MRNA قوت تجزیہ کا اہمیت
MRNA ویکسینز اور معالجات کی تیز رفتار ترقی کے ساتھ، خاص تجزیاتی طریقہ کار کی ضرورت ہوتی ہے جو قوت کو ٹیسٹ کرنے کے لئے استعمال ہوتی ہے (ان کی زیستی فعالیت کو تعریف کرتی ہے)، جس میں mRNA کی ترجمانی کی کارآمدی شامل ہوتی ہے۔ یہ طریقہ کار عام طور پر سل کے ذریعہ منتقل کرنے اور نشانہ بنا کر پروٹین کی کارکردگی کی تجزیہ پر مبنی ہوتی ہیں۔
Yaohai Bio-Pharma mRNA دواوں کی مواد یا LNP منتجات کے لئے سل کے اساس پر قوت کی تجزیات پیش کرتی ہے، جس میں سل کی منتقلی شامل ہے (293T، HepG2، HeLa، K562، U937، Raw264.7 سلوں وغیرہ) اور ELISA یا Western Blotting (WB) تجزیات۔
قوت تجزیات کے لئے تنظیمی مطلوبات
WHO کے تنظیمی ملاحظات کے مطابق، "ہر ویکسائن کی پوٹنسی کا تعین کرنے کے لئے ایک مناسب تجزیاتی اور معتمد طریقہ استعمال کیا جانا چاہیے۔ درج ذیل پوٹنسی آسائیز کے لئے سیل بیسڈ ٹرانس فیکشن سسٹمز یا سیل فری آسائیز شامل ہوسکتے ہیں۔" اور USP نے mRNA کی پوٹنسی کو ٹیسٹ کرنے کے لئے "سیل بیسڈ آسائیز" کی تجویز کی، یعنی ہدف کے پروٹین کی عبارت۔
طریقہ کار
قدموں کی تفصیل: قدم 1. سیل بیسڈ ٹرانس فیکشن mRNA یا mRNA-LNP سے
سیلوں کو پالنگ کیا جاتا ہے اور mRNA یا mRNA-LNP سے ٹرانس فیکٹ کیا جاتا ہے۔ تفصیلی طور پر، mRNA کو ٹرانس فیکشن ریجنٹ کے ساتھ مخلوط کرنے کے بعد ٹرانس فیکٹ کیا جاتا ہے، جبکہ mRNA-LNP کو سیلوں میں مستقیم طور پر ٹرانس فیکٹ کیا جاتا ہے۔ 24-48 گھنٹوں کے بعد، عبارت پروٹین والے سپرینٹینٹ کو سینٹری فوجن کے ذریعہ صاف کیا جاتا ہے۔
قدم 2. ہدف پروٹین کی فنکشنل آسائیز
الیسا یا وی بی آسیز کرکے ہدف پروٹینز کے فنکشنل باونڈنگ کا جائزہ لیں۔
کیس سٹڈی
سل بیسڈ پوٹنسی آسیز ایم آر این اے نمونوں کے لئے
یاؤہائی بائیوفارма نے ایم آر این اے کے لئے سل بیسڈ پوٹنسی آسیز میتھڈ تیار کیا ہے، جس میں سل کالچر، سل ٹرانس فیکشن اور پروٹین فنکشنل آسیز شامل ہیں۔ ہم نے 293T سلوں میں eGFP ایم آر این اے، mCherry ایم آر این اے، لوسریس ایم آر این اے، اور اسپائیک پروٹین ایم آر این اے ٹرانس فیکٹ کیا، اور فلوریسنس، لامینیسنس یا رنگی شناخت، وی بی، الیسا کے ذریعہ ہدف پروٹین کا پتہ لگایا۔
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
