ایل این پی لپڈ کمپوزیشن شناخت اور مقدار
ایل این پی لپڈ کمپوزیشن تجزیہ کی اہمیت
لپڈ نینو پارٹیکلز (LNPs)، جس میں cationic lipid، کولیسٹرول، phospholipid، اور PEG-conjugate lipid شامل ہیں، mRNA منشیات کی مصنوعات کے لیے نمایاں ترسیل کے نظام کے طور پر کام کرتے ہیں۔ LNPs کا استحکام اور bilayer fluidity فارمولیشن سسٹم میں استعمال ہونے والے مختلف لپڈز کی خصوصیات اور مواد پر منحصر ہے۔ لپڈز کی ترکیب اس بات کے لیے بہت اہم ہے کہ LNP کتنی اچھی طرح سے ادویات فراہم کرتے ہیں۔
Yaohai-BioPharma چارجڈ ایروسول ڈٹیکشن (HPLC-CAD) طریقہ کے ساتھ اعلی کارکردگی والے مائع کرومیٹوگرافی کا استعمال کرتے ہوئے mRNA-LNP لپڈ مرکب کی شناخت اور مقدار درست کرنے کے لیے حل فراہم کرتا ہے۔
لپڈ کمپوزیشن کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ڈبلیو ایچ او کے ریگولیٹری تحفظات کے مطابق، "ویکسین کی حتمی ترکیب، بشمول لپڈز، ہر پریزنٹیشن میں اجزاء کی مقدار کے ساتھ بیان کی جانی چاہیے۔"
تجزیاتی طریقہ
تجزیہ |
طریقے |
لپڈ کمپوزیشن |
HPLC کو کورونا چارجڈ ایروسول ڈیٹیکٹر (CAD) کے ساتھ ملا کر |
ضابطے
مرحلہ 1. لپڈ نمونے کی تیاری
mRNA-LNP دوائیوں کی مصنوعات میں لپڈ اجزاء کے تجزیہ کے لیے diluent کا انتخاب انتہائی اہمیت کا حامل ہے۔ ڈائیلوئنٹ کو ہر لپڈ جزو کو مؤثر طریقے سے تحلیل کرنا چاہئے اور لپڈز اور انکیپسولیٹڈ mRNA کے درمیان کسی بھی تعامل میں خلل ڈالنا چاہئے۔ ممکنہ اختلاط میں ایتھنول، ایتھنول/ ڈائمتھائل سلفوکسائیڈ (DMSO)، ایتھنول/فارمامائیڈ، ایتھنول/ٹرائیتھیلامین ایسیٹیٹ اور دیگر شامل ہیں۔
مرحلہ 2۔ HPLC-CAD
ریورس فیز مائع کرومیٹوگرافی (RP-HPLC) کو چارجڈ ایروسول ڈیٹیکٹر (CAD) کے ساتھ جوڑا LNP لپڈ کمپوزیشن ٹیسٹنگ میں شامل کیا گیا ہے۔ یہ دیکھتے ہوئے کہ لپڈز میں کروموفورس کی کمی ہوتی ہے اور وہ الٹرا وائلٹ (UV) تابکاری کو بغیر ڈیریویٹائزیشن کے جذب نہیں کرتے، اتار چڑھاؤ عام طور پر مشکل ہوتا ہے۔ CAD، زیادہ حساس ہونے کی وجہ سے، لپڈ مواد کے وسیع تر سپیکٹرم کو سمجھ سکتا ہے۔ اس سے پہلے، ایک الٹرا ہائی پرفارمنس لیکویڈ کرومیٹوگرافی (UHPLC) کو چارجڈ ایروسول ڈیٹیکٹر (CAD) طریقہ کے ساتھ بنایا گیا تھا اور چھوٹے مداخلت کرنے والے RNA (siRNA) LNP اسٹڈیز کے لیے لپڈ تجزیہ میں لاگو کیا گیا تھا۔
مرحلہ 3۔ ڈیٹا کا تجزیہ
نمونے کے اندر ہر لپڈ کی مقدار میں معیاری وکر سے اخذ کردہ حسابات شامل ہیں جس کو کم کرنے والے عنصر سے ضرب دیا گیا ہے۔ اس عمل سے mRNA-LNP نمونے میں ہر ایک جزو کے لیے لپڈ مواد حاصل ہوا۔
HPLC-CAD کے ساتھ LNP لپڈ کمپوزیشن تجزیہ کا معاملہ
HPLC-CAD کی بنیاد پر، Yaohai-BioPharma نے mRNA-LNP کے لپڈ اجزاء کے تجزیہ کے لیے ایک مضبوط طریقہ تیار کیا ہے۔ یہ طریقہ LNP فارمولیشنز کے لیے لکیری، دوبارہ قابل، درست، درست اور مخصوص ہونے کے لیے توثیق کیا گیا تھا، جو عمل کی ترقی، فارمولیشن کی ترقی، استحکام کی جانچ اور mRNA-LNP کی رہائی میں معاونت کر سکتا ہے۔
Yaohai-BioPharma کے HPLC-CAD طریقہ سے 4 لپڈس کا کرومیٹوگرافک پروفائل
Yaohai-BioPharma کے HPLC-CAD طریقہ کی لکیریٹی (R2＞0.99)
EN
