دو قدمی انزیمیٹک کیپنگ کے مقابلے میں، ایک قدمی شریک ٹرانسکرپشن کیپنگ کا طریقہ عمل کے بہاؤ کو نمایاں طور پر کم کر سکتا ہے۔ یہ طریقہ نتیجہ پر مبنی ہے اور اس میں وٹرو ٹرانسکرپشن (IVT) ردعمل میں کیپ اینالاگ کا اضافہ شامل ہے۔ نقل کے آغاز پر کیپ اینالاگ متعارف کروائے جا سکتے ہیں، اور نقل کی تکمیل پر کیپ کی ساخت کے ساتھ mRNA حاصل کیا جا سکتا ہے۔ موجودہ تھرڈ جنریشن کیپ اینالاگ ریورس کیپنگ سے بچ سکتے ہیں اور ٹرانسکرپشن پروڈکٹ میں Cap 1 ڈھانچہ براہ راست شامل کر سکتے ہیں۔
ویوو امیونوجنیسیٹی اور ترجمے کی کارکردگی میں ایم آر این اے پر غور کرنے کے لیے، IVT عمل اکثر کچھ قسم کے ترمیم شدہ NTPs کو اپناتا ہے، اور عام ترمیم شدہ نیوکلیوٹائڈز ہیں سیوڈوریڈین (Ψ)، N1-methyl-pseudouri-dine (N1Ψ)، اور 5-methylcytosine (5mC) .
تصویر: mRNA Co-Transcriptional اور Caping Reaction کا خاکہ
سروس کی تفصیلات
سروس |
سروس کی تفصیلات |
ترسیل کی مدت (کام کے دن) |
شریک ٹرانسکرپشن کیپنگ |
ان وٹرو ٹرانسکرپشن ردعمل (کلین کیپ اینالاگ) |
1-2 |
| نیوکلیوٹائڈ ترمیم (Ψ/N1Ψ/5mC) |
| ڈی این اے ٹیمپلیٹ کو ہٹانا (DNase I) |
IVT حالت کی اصلاح - اختیاری |
رد عمل کے اجزاء کا ڈیزائن اور اصلاح |
3-7 |
ہماری خصوصیات
- متنوع نیوکلیوٹائڈ ترمیم کی حکمت عملی
متعدد اختیاری نیوکلیوٹائڈ ترمیم کی حکمت عملی پروٹین کے اظہار کو بہتر بنا سکتی ہے۔
ایک اعلی ٹرانسکرپشن تناسب اور اعلی کیپنگ کارکردگی حاصل کریں۔
95% سے زیادہ کیپنگ ریٹ حاصل کریں۔
تجرباتی ماحول اور استعمال کی اشیاء میں RNase کو سختی سے کنٹرول کرکے مؤثر طریقے سے mRNA کے انحطاط کو روکیں۔
کیس اسٹڈی
Yaohai Bio-Farma نے ریورس کیپنگ سے گریز کرتے ہوئے Cap1 ڈھانچہ کو براہ راست شامل کرنے کے لیے کلین کیپ اینالاگس کا استعمال کرتے ہوئے ایک بالغ کو-ٹرانسکرپشن کیپنگ عمل کا پلیٹ فارم بنایا ہے۔ معیاری نمونہ پری ٹریٹمنٹ اور کیپلیری الیکٹروفورسس (CE) کا پتہ لگانے کے بعد، بہتر گرین فلوروسینٹ پروٹین (eGFP) mRNA کی کیپنگ کی شرح 95% سے زیادہ تک پہنچ سکتی ہے۔
eGFP mRNA کیپنگ کی کارکردگی 95% سے زیادہ
شریک ٹرانسکرپشن کیپنگ کے ذریعہ تیار کردہ eGFP mRNA اور mCherry mRNA بالترتیب 293T خلیوں میں تبدیل ہو جاتے ہیں، اور 48h کے بعد ایک مضبوط فلوروسینٹ سگنل دیکھا جاتا ہے، جو تجویز کرتا ہے کہ mRNA کو 293T خلیوں میں مؤثر طریقے سے ظاہر کیا گیا ہے۔
293T سیل میں eGFP mRNA اور mCherry mRNA کا اظہار
UR
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نہیں
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
BN
