E. coli سیل کی Integrity کو بہتر بنانا بایو فارما تولید کے لئے

بائیو فارمیسیٹکلز کے شعبے میں، ایشیریچیا کولی (ای۔ کولی) ریکومبنٹ پروٹینوں کی ظہور کے لیے میزبان کے طور پر ایک حیاتی کردار ادا کرتا ہے۔ ای۔ کولی کی سیلولر تکملتی پروٹین کی تعداد، کوالٹی اور پیداوار کے خرچات کے لیے ضروری ہے۔ یہ تکملتی مخصوص طور پر اندری جلدہ (آئی ایم) اور باہری جلدہ (او ایم) کی ساخت اور عمل پر مشتمل ہے۔

یاؤہائی بائیو-فارما کے پاس ای۔ کولی کے فریمینشن اور ریکومبنٹ پروٹین کی ظہور کے لیے 15 سال کا تجربہ ہے۔ ہم مختلف استراتیجیوں کا استعمال کرتے ہیں تاکہ ای۔ کولی کی سیلولر تکملتی کو بالا رکھا جائے، جس سے پلاسمڈ تولید 30 گھنٹوں کے پیداوار دورة میں 1 گرام/لیٹر سے زیادہ ہوتی ہے۔ مائیکروبیل اظہار میں وسیع تجربے کو ذریعہ بنانے کے بعد، یاؤہائی بائیو-فارما نے ای۔ کولی کی سیلولر تکملتی کو برقرار رکھنے اور بہتر بنانے کے لیے کچھ مؤثر استراتیجیاں جمع کی ہیں جو بائیو فارمیسیٹکلز پیداوار کے دوران مفید ثابت ہوں گی۔

ای۔ کولی کی سیلولر تکملتی کو نگرانی کرنے کے لیے تکنیکیں

فلو سیٹومیٹری: فلورسینٹ رنگینچھڑی کا استعمال کرتا ہے جس کے ذریعے خلیاتی حالت کو تفریق کیا جا سکے، مثلاً پروپیڈیم آئودائیڈ برائے خلیہ کی زندگی کی جانچ اور SYTO9 برائے OM نفوذیت کی جانچ کے لیے۔ تاہم، یہ آلے اور پیچیدہ عمل کی ضرورت پڑتی ہے۔

رنگیں طریقہ: خلیاتی شکست کو اندازہ لگانے کے لیے DNA مقدار، إنزایم فعالیتوں وغیرہ کی جانچ کرتا ہے، جیسے PicoGreen ریجنٹ کٹ اور علیہ فسفریز فعالیت جانچ کے استعمال کرتا ہے۔ تاہم، یہ طریقوں کا استعمال مشکل ہوتا ہے اور غیر مناسب رنگینچھڑی کی ضرورت پڑتی ہے۔

بلند عملداری کے تحت مائع کرومیٹوگرافی: اس کا استعمال خلیاتی باہری مصنوعات کی تراکیب کی جانچ کے لیے کیا جاتا ہے تاکہ OM نفوذیت کو جانچا جا سکے۔ تاہم، اس کی خودکاری پیچیدہ ہے اور تحلیل کا وقت لمبا ہوتا ہے۔

تردیدی طیفی طریقہ: جیسے نearable اور mid-infrared طیفی، جو کہ اطلاقات کے لیے موقعیت دیتے ہیں لیکن طیفی مداخلت اور ڈیٹا تحلیل کی چیلنجز کو چھوڑنا پڑتا ہے۔

ڈائیLECTRIC سپیکٹروسکوپی: سل کے مخmoں کی ہم آہنگی کو اندازہ لگانے کے لئے سل سسپینشن کی امپیڈنس کو پیمائش کرتی ہے، جو حقیقی وقت میں آن لائن نگرانی ممکن بناتی ہے۔ تاہم، یہ خرابی کے ذریعے سے متاثر ہوتی ہے اور کیلنبریشن مشکل ہے۔

بائوسینسرز: سل کے اندر سے یا پیریپلاسم سے ریسیدہ مرکبات کا پتہ لگا سکتے ہیں، لیکن ان کے پاس سینسر رجینریشن کی مشکلات جیسے مسائل ہیں۔

چمک اور گھنtranسی کی پیمائش: تجزیہ میں سستے اور تیزی سے تجزیہ کرتے ہیں، لیکن منافع کی کمی ہوتی ہے اور جजمنٹ کے لئے ملٹی بیچ ڈیٹا کو دیکھنے کی ضرورت ہوتی ہے۔

سل کی ہم آہنگی پر تاثرات والے عوامل

استرینج انجینئرنگ: ژنیٹک انjینئرنگ کے ذریعے OM کی ہم آہنگی کو بدل دیتا ہے، جیسے لائیپوپروٹین ژنز کو موٹی کرنا، لیکن یہ استرین کے رُوٴث کو متاثر کر سکتا ہے۔

انڈیسڈ سٹریس: rیکمبائنٹ پروٹین کی بڑھ ٹی کی وجہ سے میٹابولک بار واقع ہوتا ہے، جو سل فزیولوژی کو متاثر کرتا ہے۔ لہذا، بیان سطح کی معقول تنظیم کی ضرورت ہے۔

سبسٹریٹ فیڈنگ ریٹ: دونوں زیادہ سے زیادہ اور کم سے کم فیڈنگ ریٹ سل لائسیس اور OM کی ہم آہنگی کو متاثر کرتے ہیں۔

درجہ حرارت اور ہوائیات: زیادہ درجہ حرارت اور کم آکسیجن دستیابی مزید عبارت کے تنازع اور OM رچنے کو بڑھاتی ہے، لیکن خاص اثرات مختلف ہوتے ہیں۔

آسموٹکس: پیریپلاسمک پروٹینز کو نکالنے کے لئے استعمال ہوتے ہیں لیکن ان کا استعمال سل کی جاندگی کو متاثر کرتا ہے، جس سے ان کے استعمال کو محدود کردیا جاتا ہے۔

نتیجہ: مستقبل کی تحقیق ممبرین ترمیم کے مکانزمز اور شرائط میں عميق داخلہ کرنے کی ضرورت ہے تاکہ سیلوں کی ممبرین کی تکملت کو مضبوط طریقے سے کنٹرول کیا جا سکے۔ نگرانی کے طریقوں کو بہتر بنانا، اور مؤثر عوامل کو تحلیل کرنا منصوبہ بندی کی کوالٹی میں بہتری لائے گا، جو بیوسافٹی کی صنعت کو آگے بڑھانے میں مدد کرے گا۔

ہم عالمی سطح پر اداروں یا انفرادی شراکت دار تلاش کر رہے ہیں۔ ہم صنعت میں سب سے مضبوط تعوض پیش کرتے ہیں۔ اگر آپ کو کسی سوال کی ضرورت ہو تو مکمل طور پر ہمارے ساتھ رابطہ کریں [email protected]