس کے ذریعہ mRNA سالمیت
کیپلیری جیل الیکٹروفورسس (سی جی ای) لمبائی کے لحاظ سے آر این اے مالیکیولز کی سالمیت کا اندازہ لگانے کے لیے ایک اعلی ریزولوشن تجزیاتی نقطہ نظر کے طور پر کھڑا ہے۔ یہ تشخیص معیار کی یقین دہانی، طاقت کی سمجھ، اور مینوفیکچرنگ کے عمل کی اصلاح کے لیے اہمیت رکھتا ہے۔ ایگرز جیل الیکٹروفورسس کی طرح، سی جی ای آر این اے کے ٹکڑوں کو ان کے چارج اور سائز کی بنیاد پر الگ کرنے کے لیے برقی رو کا استعمال کرتا ہے۔ سی جی ای میں، ایک کیپلیری ایک فلوروسینٹ ڈائی کے ساتھ سیپریشن جیل میٹرکس سے بھری ہوئی ہے۔ کیپلیری کے ساتھ آر این اے کی نقل و حرکت اس کے سائز پر منحصر ہے، اور الٹرا وایلیٹ (UV) یا روشنی سے حوصلہ افزائی فلوروسینس (LIF) ڈیٹیکٹر کا استعمال کرتے ہوئے پتہ لگایا جاتا ہے۔
EN
