مصنوعی مینسل انسلین کے تخلیق عمل کو بہتر بنانا

ابھی کے سالوں میں، دیabetes بیماروں کی تعداد کی بڑھتی ہوئی وجہ سے insulin کی ضرورت بڑھ رہی ہے، لیکن قابل اfordability insulin کمی میں ہے۔ insulin کی حوصلہ افزائش کارآمد اور معیاری بنانے کی ضرورت ہے۔ جلدی سے نما پڑھنے اور کم لاگت کی وجہ سے Escherichia coli (E. coli) اور خمیر کے ذریعے تیار کیا جاتا ہے، E. coli کے بعد مرحلہ پر مشکلیں ہوتی ہیں۔

Downstream Processing کا خلاصہ:

E. coli کے inclusion bodies سے human insulin کو صاف کرنے کے لیے کئی steps شامل ہیں، جن میں recovery، washing، solubilization اور oxidation، cleavage، buffer exchange، chromatographic purification، precipitation، renaturation، enzymatic cleavage اور formulation شامل ہیں۔

Yaohai Bio-Pharma میں recombinant insulin production اور purification میں وسیع تجربہ ہے، اور اس کے ساتھ ایک ماہرین کی ٹیم ہے، جو یقینی بناتی ہے کہ آپ کی insulin production کارآمد طریقے سے مکمل ہو۔ ہمارے سوئیں projects کے تجربے کو استعمال کرتے ہوئے، Yaohai کی طرف سے یہ بتایا گیا ہے کہ Recombinant Human Insulin کے لیے Downstream Purification Process کو کس طرح optimize کیا جاسکتا ہے۔

شاملہ جسم بازیابی اور دھولنا:

خانے کو مکینیکل طریقہ جات (مثل ایس سونیکیشن، عالی دباؤ ہوموگنائزیشن) یا لائسوایم تعاوں کے ذریعے توڑا جاتا ہے، اس کے بعد دھولنے کے بفر (جس میں یوریا، ٹرائٹن X-100 وغیرہ شامل ہوتے ہیں) استعمال کیے جاتے ہیں تاکہ آلودگیاں ہٹائی جاسکیں۔ دھولنے کے دوران پارامیٹرز کو بہترین طریقے سے تنظیم کیا جانا چاہئے تاکہ پروٹین کی کوالٹی کو یقینی بنایا جائے اور خرچ کنٹرول کیا جائے۔

شاملہ جسم حل کردگی اور آکسڈیشن:

بالقوہ حل کردگی کیلئے (مثل گوانیڈائن ہائیڈروکلائڈ اور یوریا) استعمال کیے جاتے ہیں، اس کے ساتھ دتھیوتھریٹول یا β-مرکپتو ایٹھانول شامل کیا جاتا ہے تاکہ غلط ڈبلیو سلائیڈ بانڈز کی تشکیل روکی جاسکے۔ pH اور درجہ حرارت حل کردگی اور آکسڈیشن ریکشن پر زیادہ نقصان پیدا کرتی ہیں۔

ٹکڑا چھوڑنا اور بفر تبدیلی:

سائینوژن برومنائیڈ کلیویج نہایتی امینو اسید کو ہٹانے کے لئے استعمال ہوتا ہے، لیکن یہ مضرت آور اور کم خاصیت کے مسائل پیش کرتا ہے۔ بافر تبدیلی دائرالاب، اُلٹافلٹریشن یا سائز اخراج کرومیٹوگرافی کے ذریعے مضر ریجنٹس کو ہٹانا بعد کی عملیات کے لئے تیار کرتی ہے۔

کرومیٹوگرافی سے صفائی اور تقطیع:

اینسولن کو صاف کرنے کے لئے متعدد کرومیٹوگرافی کی طریقہ العمل استعمال ہوتی ہیں، جن میں علاقہ ورانہ کرومیٹوگرافی، آئون ایکسچینج کرومیٹوگرافی، واپسی فاز کرومیٹوگرافی، مادی تاثیر کرومیٹوگرافی اور سائز اخراج کرومیٹوگرافی شامل ہیں۔ تقطیع کی طریقہ العمل، جیسے pH تقطیع اور زنک بلندی، غیر پاکیوں کو ہٹانے اور پروٹین کو مرکزی بنانے کے لئے استعمال ہوتی ہیں۔

دوبارہ گھومنا:

ذوبیلی پروٹین کو دوبارہ گھومانے والے بافر میں پانی کم کیا جاتا ہے تاکہ ڈبلیوڈی بانڈز اور پروٹین گھومنے کی درست تشکیل کو بڑھاوا دیا جاسکے۔ پروٹین گھومنے کی مایع کرومیٹوگرافی اور دائرالاب بھی دوبارہ گھومانے کے لئے استعمال ہوتی ہیں۔

انزائیمی تقطیع اور فارمولیشن:

ٹرائپسن اور کاربوکسی پیپٹیڈیز بی کو ٹھیلے جانے کے لئے C-پیپٹائید کا استعمال کیا جاتا ہے، جو فعال انسلین ہیٹروڈائمر بناتا ہے۔ آخر میں، کرستلائزیشن اور لاپھائبلائزیشن کو بقاۂ صفات اور بافرز کو ہٹانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے، تاکہ مستقیم طور پر استعمال کیلئے مناسب بنایا جاسکے۔ خاص اضافات (جیسے زنک اور پروٹامائن) مختلف سریری ضرورتیں پوری کرنے کے لئے کیے جاتے ہیں۔

نتیجہ:

انسلین کے بعد آنے والے معالجہ کے عمل کرنا ایچ کولی معقد ہے۔ مستقبل میں یہ خطوات موثر اور معقول قیمت پر تیار کرنے کے لئے بہتر بنانے پر دباؤ ہونا چاہئے تاکہ تقاضے کو پورا کیا جاسکے اور خرچ کم کیا جاسکے۔

یاوہائی بائیو فارما عالمی شرکتیں یا انفرادی شریک تلاش کر رہی ہے اور صنعت میں سب سے متنافسی دستخط پیش کرتی ہے۔ اگر آپ کو کسی سوال یا مسئلہ ہو تو مکمل طور پر ہمارے ساتھ رابطہ کریں: [email protected]