PDNA کے عمل کو بہتر بنانے کے طریقے

پلاس미ڈ ڈی این اے (pDNA) کا تولید وراثی دوبارہ تنظیم پر منحصر ہے، جو لکھنے والے ژن اور دوسرے عناصر کو جڑانے سے متعلق ہے تاکہ ایک کووالینٹیvely بند گول بنیادی ساخت تشکیل دی جاسکے۔ ایسچیریشیا کالی اور صاف کرنے کے ذریعے pDNA کا تولید کیا جاتا ہے۔

سل اور ژن تھراپی (CGT) اور mRNA کی ترقی نے مرضی معاونات کو روکنے اور نادر مراضیتیں درمانے کے لئے زیادہ امکانات فراہم کی ہیں۔ CGT اور mRNA کا صنعتی تولید کرنے کے لئے ضروری ہے بالقوه pDNA ۔ اس لئے، e. coli کی موثر فرمینگ ایچ کولی اور بالقوہ pDNA کی تولید cGT اور mRNA واکسائن/دواؤں کی لاگت کے لئے حیاتی اہمیت رکھتا ہے۔

1. pDNA کی متزايد تقاضہ

ریپورٹ کے مطابق، امریکہ کے پلاسمڈ ڈینا تولید بازار کے ذریعے، سی جی ٹی بازار 2023ء سے 7.2 بلین ڈالر سے بڑھ کر 2028ء تک 23.3 بلین ڈالر تک پہنچنا مقرر ہے۔ علاوہ ازیں، ژن تھراپی سی جی ٹی کی اہم رجحانیت بن جائے گی۔ بہت ساری سی جی ٹی تھراپیاں بازار پر منظوری حاصل کر رہی ہیں اور زیادہ سے زیادہ پائپ لائن کلینیکل فیز میں داخل ہو رہی ہیں۔ نتیجتاً، pDNA کی ضرورت بڑھتی ہوئی ہے۔

سی جی ٹی تھراپیوں کے علاوہ، pDNA ایم آر این اے ویکسینز کی تولید کے لیے ایک اہم خام مواد ہے۔ عفونیاتی بیماریوں کے ویکسین، کینسر ویکسین اور نادر بیماریوں کے علاج کے شعبوں میں ایم آر این اے ٹیکنالوجی کی مستقل اختراع کے ساتھ، pDNA کی ضرورت بھی تیزی سے بڑھے گی۔

2. pDNA کے عملیات کو بہتر بنانے کے طریقے

پلاس مڈ ڈی این اے کے لئے بڑھتی ت渴ان کے ساتھ، موجودہ ٹیکنالوجی کا ترقیاتی فوکس فرمینٹیشن کی راہروں کو بہتر بنانا ہے تاکہ pDNA کی حاصل کاری میں بہتری آجائے۔ اوپری پروسیس کی ترقی کے لئے کلیدی شرائط ثقافی مEDIUM، درجہ حرارت، pH، حل شدہ اکسیجن (DO)، خاص پیداوار دर، اور فیڈ-بیچ راہروں پر مشتمل ہیں۔

ثقافی مEDIUM: پلاس مڈ پیداوار میں استعمال کی جانے والی فرمینٹیشن کی ایچ کولی معمولی طور پر ایک نصف-مزید مEDIUM ہوتی ہے۔ یہ کاربن ذرائع، نایٹروجن ذرائع، غیر معدنی سنگین، اور تراشنا لیمنٹس سے مخلوط ہوتی ہے۔ ان میں سے، کاربن اور نایٹروجن ذرائع کے قسم ثقافت کے برآمدہ کے لئے اہم ہیں۔ عام طور پر استعمال ہونے والے کاربن ذرائع گلوکوز اور گلائسرول ہیں، اور نایٹروجن ذرائع میں عضوی اور غیر عضوی نایٹروجن ذرائع شامل ہیں۔ اضافے سے، انتہائی طور پر زیادہ کاربن-نایٹروجن نسبت (C/N) باکٹیریل سٹرین کے برآمدہ کو چھوڑ سکتی ہے، جبکہ انتہائی طور پر کم C/N نسبت برآمدہ کو محدود کر سکتی ہے لیکن تیز برآمدہ کو فروغ دے سکتی ہے۔ ایچ کولی اور مندرجہ بالا مEDIUM کے ذرائع کی وجہ سے پیداوار کی مقدار میں بہتری ہوسکتی ہے۔

