Proizvodnja Rekombinantnih Proteina: Inženirane Štame E. coli

Escherichia coli (E. coli) je igrao značajan ulogu u proizvodnji rekombinantnih proteina u biofarmaceutskoj industriji, služeći kao prvi izrazni vektor za proizvodnju biološke medicine. E. coli poseduje brzu rast, lako genetsko manipuliše i brzo sintetizira rekombinatne proteine, među drugim prednostima. Proširene modifikacije su učinile od E. coli optimalan izbor za izraz proteina, što je dovelo do dizajna različitih inženjerskih štedova E. coli.

Yaohai Bio-Pharma se bavi pružanjem usluga jednoštavičnog izvoza za fermentaciju, čišćenje, razvoj formulacije procesa i proizvodnju niza biopharmaceutsaka koristeći sisteme izraza E. coli. U vezi sa obimanjim iskustvom Yaohai, sažeto smo da se često koriste četiri šteda E. coli za proizvodnju rekombinantnih proteina i njihove karakteristike.

Šted BL 21

Izveden iz linije E. coli B, štrajn BL21 nedostaje Lon proteaza i spoljnja membrana proteaza OmpT. Lon proteaza uglavnom degradiše eksogenne proteine, dok OmpT uglavnom degradiše proteine ekstracelularne matrice. Nedostatak ovih dva ključna proteaze može učinkovito sprečiti degradaciju rekombinantnih proteina.

Štrajn Origami

Štrajn Origami, derivat od E. coli K-12, ima mutacije u tiredoxin reduktazi i glutaton reduktazi, što omogućava formiranje tačno savijanih proteina koji sadrže disulfidne veze i poboljšava rastvorivost proteina. Štrajn Origami, uključujući Origami, Origami 2 i Origami B, prikladan je za ekspresiju aktivnih proteina koji sadrže disulfidne veze.

Štrajn SHuffle

SHuffle štednjak konstitutivno izražava izomerazu disulfidne veze DsbC u citoplazmi, što pridonosi formiranju tačnih disulfidnih veza u oksidisanim proteinima. Takođe služi kao molekularni čaperon za savijanje proteina, pomagajući u formiranju tačne konformacije.

Rosetta štednjak

Rosetta štednjak dopunjava E. coli tRNAs koje odgovaraju redkim kodonima, ciljajući na poboljšanje nivoa izražavanja stranih gena, posebno eukariotskih gena, u prokariotskim sistemima. Potiče se od BL21 i nosi plazmid pRARE koji je otporan na kloramfenikol, dopunjujući šest tRNA koji odgovaraju redkim kodonima (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC i GGA) koji su izvorno bili nepostojeci u E. coli, pružajući „univerzalniju“ ekspresiju proteina.

Закључак

Tri glavna čimbenika za uspešnu proizvodnju rekombinantnih proteina su domaćin, vektor i uslovi kulture. Na osnovu razumevanja fiziko-kemijskih svojstava rekombinantnog proteina, jedinstvenih prednosti svake štede i specifičnih potreba eksperimenta, treba izabrati najpogodniji domaćin. Takođe, čimbenici kao što su plazmid vektori, temperatura i indukatori trebaju biti optimizovani kako bi se povećao izraz proteina.

Yaohai Bio-Pharma takođe aktivan je u pretrazi globalnih partnera, institucija ili pojedinki, i nudi najkonkurentsiju naknadu u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]