بائیو فارما پروڈکشن کے لیے ای کولی سیلولر انٹیگریٹی کو بہتر بنانا

بائیو فارماسیوٹیکل کے میدان میں، Escherichia coli (E. coli) دوبارہ پیدا ہونے والے پروٹین کے اظہار کے لیے میزبان کے طور پر اہم کردار ادا کرتا ہے۔ E. coli کی سیلولر سالمیت پروٹین کی پیداوار، معیار اور پیداواری لاگت کے لیے اہم ہے۔ اس سالمیت میں بنیادی طور پر اندرونی جھلی (IM) اور بیرونی جھلی (OM) کی ساخت اور کام شامل ہوتا ہے۔

یاوہائی بائیو فارما کے پاس ای کولی ابال اور دوبارہ پیدا ہونے والے پروٹین کے اظہار میں 15 سال ہیں۔ ہم اعلی E. کولی سیلولر سالمیت کو برقرار رکھنے کے لیے مختلف حکمت عملیوں کا استعمال کرتے ہیں، 1 گھنٹے کے کاشت کے دوران پلازمڈ کی پیداوار 30g/L سے زیادہ ہوتی ہے۔ مائکروبیل ایکسپریشن کے وسیع تجربے پر روشنی ڈالتے ہوئے، Yaohai Bio-Farma نے بائیو فارماسیوٹیکل پروڈکشن کے دوران E. coli کی سیلولر انٹیگریٹی کی نگرانی اور اسے بہتر بنانے کے لیے کئی موثر حکمت عملیوں کا خلاصہ کیا ہے۔

ای کولی کی سیلولر سالمیت کی نگرانی کے لیے تکنیک

فلو سائٹومیٹری: سیلولر حالتوں میں فرق کرنے کے لیے فلوروسینٹ رنگوں کا استعمال کرتا ہے، جیسے سیل کی قابل عملیت کا پتہ لگانے کے لیے پروپیڈیم آئوڈائڈ اور OM پارگمیتا کا اندازہ لگانے کے لیے SYTO9۔ تاہم، یہ داغ اور پیچیدہ آپریشن کی اعلی قیمت کی ضرورت ہے.

Colorimetric طریقے: سپرنٹنٹ میں ڈی این اے مواد، انزائم کی سرگرمیوں وغیرہ کا پتہ لگا کر سیل لیسز کی عکاسی کریں، جیسے کہ PicoGreen reagent kit اور alkaline phosphatase ایکٹیویٹی اسسیس کا استعمال۔ تاہم، یہ طریقے بوجھل ہیں اور مہنگے ری ایجنٹس کی ضرورت ہوتی ہے۔

ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی: OM کے رساو کا اندازہ لگانے کے لیے ایکسٹرا سیلولر مصنوعات کی تعداد کی آف لائن پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ پھر بھی، اس کا آٹومیشن پیچیدہ ہے اور تجزیہ کا وقت طویل ہے۔

وائبریشنل سپیکٹروسکوپی تکنیک: جیسے قریب اورکت اور درمیانی اورکت سپیکٹروسکوپی، جس میں ممکنہ ایپلی کیشنز ہوتے ہیں لیکن اس کے لیے سپیکٹرل مداخلت اور ڈیٹا کے تجزیہ کے چیلنجوں پر قابو پانے کی ضرورت ہوتی ہے۔

ڈائی الیکٹرک اسپیکٹروسکوپی: سیل سسپنشنز کی رکاوٹ کی پیمائش کرکے، ریئل ٹائم آن لائن مانیٹرنگ کو قابل بنا کر جھلی کی سالمیت کا اندازہ لگاتا ہے۔ تاہم، یہ مداخلت کے لئے حساس ہے اور انشانکن مشکل ہے.

بایو سینسرز: خلیات یا پیری پلاسم کے اندر سے لیک ہونے والے مرکبات کا پتہ لگاسکتے ہیں، لیکن سینسر کی تخلیق نو کی مشکلات جیسے مسائل کا سامنا کرنا پڑتا ہے۔

واسکاسیٹی اور کثافت کی پیمائش: لاگت میں کم اور تجزیہ میں تیز، لیکن انتخابی صلاحیت کی کمی ہے اور فیصلے کے لیے ملٹی بیچ ڈیٹا پر غور کرنے کی ضرورت ہے۔

سیلولر سالمیت کو متاثر کرنے والے عوامل

سٹرین انجینئرنگ: جینیاتی انجینئرنگ کے ذریعے OM کی سالمیت کو تبدیل کرتا ہے، جیسے کہ لیپوپروٹین جینز کو تبدیل کرنا، لیکن تناؤ کی نمو کو متاثر کر سکتا ہے۔

حوصلہ افزائی تناؤ: دوبارہ پیدا ہونے والے پروٹین کا زیادہ اظہار میٹابولک بوجھ کا باعث بنتا ہے، جو سیلولر فزیالوجی کو متاثر کرتا ہے۔ لہذا، اظہار کی سطحوں کا معقول ضابطہ ضروری ہے۔

سبسٹریٹ فیڈنگ ریٹ: دونوں حد سے زیادہ زیادہ اور کم فیڈنگ ریٹ سیل لیسز اور OM کی سالمیت کو متاثر کرتے ہیں۔

درجہ حرارت اور ہوا: زیادہ درجہ حرارت اور کم آکسیجن کی دستیابی بالترتیب اظہار کے دباؤ اور OM کے رساو کو بڑھاتی ہے، لیکن مخصوص اثرات مختلف ہوتے ہیں۔

Osmotics: پیری پلاسمک پروٹین کو جاری کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے لیکن ان کے استعمال کو محدود کرتے ہوئے سیل کی عملداری کو نقصان پہنچاتا ہے۔

نتیجہ مستقبل کی تحقیق کو سیلولر جھلی کی سالمیت کو درست طریقے سے کنٹرول کرنے کے لیے جھلی کی مرمت کے طریقہ کار اور حالات کی گہرائی میں جانے کی ضرورت ہے۔ نگرانی کے طریقوں کو بہتر بنانے، اور اثر انداز کرنے والے عوامل کا تجزیہ کرنے سے مصنوعات کے معیار کو بہتر بنانے کی توقع کی جاتی ہے، اس طرح بائیو فارماسیوٹیکل انڈسٹری کی ترقی کو آگے بڑھایا جاتا ہے۔

ہم ادارہ جاتی یا انفرادی عالمی شراکت داروں کی بھی سرگرمی سے تلاش کر رہے ہیں۔ ہم صنعت میں سب سے زیادہ مسابقتی معاوضہ پیش کرتے ہیں۔ اگر آپ کے کوئی سوالات ہیں تو، براہ کرم ہم سے بلا جھجھک رابطہ کریں۔ [email protected]