درجہ حرارت : کے رُویت کے لئے اوسط دما ہے ایچ کولی 37°C۔ تاہم، نیچے کی دما (30-37°C) بیٹچ فریمینشن میں استعمال کی جاسکتی ہے تاکہ ماکسimum خاص پروڈکشن ریٹ کو کم کیا جائے، اس طرح پلاسمڈ ریپلیکیشن میں اضافہ ہوسکتا ہے۔ گرمی سے حساس پلاسمڈز کے لئے دما کو 42°C تک بڑھانا کپی نمبر کو دوگنا کرنے کے لئے انڈس کرسکتا ہے۔

pH : کے رُویت کے لئے اوسط pH ہے ایچ کولی 7±0.2۔ فریمینشن براف کا pH عام طور پر اسید-بیس پمپس کے ذریعے محفوظ رہتا ہے۔

کرنا : حل شدہ آکسیجن کی ضروری غیرت محدودہ برای ایچ کولی 20%-30% ہے۔ حل شدہ آکسیجن کی کمی بھاری اسیٹک اسید کی پیداوار کو زیادہ کرسکتی ہے، جو باکٹیریا کے رُویت پر اثر ورقام کرتی ہے اور یہ باکٹیریا کی خودکشی کا علت بھی بن سکتی ہے۔ زیادہ سے زیادہ حل شدہ آکسیجن آکسیجن مسمومیت کا سبب بن سکتا ہے۔ حل شدہ آکسیجن پر اثر والے عوامل میں مخلوطی کی رفتار، هوا دہی کی رفتار شامل ہیں، اغیر۔

فیڈ-باتچ استراتیجی : فیڈ-باتچ فریمینشن پلاسمڈ پروڈکشن کے لئے اکثر منتخب کی جاتی ہے۔ پہلے، یہ موثر ثقافت کے لئے عالی سیل گھنترفتاری کو حاصل کرنے میں مدد کرتی ہے ایشی کولی، جو نتیجہ میں زیادہ بائiomاس ہوتا ہے، جو کہ عالی تولید کی بنیاد بناتا ہے۔ دوسرا، اسچریشیا کولی کے بہت ٹھیلے روپ سے پھیلنے کا اثر پلاسمڈ کی ثبات پر ہوتا ہے۔ رestrictive نوکریوں کو fed-batch کے ذریعہ شامل کرنے سے نمایاں طور پر پلاسمڈ کی رویت کو کنٹرول کیا جا سکتا ہے۔ ایچ کولی ، اس طرح پلاسمڈ کی تولید میں بہتری آئے گی۔ DO-stat کنٹرول استراتیجی فیڈ بیچ کے دوران پلاسمڈ فریمینشن کو کنٹرول کرنے کے لیے عام طور پر استعمال ہوتی ہے۔ pH-stat استراتیجی کے استعمال کی ممکنیت کو ظاہر کرنے والی تحقیق بھی موجود ہے۔

3. Yaohai Bio-Pharma کے ذریعہ فراہم شدہ خدمات

Yaohai Bio-Pharma نے پلاسمڈ تولید کے لیے پکا منصوبہ تیار کیا ہے۔ اس کے علاوہ، Yaohai Bio-Pharma نے بنیادی ک lt کو، feed medium اور فریمینشن کنٹرول استراتیجی کو بہتر بنایا ہے۔ 30 گھنٹوں کے پرورش چکر کے اندر، پلاسمڈ کی تولید 1g/L سے زیادہ ہوتی ہے۔

البته، یاوہائی بائیو فارما مختلف پلاسمڈز اور میزبان باکٹیریا کے لئے واحد عامل یا تجربات کے ڈیزائن (DoE) طریقے پر مبنی عملیات کو بہتر بنانے کے حل فراہم کرنے میں صلاحیت رکھتا ہے۔ یاوہائی بائیو فارما کلینٹوں کے بالا پلاسمڈ تولید اور کوالٹی کے معیاروں کو پورا کرنے کی کوشش کرتا ہے۔

یاوہائی بائیو فارما عالمی سطح پر تنظیموں یا انفرادی شرکاء کو تلاش کر رہا ہے اور صنعت میں سب سے مضبوط تعوض کی پیشکش دیتا ہے۔ اگر آپ کو کسی سوال یا مسئلہ کی ضرورت ہو تو مکمل طور پر رابطہ کریں: [email protected]