پی ڈی این اے کی پیداوار کو بہتر بنانے کے طریقے

پلاسمڈ ڈی این اے (پی ڈی این اے) کی پیداوار جینیاتی بحالی پر انحصار کرتی ہے، جس میں ہدف کے جین اور دیگر عناصر کو جوڑنا شامل ہے تاکہ ہم آہنگی سے بند سرکلر ڈھانچہ تشکیل دیا جا سکے۔ کی اعلی سیل کثافت ابال Escherichia کولی اور تطہیر پی ڈی این اے پیدا کرنے کے اہم طریقے ہیں۔

سیل اور جین تھراپی (CGT) اور mRNA کی ترقی نے وبائی امراض کو روکنے اور نایاب بیماریوں کے علاج کے لیے مزید امکانات پیدا کیے ہیں۔ CGT اور mRNA کی صنعتی پیداوار کی ضرورت ہے۔ اعلی معیار کا پی ڈی این اے. لہذا، کی مرضی کے ابال E. کولی اور pDNA کی اعلی پیداوار CGT اور mRNA ویکسینز/دوائیوں کی لاگت کی تاثیر کے لیے اہم ہیں۔

1. پی ڈی این اے کی بڑھتی ہوئی مانگ

US Plasmid DNA مینوفیکچرنگ مارکیٹ کی رپورٹ کے مطابق، CGT مارکیٹ 7.2 میں USD 2023 بلین سے بڑھ کر 23.3 میں USD 2028 بلین ہونے کی توقع ہے۔ اس کے علاوہ، جین تھراپی CGT کی غالب سمت بن جائے گی۔ CGT علاج کی بڑھتی ہوئی تعداد کو مارکیٹ میں لانچ کرنے کے لیے منظور کیا جا رہا ہے، اور مزید پائپ لائنیں طبی مرحلے میں داخل ہو رہی ہیں۔ نتیجے کے طور پر، پی ڈی این اے کی مانگ بڑھ رہی ہے۔

CGT علاج کے علاوہ، pDNA mRNA ویکسینز کی تیاری کے لیے ایک ضروری خام مال ہے۔ متعدی امراض کی ویکسین، کینسر کی ویکسین، اور نایاب بیماریوں کے علاج کے شعبوں میں mRNA ٹیکنالوجی کی مسلسل جدت کے ساتھ، pDNA کی مانگ بھی تیزی سے بڑھے گی۔

2. پی ڈی این اے کی پیداوار کو بہتر بنانے کے طریقے

پلاسمڈ ڈی این اے کی بڑھتی ہوئی مانگ کے ساتھ، موجودہ ٹیکنالوجی کی ترقی کی توجہ پی ڈی این اے کی پیداوار کو بہتر بنانے کے لیے ابال کی حکمت عملیوں کو بہتر بنانے پر ہے۔ اپ اسٹریم پروسیس ڈیولپمنٹ کی کلیدی شرائط میں کلچر میڈیم کے اجزاء، درجہ حرارت، پی ایچ، تحلیل شدہ آکسیجن (DO)، مخصوص پیداواری شرح، اور فیڈ بیچ کی حکمت عملی شامل ہیں۔

ثقافت کا ذریعہ: کے ابال کے لیے ثقافت کا ذریعہ E. کولی پلاسمڈ کی پیداوار میں استعمال کیا جاتا ہے عام طور پر ایک نیم مصنوعی ذریعہ ہے. یہ کاربن کے ذرائع، نائٹروجن کے ذرائع، غیر نامیاتی نمکیات اور ٹریس عناصر پر مشتمل ہے۔ ان میں کاربن اور نائٹروجن کے ذرائع کی اقسام کی نشوونما کے لیے اہم ہیں۔ E. کولی اور مصنوعات کی جمع. عام طور پر استعمال ہونے والے کاربن کے ذرائع گلوکوز اور گلیسرول ہیں، اور نائٹروجن کے ذرائع میں نامیاتی اور غیر نامیاتی نائٹروجن کے ذرائع شامل ہیں۔ مزید برآں، ضرورت سے زیادہ کاربن سے نائٹروجن کا تناسب (C/N) بیکٹیریل تناؤ کی نشوونما کو سست کر سکتا ہے، جبکہ حد سے زیادہ کم C/N تناسب تیزی سے ترقی کو فروغ دے سکتا ہے لیکن مصنوعات کے جمع ہونے کو محدود کر سکتا ہے۔

