ان وٹرو ٹرانسکرپشن (IVT) mRNA کی تیاری کے عمل میں، T7 RNA پولیمریز کی مدد سے IVT کے لیے ٹرانسکرپشن ٹیمپلیٹ کے طور پر لکیری پلاسمڈ DNA کی ضرورت ہوتی ہے۔ وٹرو ٹرانسکرپشن کے لیے اعلیٰ معیار کا پلاسمڈ ڈی این اے اہم ہے۔
بالغ پلازمیڈ تیاری سروس پلیٹ فارم کی بنیاد پر، Yaohai Bio-Pharma موثر IVT ٹرانسکرپشن حاصل کرنے کے لیے اعلیٰ طہارت اور اعلیٰ معیار کی ایک لکیری پلاسمڈ DNA تیاری کی خدمت پیش کر سکتا ہے۔
عمل | اختیاری سروس | سروس کی تفصیلات | ترسیل کی مدت (کام کے دن) |
سرکلر پلازمیڈ کی تیاری | جین کی ترکیب | جین کی ترکیب (تیسری پارٹی) | 7-10 |
پلازمیڈ پروردن | پلازمیڈ پروردن | 2 | |
پلازمیڈ نکالنا | |||
لکیری پلاسمڈ کی تیاری | پلازمیڈ لکیریائزیشن اور طہارت | پلازمیڈ لکیریائزیشن | 1 |
لائنرائزیشن ڈی این اے پیوریفیکیشن | |||
پلازمڈ ڈی این اے کوالٹی کنٹرول | ارتکاز کی پاکیزگی | الٹرا وایلیٹ (UV) سپیکٹرو فوٹومیٹری | 1-2 |
پلازمیڈ کی تشکیل | ایگرز جیل الیکٹروفورسس (AGE) | ||
کیپلیری الیکٹروفورسس (سی ای) - اختیاری | |||
پلازمیڈ شناخت | پابندی کے انزائم کی شناخت / AGE |
لکیریائزیشن کے طریقوں کا لچکدار انتخاب
بحالی کی اعلی شرح حاصل کرنے کے لیے ڈی این اے نکالنے اور صاف کرنے کے طریقوں کی اصلاح۔
80% سے زیادہ کی تحقیق کے لیے پلاسمڈ نمونوں کی سپر ہیلیکل کنفارمیشن ریٹ کے ساتھ سخت عمل کے کنٹرول کے معیارات۔
تجرباتی ضروریات کو پورا کرنے کے لیے اعلیٰ معیاری اور اعلیٰ کارکردگی والے پلازمڈ کی تیاری اور کوالٹی کنٹرول کی خدمات۔
Yaohai Bio-Farma کیٹلاگ mRNA_luciferase پروڈکٹ کو مثال کے طور پر لیتے ہوئے، ٹرانسکرپشن ٹیمپلیٹ پلاسمڈ نمونہ (ریسرچ گریڈ) کا سپر ہیلیکل تناسب 90% سے زیادہ ہے، لکیریائزیشن کا تناسب 100% کے قریب ہے، اور اس کے بعد ٹرانسکرپشن کا تناسب 1:200 تک ہے۔ لکیری پلاسمڈ ڈی این اے: ایم آر این اے)۔
ایک ٹیمپلیٹ کے طور پر ایک لکیری پلاسمڈ کی تیاری کے ذریعے حاصل کردہ mRNA_luciferase کو 293T خلیوں میں منتقل کیا جاتا ہے، اور انزائم-سبسٹریٹ کے رد عمل کی سرگرمی کو منتقلی کے 24 گھنٹے بعد جانچا جاتا ہے۔
ایک واضح مضبوط لوسیفریز سرگرمی سگنل کا پتہ لگایا جا سکتا ہے، یعنی، لوسیفریز پروٹین کو مؤثر طریقے سے ظاہر کیا جاتا ہے، یہ تجویز کرتا ہے کہ ٹرانسکرپشن ٹیمپلیٹ کی پاکیزگی اعلی معیار کے ایم آر این اے کی تیاری کی ضرورت کو پوری طرح پورا کر سکتی ہے۔
سپر کوائلڈ پلازمیڈ ریشو پرکھ
وٹرو میں luciferase mRNA اظہار کی توثیق