ریکومبیننٹ پروٹین کی پیداوار: انجینئرڈ ای کولی سٹرینز

Escherichia coli (E. coli) نے حیاتیاتی دوا سازی کی صنعت میں دوبارہ پیدا ہونے والے پروٹین کی پیداوار میں اہم کردار ادا کیا ہے، جو حیاتیاتی ادویات کی تیاری کے لیے پہلے اظہار ویکٹر کے طور پر کام کرتا ہے۔ ای کولی دوسرے فوائد کے علاوہ تیز رفتار نشوونما، آسان جینیاتی ہیرا پھیری، اور دوبارہ پیدا ہونے والے پروٹین کی تیز ترکیب پر فخر کرتا ہے۔ وسیع تر ترامیم نے E. coli کو پروٹین کے اظہار کے لیے ایک بہترین انتخاب بنا دیا ہے، جس کے نتیجے میں E. coli کے مختلف انجنیئرڈ سٹرینوں کا ڈیزائن تیار کیا گیا ہے۔

Yaohai Bio-Farma E. coli اظہار کے نظام کا استعمال کرتے ہوئے ابال، صاف کرنے، فارمولیشن کے عمل کی ترقی، اور بائیو فارماسیوٹیکلز کی ایک سیریز کی تیاری کے لیے ون اسٹاپ آؤٹ سورسنگ خدمات فراہم کرنے میں مہارت رکھتا ہے۔ Yaohai کے وسیع تجربے کے بارے میں، ہم نے خلاصہ کیا کہ چار عام E. coli strains کو دوبارہ پیدا کرنے والے پروٹین کی پیداوار اور ان کی خصوصیات کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔

BL 21 تناؤ

E. coli B نسب سے ماخوذ، BL21 تناؤ میں لون پروٹیز اور بیرونی جھلی پروٹیز OmpT کی کمی ہے۔ لون پروٹیز بنیادی طور پر خارجی پروٹین کو کم کرتا ہے، جبکہ OmpT بنیادی طور پر ایکسٹرا سیلولر میٹرکس پروٹین کو کم کرتا ہے۔ ان دو اہم پروٹیز کی عدم موجودگی دوبارہ پیدا ہونے والے پروٹین کے انحطاط کو مؤثر طریقے سے روک سکتی ہے۔

اوریگامی تناؤ

اوریگامی سٹرین، جو E. coli K-12 سے ماخوذ ہے، میں thioredoxin reductase اور glutathione reductase میں اتپریورتن ہوتے ہیں، جو ڈسلفائیڈ بانڈز پر مشتمل صحیح طریقے سے فولڈ پروٹین کی تشکیل میں سہولت فراہم کرتے ہیں اور پروٹین کی حل پذیری کو بڑھاتے ہیں۔ اوریگامی تناؤ، بشمول اوریگامی، اوریگامی 2، اور اوریگامی بی، ڈسلفائیڈ بانڈز پر مشتمل فعال پروٹین کے اظہار کے لیے موزوں ہیں۔

شفل کشیدگی

شفل سٹرین بنیادی طور پر سائٹوپلازم میں ڈسلفائیڈ بانڈ isomerase DsbC کا اظہار کرتا ہے، جس سے آکسائڈائزڈ پروٹینز میں صحیح ڈسلفائیڈ بانڈز کی تشکیل کو فروغ ملتا ہے۔ یہ پروٹین فولڈنگ کے لیے مالیکیولر چیپیرون کے طور پر بھی کام کرتا ہے، جو صحیح کنفارمیشن کی تشکیل میں مدد کرتا ہے۔

روزیٹا تناؤ

روزیٹا سٹرین ای کولی کو ٹی آر این اے کے ساتھ سپلیمنٹ کرتا ہے جو نایاب کوڈنز سے مطابقت رکھتا ہے، جس کا مقصد پروکریوٹک نظاموں میں خارجی جین، خاص طور پر یوکرائیوٹک جینز کے اظہار کی سطح کو بہتر بنانا ہے۔ BL21 سے ماخوذ اور chloramphenicol-resistant pRARE پلاسمڈ لے کر، یہ نایاب کوڈنز (AUA، AGG، AGA، CUA، CCC، اور GGA) سے مطابقت رکھنے والے چھ tRNAs کی تکمیل کرتا ہے جو E. coli میں اصل میں غیر موجود ہیں، جو مزید "یونیورسل" پروٹین اظہار فراہم کرتے ہیں۔

نتیجہ

ریکومبیننٹ پروٹین کی کامیاب پیداوار کے تین اہم عوامل میزبان، ویکٹر اور ثقافت کے حالات ہیں۔ ریکومبیننٹ پروٹین کی فزیک کیمیکل خصوصیات، ہر تناؤ کے منفرد فوائد اور تجربے کی مخصوص ضروریات کی تفہیم کی بنیاد پر، موزوں ترین میزبان کا انتخاب کیا جانا چاہیے۔ مزید برآں، پلاسمڈ ویکٹر، درجہ حرارت، اور inducers جیسے عوامل کو پروٹین کے اظہار کو بڑھانے کے لیے بہتر بنایا جانا چاہیے۔

Yaohai Bio-Farma بھی فعال طور پر ادارہ جاتی یا انفرادی عالمی شراکت داروں کی تلاش میں ہے اور صنعت میں سب سے زیادہ مسابقتی معاوضہ پیش کرتا ہے۔ اگر آپ کے کوئی سوالات ہیں، تو براہ مہربانی بلا جھجھک ہم سے رابطہ کریں: [email protected]