درجہ حرارت: کی ترقی کے لئے زیادہ سے زیادہ درجہ حرارت E. کولی 37 ڈگری سینٹی گریڈ ہے۔ تاہم، زیادہ سے زیادہ مخصوص پیداوار کی شرح کو کم کرنے کے لیے بیچ کے ابال میں کم درجہ حرارت (30-37°C) استعمال کیا جا سکتا ہے، اس طرح پلاسمڈ کی نقل میں اضافہ ہوتا ہے۔ حرارت سے حساس پلازمیڈ کے لیے، درجہ حرارت کو 42 ° C تک بڑھانا پلاسمڈ کاپی نمبر کو دوگنا کر سکتا ہے۔

pH: کی ترقی کے لیے بہترین پی ایچ E. کولی 7±0.2 ہے۔ ابال کے شوربے کا پی ایچ عام طور پر ایسڈ بیس پمپ کے ذریعے برقرار رکھا جاتا ہے۔

DO: کے لیے اہم تحلیل آکسیجن ارتکاز کی حد E. کولی 20%-30% ہے۔ ناکافی تحلیل شدہ آکسیجن ایسیٹک ایسڈ کی ضرورت سے زیادہ پیداوار کا باعث بن سکتی ہے، جو بیکٹیریا کی نشوونما کو متاثر کر سکتی ہے اور یہاں تک کہ بیکٹیریل آٹولیسس کا سبب بن سکتی ہے۔ ضرورت سے زیادہ تحلیل شدہ آکسیجن آکسیجن زہر کا سبب بن سکتی ہے۔ تحلیل شدہ آکسیجن کو متاثر کرنے والے عوامل میں تحریک کی رفتار، ہوا کے اخراج کی شرح وغیرہ شامل ہیں۔

فیڈ بیچ کی حکمت عملی: پلاسمڈ کی پیداوار کے لیے اکثر فیڈ بیچ ابال کا انتخاب کیا جاتا ہے۔ سب سے پہلے، یہ اعلی سیل کثافت کے ابال کو حاصل کرنے کے لئے موزوں ہے ای کولی، زیادہ بایڈماس کے نتیجے میں، جو اعلی پیداوار کی بنیاد کے طور پر کام کرتا ہے۔ دوم، Escherichia coli کی ضرورت سے زیادہ تیزی سے نشوونما پلازمڈ کے استحکام کو متاثر کرتی ہے۔ فیڈ بیچ کا استعمال کرتے ہوئے محدود غذائی اجزاء کا اضافہ عقلی طور پر ترقی کی شرح کو کنٹرول کر سکتا ہے۔ E. کولی، اس طرح پلازمیڈ کی پیداوار میں اضافہ ہوتا ہے۔ DO-stat کنٹرول حکمت عملی عام طور پر پلاسمڈ ابال کے دوران فیڈ بیچ کو منظم کرنے کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ pH-stat حکمت عملی کی فزیبلٹی کی نشاندہی کرنے والی تحقیق بھی ہے۔

3. Yaohai Bio-pharma کی طرف سے فراہم کردہ خدمات

Yaohai Bio-Farma نے پلازمیڈ کی پیداوار کے لیے ایک پختہ پلیٹ فارم تیار کیا ہے۔ اس کے علاوہ، Yaohai Bio-Farma نے بنیادی کلچر میڈیم، فیڈ میڈیم، اور ابال کنٹرول کی حکمت عملی کو بہتر بنایا۔ 30 گھنٹے کے کاشت کے چکر کے اندر، پلاسمڈ کی پیداوار 1g/L سے زیادہ ہو جاتی ہے۔

اس کے علاوہ، Yaohai Bio-Farma مختلف پلازمیڈز اور میزبان بیکٹیریا کے لیے سنگل فیکٹر یا تجربات کے ڈیزائن (DoE) طریقوں کی بنیاد پر عمل کی اصلاح کے حل فراہم کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ Yaohai Bio-Farma کا مقصد اعلیٰ پلاسمڈ پیداوار اور معیار کے لیے کلائنٹس کی ضروریات کو پورا کرنا ہے۔

Yaohai Bio-Farma بھی فعال طور پر ادارہ جاتی یا انفرادی عالمی شراکت داروں کی تلاش میں ہے اور صنعت میں سب سے زیادہ مسابقتی معاوضہ پیش کرتا ہے۔ اگر آپ کے کوئی سوالات ہیں، تو براہ کرم بلا جھجھک رابطہ کریں: [email protected]