ای جی ایف پی رپورٹر آر این اے کی بہترین خوراک کی نقاب کشائی

مالیکیولر بائیولوجی اور بائیوٹیکنالوجی میں، بہتر سبز فلوروسینٹ پروٹین (ای جی ایف پی) 509 این ایم پر روشن سبز فلوروسینس پیدا کرنے کی صلاحیت کی وجہ سے ایک اہم رپورٹر جین کے طور پر ابھرا ہے۔ یہ پروٹین، اصل میں جیلی فش ایکوریا وکٹوریہ سے الگ تھلگ، ممالیہ خلیوں کی ثقافتوں میں ایک براہ راست پتہ لگانے والا نشان ہے، جو ٹرانسفیکشن کی کارکردگی کی نگرانی اور اصلاح میں سہولت فراہم کرتا ہے۔ تاہم، سوال یہ پیدا ہوتا ہے: مطلوبہ اظہار کی سطح کو حاصل کرنے کے لیے eGFP رپورٹر RNA کی زیادہ سے زیادہ خوراک کیا ہے؟

تحقیق نے یہ ظاہر کیا ہے کہ eGFP رپورٹر RNA کی تاثیر کا بہت زیادہ انحصار اس کی خوراک پر ہوتا ہے، خاص طور پر سرکلر RNA (circRNA) اور سیلف ایمپلیفائنگ mRNA (saRNA) سسٹمز کے تناظر میں۔ Ghent یونیورسٹی کے Nanomedicine Research Group میں Katrien Remaut ٹیم کی طرف سے کئے گئے مطالعات نے saRNA کی خوراک اور ریٹنا کے خلیات میں اس کے ترجمے کی کارکردگی کے درمیان پیچیدہ تعلق کو اجاگر کیا ہے۔ انہوں نے دریافت کیا کہ saRNA کی کم خوراکیں، پیدائشی مدافعتی ایکٹیویشن کی حد سے نیچے، موثر پروٹین کے اظہار میں سہولت فراہم کرتی ہیں۔ یہ ای جی ایف پی رپورٹر آر این اے کی مکمل صلاحیت کو بروئے کار لانے میں خوراک کے عین مطابق کنٹرول کی اہمیت کو واضح کرتا ہے۔

عملی ایپلی کیشنز میں، eGFP mRNA کی عام طور پر استعمال ہونے والی ارتکاز مائیکروگرام (μg) سے لے کر نانوگرام فی مائیکرو لیٹر (ng/μL) تک ہو سکتی ہے۔ مثال کے طور پر، منتقلی کے تجربات میں، eGFP mRNA کی 0.05 μg سے 0.5 μg تک کی خوراکیں مختلف خلیوں کی اقسام میں نمایاں اظہار کی سطح پیدا کرتی ہیں، بعض صورتوں میں مثبت خلیوں کی فیصد 99-100% تک پہنچ جاتی ہے۔ خاص طور پر، 0.1 μg سے کم خوراکوں پر، saRNA لکیری mRNA کے مقابلے میں اعلیٰ اظہار کی سطح کو ظاہر کرتا ہے، اپنے خود کو بڑھانے والے فائدہ کو ظاہر کرتا ہے۔

ای جی ایف پی رپورٹر آر این اے کی استعداد نہ صرف اس کے روشن اور مستحکم فلوروسینس میں ہے بلکہ اس کی مختلف تجرباتی سیٹ اپ کے موافق ہونے میں بھی ہے۔ محققین اپنی مخصوص ضروریات کے مطابق خوراک کو ٹھیک کر سکتے ہیں، جین کے اظہار کی سطح پر قطعی کنٹرول کو یقینی بناتے ہوئے یہ خصوصیت ای جی ایف پی کو جین کے فنکشن کا مطالعہ کرنے، سیل کی قسمت کی نگرانی کرنے اور ٹرانسفیکشن پروٹوکول کو بہتر بنانے کے لیے ایک انمول ٹول بناتی ہے۔

آخر میں، eGFP رپورٹر RNA کی زیادہ سے زیادہ خوراک تجرباتی تناظر اور مطلوبہ نتائج پر بہت زیادہ منحصر ہے۔ مناسب خوراک کو احتیاط سے منتخب کرکے، محققین اس ورسٹائل رپورٹر جین کی پوری صلاحیت کو بروئے کار لا سکتے ہیں، مالیکیولر میکانزم کے بارے میں ہماری سمجھ کو آگے بڑھا سکتے ہیں اور بائیو ٹیکنالوجی میں جدت طرازی کو آگے بڑھا سکتے ہیں۔

Yaohai Bio-Farma گریٹر چین میں مائکروبیل ایکسپریشن سسٹم CRDMO کے لیے وقف پہلا اور سب سے بڑا حیاتیات ہے۔ ہم انسانی اور ویٹرنری استعمال کے لیے حیاتیاتی ادویات، ویکسین اور تشخیص کے لیے اپنے عالمی صارفین کی طبی اور تجارتی ضروریات کو پورا کرنے کے لیے پرعزم ہیں۔

ہم ادارہ جاتی یا انفرادی عالمی شراکت داروں کی بھی سرگرمی سے تلاش کر رہے ہیں۔ ہم صنعت میں سب سے زیادہ مسابقتی معاوضہ پیش کرتے ہیں۔ اگر آپ کے کوئی سوالات ہیں، تو براہ مہربانی بلا جھجھک ہم سے رابطہ کریں: [email protected]