Производња рекомбинантног протеина: пројектовани сојеви Е. цоли

Есцхерицхиа цоли (Е. цоли) је одиграла значајну улогу у производњи рекомбинантних протеина у биофармацеутској индустрији, служећи као први експресиони вектор за производњу биолошких лекова. Е. цоли се може похвалити брзим растом, погодном генетском манипулацијом и брзом синтезом рекомбинантних протеина, између осталих предности. Обимне модификације су учиниле Е. цоли оптималним избором за експресију протеина, што је довело до дизајна различитих конструисаних сојева Е. цоли.

Иаохаи Био-Пхарма се специјализовала за пружање услуга оутсоурцинга на једном месту за ферментацију, пречишћавање, развој процеса формулације и производњу серије биофармацеутика користећи системе експресије Е. цоли. Што се тиче великог искуства Иаохаија, резимирали смо да се четири уобичајена соја Е. цоли користе за производњу рекомбинантних протеина и њихове карактеристике.

БЛ 21 сој

Изведен из Е. цоли Б лозе, соју БЛ21 недостаје Лон протеаза и протеаза спољне мембране ОмпТ. Лон протеаза првенствено разграђује егзогене протеине, док ОмпТ углавном разграђује протеине екстрацелуларног матрикса. Одсуство ове две кључне протеазе може ефикасно спречити деградацију рекомбинантних протеина.

Оригами сој

Оригами сој, дериват Е. цоли К-12, има мутације у тиоредоксин редуктази и глутатион редуктази, које олакшавају формирање правилно пресавијених протеина који садрже дисулфидне везе и побољшавају растворљивост протеина. Оригами сој, укључујући Оригами, Оригами 2 и Оригами Б, погодан је за експресију активних протеина који садрже дисулфидне везе.

Схуффле страин

Схуффле сој конститутивно експримира изомеразу дисулфидне везе ДсбЦ у цитоплазми, промовишући формирање исправних дисулфидних веза у оксидованим протеинима. Такође служи као молекуларни пратилац за савијање протеина, помажући у формирању исправне конформације.

Росетта сој

Сој Росетта допуњује Е. цоли тРНК које одговарају ретким кодонима, са циљем да побољша ниво експресије егзогених гена, посебно еукариотских гена, у прокариотским системима. Изведен од БЛ21 и који носи пРАРЕ плазмид отпоран на хлорамфеникол, он допуњује шест тРНК које одговарају ретким кодонима (АУА, АГГ, АГА, ЦУА, ЦЦЦ и ГГА) првобитно одсутне у Е. цоли, обезбеђујући „универзалнију“ експресију протеина.

Zakljucak

Три главна фактора за успешну производњу рекомбинантних протеина су домаћин, вектор и услови културе. На основу разумевања физичко-хемијских особина рекомбинантног протеина, јединствених предности сваког соја и специфичних потреба експеримента, треба изабрати најпогоднијег домаћина. Поред тога, факторе као што су плазмидни вектори, температура и индуктори треба оптимизовати да би се побољшала експресија протеина.

Иаохаи Био-Пхарма такође активно тражи институционалне или појединачне глобалне партнере и нуди најконкурентнију надокнаду у индустрији. Ако имате било каквих питања, слободно нас контактирајте: БД@иаохаибио.цн